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一种蜘蛛基因组DNA的简易提取方法 总被引:6,自引:0,他引:6
本文介绍了1种改进的蜘蛛基因组DNA的提取方法.通过与传统DNA提取方法的比较,本方法具有可在常温条件下进行、DNA得率高、简便、经济等优势. 相似文献
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《生物技术通报》2025,41(1)
【目的】为了应对日益增加的大规模遗传材料鉴定需求;急需建立一种快速、简易、高效、低成本的基因组DNA提取方法。【方法】根据水稻遗传鉴定的特点;对传统TPS法进行改进和简化。(1)将特制的钢珠加样条与全自动研磨仪结合使用;提高了研磨水稻叶片组织的速度;(2)使用TPS缓冲液室温研磨裂解;无需液氮冷冻研磨;(3)研磨后的组织匀浆仅需75℃水浴20 min即可完成裂解;(4)室温静置5 min后吸取粗提液上清5 μL至96孔PCR板内;使用排枪加入95 μL 灭菌的去离子水进行稀释;即完成基因组DNA的提取过程。【结果】简易TPS法提取基因组DNA的步骤减少至6步以内;省略了DNA沉淀、离心、洗涤、溶解等过程。提取过程简单、快速;可在30 min内完成96个样本的DNA提取。提取过程中使用的试剂种类较少且廉价易得、安全环保。通过优化DNA提取液的用量;用简易TPS法提取的基因组DNA开展的各类常规分子遗传鉴定的效果与CTAB法及传统TPS法相当。【结论】简易TPS法提高了水稻基因组DNA提取的效率;适合高通量的遗传鉴定。 相似文献
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一种从毛发中提取DNA 的简易方法 总被引:17,自引:4,他引:17
用PCR 缓冲液及蛋白酶K 在PCR仪上对单支毛囊进行消化, 可获得用于PCR反应的足量的DNA。还对几种从毛发中提取DNA的不同方法进行了比较,并对从毛干中提取线粒体DNA进行了讨论。 相似文献
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一种从鱼类肌肉组织中提取基因组DNA的简易方法 总被引:9,自引:0,他引:9
以泰山螭霖鱼、黄河鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿抽提法和蛋白酶K消化法提取基因组DNA,并对其进行紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的鱼类基因组DNA浓度为0.9-3.25μg/μL,D260nm/D280nm值为1.79-1.87,电泳条带整齐明亮,适合微卫星PCR扩增。因此,本方法能够从鱼类肌肉组织中获得较为纯净的基因组DNA,适于进一步的分子生物学研究之用。 相似文献
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介绍一种淀粉酶的简易取材方法高中《生物》(必修)课本第45页的演示实验,证明酶是生物催化剂。所用的酶,是选取萌发的小麦种子芽,与石英砂和蒸馏水碾磨后的过滤液。我们做此实验时改用人的唾液方法较简便。首先,准备好过滤装置,如漏斗、脱脂棉、试管等。然后让几... 相似文献
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为进行细胞膜的生物化学分析,必先分离出纯净的细胞膜.选用哺乳动物红细胞制备细胞膜是目前常用的方法,一般多在一步溶血法的基础上,用高速离心分离制备.由于高速离心机设备目前国内尚不普及,我们尝试在低速离心(4℃,1,200×g,离心45分钟)条件下,进行人红细胞影泡制备.所谓“影泡”,即哺乳动物红细胞溶血去除血红蛋白后,分离到的细胞质膜.成熟的哺乳动物红细胞中没有通常真核细胞所含的任何细胞器.经制备,容易得到纯净的细胞膜,并且材料来源方便,故红细胞影泡是目前研究细胞膜结构功能时常用的一种膜制剂. 相似文献
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我在植物学教学上也曾多次应用南瓜的茎,来作切片观察导管,手续总觉得还是麻烦,尤其让初中一年级的学生作徒手切片,更加困难,所以我就改用西瓜胎座部的输导束作为观察材料,手续十分简单但效果非常良好: 相似文献
