小麦根质膜H^＋—ATPase的部分纯化

以小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经ＴｒｉｔｏｎＸ１００和ＫＣｌ处理后,再用Ｚｗｉｔｅｒｇｅｎｔ３１４增溶Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ。ＳＤＳＰＡＧＥ结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为９４ｋＤ的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高１５．７倍。部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ可以水解ＡＴＰ,受Ｋ＋刺激,并被Ｎ,Ｎ′ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｍｉｄｅ（ＤＣＣＤ）抑制;ＡＴＰ水解活力被Ｎａ３ＶＯ４抑制９５％,但不被ＮａＮ３、ＮａＮＯ３和Ｎａ２ＭｏＯ４抑制。     

羟自由基对心肌线粒体膜的影响及硒的效应

由Ｈ２Ｏ２和ＦｅＳＯ４体系产生的羟自由基（ＯＨ·）作用于大鼠心肌线粒体后,其膜脂双层内产生了脂类自由基。在观测时间内,其脂类自由基与自旋捕捉剂形成的自旋加合物的电子自旋共振（ＥＳＲ）信号强度随着孵育时间的延长而加强。一定浓度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ—Ｍｅｔ）或Ｎａ２ＳｅＯ３可明显清除ＯＨ·并抑制脂类自由基的产生。在ＯＨ·的影响下,荧光探针ＤＰＨ在心肌线体膜脂中的荧光寿命和膜脂流动性的测试结果发生了明显变化。与此同时,心肌线粒体膜的能量转换过程（氧化磷酸化效率和呼吸控制率）也发生了显著的改变。１．０μｍｏｌ／Ｌ的Ｓｅ—Ｍｅｔ或２．３μｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ２ＳｅＯ３可明显拮抗ＯＨ·的上述影响。前者的作用更为显著。     

金属硫蛋白清除自由基及其对自由基引起的核酸损伤保护作用的研究

通过化学反应体系产生ＯＨ－和Ｏ自由基,采用荧光和化学发光检测体系,比较研究了不同亚型及不同结合金属的金属硫蛋白（ＭＴ）清除自由基能力的大小。结果表明,对于同一亚型,Ｚｎ结合ＭＴ清除自由基的能力大于Ｃｄ结合ＭＴ同一结合金属的ＭＴ,ＭＴ１清除自由基的能力大于ＭＴ２。通过比较ＺｎＭＴ１与谷胱甘肽（ＧＳＨ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）清除自由基的能力大小发现,ＺｎＭＴ１清除ＯＨ的能力是ＧＳＨ的１００倍,清除Ｏ自由基的能力分别是ＧＳＨ和ＳＯＤ的２５和０．０１倍。即ＭＴ是一种很好的ＯＨ自由基清除剂。以ＯＨ对核酸（ＤＮＡ）的损伤为例,研究了ＭＴ对核酸损伤的保护作用,其变化规律与上述结果相一致。     

氮离子注入对耐辐射异常球菌SOD活性的影响及其对Mn—SOD的诱导

研究了氮离子注入对耐辐射异常球菌（Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ）细胞内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的影响及其对ＭｎＳＯＤ的诱导。结果表明,当２０ｋｅＶ氮离子的注入剂量低于８×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２时,Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ中ＳＯＤ活性变化不大,当剂量在８×１０１４～６０×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２范围内时,ＳＯＤ的活性随着注入剂量的增大逐渐提高,但大于６０×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２时,则逐渐下降;加入对不同金属辅基的ＳＯＤ同工酶活性抑制剂Ｈ２Ｏ２和氯仿乙醇的研究表明,中高剂量下氮离子注入诱导的是Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ中ＭｎＳＯＤ活性的提高,在正常生理条件及小于８×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２的剂量下,Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ中ＳＯＤ总活性主要由ＦｅＳＯＤ构成     

三唑酮对绿豆幼苗叶片衰老的延缓作用

三唑酮处理可提高离体绿豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｒａｄｉａｔｕｓＬ．）幼苗叶片叶绿素和蛋白质含量。叶片衰老过程中超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和抗坏血酸过氧化物酶（ＡｓＡＰＯＤ）活性及抗坏血酸（ＡｓＡ）和还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量降低。２０ｍｇ／Ｌ三唑酮可提高ＰＯＤ、ＡｓＡＰＯＤ活性和ＡｓＡ、ＧＳＨ含量,对ＳＯＤ、ＣＡＴ活性无影响。丙二醛（ＭＤＡ）含量在叶片衰老过程中提高,并与ＰＯＤ、ＡｓＡＰＯＤ活性和ＡｓＡ、ＧＳＨ含量呈显著负相关,三唑酮可降低ＭＤＡ含量。表明三唑酮有提高植物对膜脂过氧化作用的保护能力,延缓叶片的衰老作用。     

