猪血超氧化物歧化酶分离纯化工艺改进及其抗氧化活性研究

以新鲜猪血为原料,首次利用改进的新工艺提取分离超氧化物歧化酶,经过溶血,热变,丙酮沉淀,超滤浓缩,SephadexG-75凝胶过滤层析和DEAE-sepharose-fast flow离子交换层析纯化,冷冻干燥等步骤,得到高纯度酶,并对酶的相关性能进行研究。试验结果显示产品粗酶活性在3 000 U/mg左右,分别经SephadexG-75和DEAE-sepharose-fast flow层析纯化后,酶活分别达到5 585 U/mg和6 148 U/mg产品得率分别为13.4%和10.32%,SDS-PAGE凝胶电泳显示为单一条带达到电泳纯,其分子量在31 kD附近,其临苯三酚抗氧化活性明显。     

超氧化物歧化酶活性的肾上腺素自氧化紫外测定法

实验表明肾上腺素自氧化过程的325nm吸收峰远比480nm吸收峰高和稳定,并用超氧化物歧化酶(SOD)标准样品和人红细胞样品建立了SOD活性的肾上腺素自氧化紫外分光测定法(A₃₂₅)。方法简便、快速,比用480nm的方法更为灵敏,并有良好的定量性和重复性。     

发菜中超氧化物歧化酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用基因工程技术从发菜总DNA中克隆了一段的基因序列,该序列与基因库中已公布的编码地木耳（Nostoc commnue）超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为97%。将该基因插入含T7启动子质粒pET-32中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1 mmol·L^-1 IPTG诱导表达数小时后,产生较多的重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在。SDS-PAGE分析表明,在相对分子量约为22 kd的位置有一条明显蛋白质带。将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每毫克纯化蛋白约为2 550 U。对纯化后的蛋白进行高温胁迫研究,将该纯化蛋白在60℃高温下胁迫90 min后,其活性为原（未经胁迫）蛋白活性的85%。     

赤子爱胜蚓超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究

采用硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从赤子爱胜蚓整体细胞抽提液内分离得到纯的铜锌超氧化物岐化酶（Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ）。每１００ｇ蚯蚓得到的ＳＯＤ制品,总活力为１１１５０Ｕ,比活力为５１３８Ｕ／ｍｇ蛋白,回收率为２０％。铜锌超氧化物岐化酶呈淡蓝绿色,最大紫外吸收波长为２７０ｎｍ。测得该酶分子量为３３０００,亚基分子量为１６５００。该酶亚基由１５６个氨基酸残基组成,不含酪氨酸。     

超氧化物歧化酶两种邻苯三酚自氧化测定活力方法的比较

在同一反应条件下,以酵母SOD为原料,对2种邻苯三酚自氧化测定SOD的方法进行了比较,实验结果表明325 nm法测定的酶活力单位与420 nm法测定的酶活力单位的比值约为2.7,考察了不同浓度邻苯三酚对SOD活力的影响。     

镧对鲤鱼五种组织超氧化物歧化酶同工酶及酶活性的影响

将鲤鱼暴露于不同浓度的氯化镧溶液120 d,研究稀土元素镧对鲤鱼脑、肝胰脏、肾、鳃、肌肉5种组织超氧化物歧化酶(SOD)同工酶及酶活性的长期影响,结果表明:镧对SOD的影响表现出一定的组织差异性.在实验浓度范围内(0.01～5 mg/L),镧对肝胰脏、鳃、肌肉SOD均有明显抑制作用,且与对照组相比相差显著或极显著(P< 0.05或P< 0.01),而脑、肾SOD活性与对照组相比无显著性差异(P>0.05).同工酶电泳实验结果表明:镧能使鲤鱼肝胰脏、脑、肾、肌肉、鳃SOD酶带活性强弱发生明显变化,还能使肝胰脏SOD同工酶酶带缺失.     

植物超氧化物歧化酶（SOD）的研究进展

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)在需氧原核生物和真核生物中广泛存在,是活性氧清除系统中第一个发挥作用的抗氧化酶。植物正常代谢过程和在各种环境胁迫下均能产生活性氧和自由基,活性氧和自由基的积累引起细胞结构和功能的破坏。SOD岐化超氧物阴离子自由基生成过氧化氢和分子氧,在保护细胞免受氧化损伤过程中具有十分重要的作用。本文综述了SOD的功能、在细胞中的分布、表达调控和与植物抗逆性的关系。Abstract:Superoxide Dismutases (SODs) are ubiquitously expressed antioxidant enzyme in aerobic organisms and catalyze dismutation of superoxide anion to hydrogen and molecular oxygen,the first step in active oxygen-scavenging systems.SODs play a central role in protecting cells against the toxic effects of reactive oxygen species generated during normal cellular metabolic activity or as a result of various environmental stresses.This paper reviews the expression and regulation of Sod genes and their functional role(s) during development and in response to stresses.     

极谱氧电极法测定超氧化物歧化酶活性的改进

对SOD的极谱氧电极测定法做了如下修改:a.室温测定,b.酶活性用标准SOD标定,c.反应在磷酸缓冲液中进行,d.增大邻苯三酚的用量.改进后克服了易在电极薄膜表面产生气泡等问题,测定灵敏度及线性范围增大.     

超氧化物歧化酶活性测定的影响因素研究

以枯草芽孢杆菌黑色变种为材料．探讨了超氧化物歧化酶活性测定的影响因素。选用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性．考察细胞破碎条件、细胞保存形式、保存时间以及保存温度对SOD活性测定的影响。结论：细胞破碎条件、样品保存形式、保存时间、保存温度都对酶活性有较大影响。相对而言,保存温度和保存时间的影响比较大。SOD活性测定中以酶液形式低温保存,尽快检测活性为宜。