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一种快速有效提取植物和真菌DNA和RNA的简易方法 总被引:2,自引:0,他引:2
本文利用一种真菌核酸的快速提取方法提取了3种真菌的DNA和RNA,并将该法略作改进用于烟草DNA和RNA的提取.同时,通过低温保藏试验评价核酸提取液和提取产物的稳定性和有效性;利用凝胶电泳、PCR和RT-PCR等方法比较分析核酸质量;并将提取效果与传统方法或试剂盒的提取效果进行比较,以分析其有效性.结果表明,改进后的提取方法是一种简单、方便和有效的实验方法,不仅可用于真菌也可用于植物DNA和RNA提取,用这种方法提取得到的DNA和RNA在低温保存条件下比较稳定,能较长时间保持其原有活性. 相似文献
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一种简便的海藻DNA提取方法 总被引:9,自引:0,他引:9
把包裹缠绕在大量粘性多糖中的海藻DNA提取出来是一个十分困难的。研究表明,DNA样品中的酸性多糖会抑制限制性酶切反应和PCR扩增,而海藻组织中主要的碳水化合物是硫多糖和羧酸多糖,而且比陆生植物的中性多糖更易水溶,使溶液高度粘稠,在DNA提取中很难去除... 相似文献
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本文介绍了一种大量提取细菌DNA的方法。该法是用60℃裂解菌体,以氯仿-苯酚去除蛋白,用Rnase去除RNA,用1倍体积95%乙醇沉淀DNA,省略了异丙醇沉淀步骤。而且该方法操作方便,对仪器要求不高。该法改进结果是:可稳定地得到50—60%的DNA回收率。可用于革兰氏阴性和阳性细菌的DNA提取。有些菌株用Marmur法和Zaslott法提取,DNA回收率在10%以下,采用本法仍能得到50%的回收率。每次提取的DNA量在毫克数量级。特别适合用于Tm法测定DNA G+C mol%含量所需DNA样品的制备。 相似文献
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以丝状真菌雅致枝霉(Thamnidium elegans)和深黄伞形霉(Umbelopsis isabellina)为材料,使用优化的CTAB法提取基因组DNA.改进后的方法使用液氮冻融以及玻璃珠振荡的方法代替了传统的液氮研磨,所需茵体量少,而得到的基因组DNA比用传统的CTAB法得到的基因组DNA产率高,纯度好、且步骤简单,适用于一次微量提取多个样品的基因组DNA.这种方法得到的基因组DNA可用于大部分分子生物学基本实验如PCR和DNA的酶切等. 相似文献
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一种提取银杏中DNA的方法 总被引:19,自引:1,他引:19
对改进的SDS和CrAB两种提取DNA的方法进行了比较试验,通过DNA浓度和纯度测定及琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示,用改进的SDS法可从银杏幼叶和愈伤组织中获得DNA,其浓度分别为0.867μg·μ 相似文献
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一种提取质粒DNA的改良方法 总被引:16,自引:1,他引:16
本文详细介绍了一种改良碱裂解法提取质粒DNA的方法,该法采用NH4Ac代替苯酚和氯份的抽提过程,得率高,质量好,完全达到了分子生物学常规实验的要求,如酶切、连接、转化大肠杆菌、PCR等,甚至用于序列测定和植物遗传转化,该法重复性好,操作简单、实用. 相似文献
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以丝状真菌雅致枝霉(Thamnidium elegans)和深黄伞形霉(Umbelopsis isabellina)为材料, 使用优化的CTAB法提取基因组DNA。改进后的方法使用液氮冻融以及玻璃珠振荡的方法代替了传统的液氮研磨, 所需菌体量少, 而得到的基因组DNA比用传统的CTAB法得到的基因组DNA产率高、纯度好、且步骤简单, 适用于一次微量提取多个样品的基因组DNA。这种方法得到的基因组DNA可用于大部分分子生物学基本实验如PCR和DNA的酶切等。 相似文献