铜锌超氧物歧化酶对几种羟自由基产生系统的影响

应用脱氧核糖降解法研究了ＣｕＺｎ－ＳＯＤ对几种·ＯＨ产生系统的作用机理．结果证明：ＳＯＤ对Ｆｅ（３＋）·Ｏ·Ｈ２Ｏ２系统中·ＯＨ的产生有明显的抑制作用,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它的抑制作用不大;在Ｆｅ（２＋）·Ｈ２Ｏ２和ＣＵ（２＋）·Ｈ２Ｏ２系统中,ＳＯＤ、失活ＳＯＤ和ＢＡＳ均能抑制·ＯＨ的产生;在Ｆｅ（２＋）·Ｏ系统中,ＳＯＤ对·ＯＨ产生作用不大,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它有明显的抑制作用．由此推测ＳＯＤ对·ＯＨ形成可能有三方面的影响：１．对Ｏ的清除作用,阻断Ｈａｂｅｒ－Ｗｅｉｓｓ反应;２．对金属离子的络合作用,降低·ＯＨ的产额;３．促进Ｈ２Ｏ２的积累,加快Ｆｅｎｔｏｎ反应．     

氮离子注入对耐辐射异常球菌SOD活性的影响及其对Mn-SOD的诱导

研究了氮离子注入对耐辐射异常球菌（Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ）细胞内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的影响及其对ＭｎＳＯＤ的诱导。结果表明,当２０ｋｅＶ氮离子的注入剂量低于８×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２时,Ｄ．Ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ中ＳＯＤ活性变化不大,当剂量在８×１０１４～６０×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２范围内时,ＳＯＤ的活性随着注入剂量的增大逐渐提高,但大于６０×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２时,则逐渐下降;加入对不同金属辅基的ＳＯＤ同工酶活性抑制剂Ｈ２Ｏ２和氯仿乙醇的研究表明,中高剂量下氮离子注入诱导的是Ｄ．Ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ中ＭｎＳＯＤ活性的提高,在正常生理条件及小于８×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２的剂量下,Ｄ．Ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ中ＳＯＤ总活性主要由ＦｅＳＯＤ构成     

LAK细胞中一种自由基清除剂——SLP的分离纯化与抗体制备

ＳＯＤ样蛋白（ＳＯＤ－ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＳＬＰ）是从ＬＡＫ 细胞中发现的一种具有自由基清除功能的蛋白．为阐明ＳＬＰ的生化特性和确定其蛋白序列或基因序列,采用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ层析从ＬＡＫ 细胞中得到部分纯化的ＳＬＰ,并采用ＩＥＦ等电聚焦电泳,活性染色,将含有活性蛋白的胶条直接免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠,制备抗血清并筛选得到多株有中和ＳＬＰ清除自由基活性的单克隆抗体．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ结果表明ＳＬＰ分子量约为６７ ｋＤ,并测得ｐＩ约为４．２．     

人SOD1基因在大鼠血管平滑肌细胞的表达及对抗氧自由基损伤的作用

本实验构建含人铜锌超氧化物歧化酶（ｈＳＯＤ１）基因的逆转录病毒载体,将其导入离体培养的鼠血管平滑肌细胞,观察ｈＳＯＤ１基因表达及其抗氧自由基损害作用,结果表明：（１）载体构建策略和方法正确,ｈＳＯＤ１基因可在靶细胞中高效稳定表达;（２）转化ｈＳＯＤ１的ＶＳＭＣｓ可对抗大剂量氧自由基对细胞的直接损伤作用;（３）小剂量氧自由基刺激ＶＳＭＣｓ增殖,而转化ｈＳＯＤ１的ＶＳＭＣｓ增殖反应受到抑制,本研究结果     

金属硫蛋白清除自由基及其对自由基引起的核酸损伤保护作用的研究

通过化学反应体系产生ＯＨ＾－和Ｏ＾－２自由基,采用荧光和化学发光检测体系,比较研究了不同亚型及不同结合金属的金属硫蛋白（ＭＴ）清除自由基能力的大小。结果表明,对于同一亚型,Ｚｎ结合ＭＴ清除自由基的能力大于Ｃｄ结合ＭＴ;同一结合金属的ＭＴ,ＭＴ１清除自由基的能力大于ＭＴ２。通过比较ＺｎＭＴ１与谷胱甘肽（ＧＳＨ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）清除自由基的能力大小发现,ＺｎＭＴ１清除ＯＨ的能力是ＧＳＨ的１０     

盐度和CO2倍增环境下碱蓬幼苗呼吸酶活性的变化

研究了生长在正常大气ＣＯ２和ＣＯ２倍增环境中的盐生植物碱蓬（Ｓｕａｅｄａｓａｌｓａ）幼苗呼吸酶活性对ＫＣｌ和ＮａＣｌ的反应．结果表明,在ＣＯ２倍增（７００μｌ·Ｌ－１）和正常大气ＣＯ２（３５０μｌ·Ｌ－１）下,３００ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ和ＮａＣｌ均能抑制琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）活性,而异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）活性为ＮａＣｌ抑制、ＫＣｌ促进;ＮａＣｌ和ＫＣｌ明显抑制细胞色素氧化酶（ＣＯ）和光呼吸中乙醇酸氧化酶（ＧＯ）、羟基丙酮酸还原酶（ＨＰＲ）活性;并指出在ＫＣｌ胁迫下,ＣＯ２使三羧酸循环（ＴＣＡＣ）的运行变慢,ＮａＣｌ胁迫下使其加快,ＴＣＡＣ运行限速步骤与ＭＤＨ无关,ＣＯ为盐对呼吸代谢影响的重要位点．另外,Ｋ＋、Ｎａ＋对蛋白表达的影响有差异,ＣＯ２可使盐胁迫下的碱蓬幼苗蛋白表达降低．     

中药复方“保康”的抗氧化与清除自由基作用

分别彩改良的ＩＢＡ分光光度法和肾上腺素自氧化法研究中药复方“保康”对辐射所致小鼠某些组织中ＬＰＯ含量及ＳＯＤ水平变化的影响;采用ＥＳＲ方法研究“保康”对羟自由基的清除作用。结果发现,“保康”能明显抑制辐照所致ＬＰＯ含量增高,并能提高组织中ＳＯＤ水平;ＥＳＲ研究表明“保康”对羟自由基具有良好的清除作用。     

人Mn—SOD基因结构

人Ｍｎ┐ＳＯＤ基因结构吕星孙志贤裴雪涛吴祖泽（北京放射医学研究所,北京１００８５０）关键词锰超氧化物歧化酶基因结构超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕ－ｔａｓｅ,ＳＯＤ）催化超氧阴离子自由基（Ｏ－·２）转变为Ｈ２Ｏ２和Ｏ２的歧化反应（２Ｏ－...     

生长抑素对羟自由基损伤的人胃粘膜上皮细胞系GES—1的影响

目的和方法：采用人胃粘膜上皮细胞系ＧＥＳ１细胞传代培养技术,利用Ｆｅ２＋与Ｈ２Ｏ２反应生成的羟自由基（ｈｙｄｒｏｘｙｌｒａｄｉｃａｌ,ＯＨ·）建立细胞损伤模型,探讨ＯＨ·损伤人胃粘膜细胞的机制,观察生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＳ）对ＧＥＳ１细胞抗ＯＨ·损伤的影响。结果：（１）ＯＨ·可直接损伤ＧＥＳ１细胞,表现为细胞存活率下降而细胞乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）漏出量增多;预先在细胞培养液中加入ＯＨ·特异性清除剂二甲基亚砜（５ｍｍｏｌ／Ｌ）,可预防该损伤。预先加入ＳＳ（０．０１ｍｇ／Ｌ,０．１ｍｇ／Ｌ,１．０ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ）对细胞存活率和细胞ＬＤＨ漏出量无影响;（２）加入ＯＨ·后,细胞丙二醛（ＭＤＡ）、氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）含量上升而还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量下降。以ＳＳ０．１ｍｇ／Ｌ,１．０ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ预处理,可部分减轻上述改变。结论：ＯＨ·可直接损伤ＧＥＳ１细胞,其机制与破坏细胞的巯基稳态及加重细胞的脂质过氧化程度有关;ＳＳ可通过维持细胞的巯基稳态,部分减轻ＯＨ·所致的ＧＥＳ１细胞脂质过氧化程度。     

Na_2SO_3对不同状态CF_1－ATPase活力的促进作用

Ｎａ２ＳＯ３对ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用与酶所处状态有关。ＣＦ０降低ＣＦ１对Ｎａ２ＳＯ３的亲和力和Ｎａ２ＳＯ３促进的最大反应速率。在Ｎａ２ＳＯ３作用下,膜上ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的活化能高于游离的。膜上和游离ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的γ亚基上二硫键的还原可以提高Ｎａ２ＳＯ３对酶活力的促进作用。Ｎａ２ＳＯ３对甲醇活化的ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用只有在甲醇活化的亚适浓度下才能充分表现出来。Ｎａ２ＳＯ３对Ｍｇ２＋抑制的解除作用因ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ处于不同活化状态而不同。     

亚硒酸钠对四氯化碳损伤草鱼肝原代细胞与肝组织的保护作用

不同浓度四氯化碳（ＣＣｌ４）对草鱼肝原代细胞的损伤实验中,ＣＣｌ４浓度为１０μｌ／ｍｌ可引起细胞血清中丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）逸出量与细胞破损率显著增高,培养液中添加亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）０．２μｇ／ｍｌ,则可降低ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ的逸出量,减轻细胞破损程度。Ｎａ２ＳｅＯ３保护实验中,Ｎａ２ＳｅＯ２＋ＣＣｌ４组预先腹腔注射（ｉｐ）０．１ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ连续三日,末次ｉｐＣＣｌ４混合液１ｍｌ／ｋｇ．ｂｗ,２４ｈ内肝组织超氧物歧化酶（ＳＯＤ）相对活性比ＣＣｌ４组提高达９１．５％,第七日仍提高达５４．５％,与对照组的水平基本接近;血清中丙氨酸氨基转氨酶（ＡＬＴ）水平逐渐降低。本实验还观察到Ｎａ２ＳｅＯ３可引起肝脂质过氧化物显著降低,肝微粒体蛋白含量与细胞色素Ｐ—４５０活性升高;组织切片观察显示肝组织损伤程度减轻,７２ｈ后细胞核增多。表明Ｎａ２ＳｅＯ３可提高草鱼肝清除自由基能力,增强肝脏解毒功能。     

含硒银杏叶清除羟基自由在的ESR研究

利用电子自旋共振技术（ＥＳＲ）研究了含硒银杏叶提取物对Ｈ２Ｏ２－Ｆｅ＾２＋体系产生的羟基自由基的清除作用。与ＳＯＤ、茶多酚相比,含硒银杏叶提取物对羟基自基也有很强的清除效果,增添了有实用价值的天然、无公害的清除羟基自由基的新资源。     

植物中的多酚物质对超氧物自由基的清除作用

芒果、番石榴、松、龙眼等叶片和绿茶中含有Ｏ２（超氧物自由基）的非酶促清除剂,仅０．５—１ｍｇ鲜重或０．２９ｍｇ茶叶就相当一个ＳＯＤ酶单位作用,热处理不能降低清除Ｏ２的能力．用显示酚类物质的喷洒剂（ＡｇＮＯ３－ＮＨ４ＯＨ）和显示ＳＯＤ同工酶带的ＮＢＴ法对电泳后的凝胶分别染色处理,对比显示结果,表明酚类物质与ＳＯＤ活性物质有相似的电泳行为,叶片中的酚类物质可能为非酶促清除Ｏ２的组份．人工合成的酚类化合物（对硝基酚、间苯二酚、愈创木酚）和从植物中分离的鞣酸等,在体外均能有效地清除Ｏ２．     

硒拮抗超氧阴离子导致的心肌线粒体膜损伤

由黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子作用于心肌线粒体后,其膜脂双层内产生了脂类自由基。在一定时间内,脂类自由基与自旋捕捉剂形成的加合物的ＥＳＲ信号强度随着孵育时间的增加而加强。１．０μｍｏｌ／Ｌ硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）或２．３μｍｏｌ／ＬｍＮａ２ＳｅＯ３可显著清除并抑制脂类自由基的产生。在的影响下,荧光探针ＤＰＨ在膜脂双层中的荧光寿合和膜脂流动性发生了明显改变。一定浓度的Ｓｅ－Ｍｅｔ或Ｎａ２ＳｅＯ３可明显拮抗的上述影响,前者的作用更为显著。     

中国海产刚毛藻科新记录

中国海产刚毛藻科新记录栾日孝张淑梅（大连自然博物馆大连１１６００１）ＴＨＲＥＥＳＰＥＣＩＥＳＯＦＣＬＡＤＯＰＨＯＲＡＣＥＡＥＮＥＷＴＯＣＨＩＮＡＬＵＡＮＲｉＸｉａｏＺＨＡＮＧＳｈｕＭｅｉ（ＤａｌｉａｎＭｕｓｅｕｍｏｆＮａｔｕｒａｌＨｉｓｔｏｒｙ...