在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

焦性磷酸酶的组织化学显示法

甲) 硷性焦性磷酸酶(alkaline pyrophosphase)的显示法: 1) 新鲜组织片固定于冷的5%中性福尔马林液中(此液含有0.9%氯化钠)1小时。 2) 以0.9%氯化钠洗10—20分钟。 3) 冰冻切片(20—35微米),切片径入0.9%氯化钠中或酶作用基液中(Substrate solution)。 4) 切片入酶作用基液内,在37℃下作用3小时,基液之     

去氧核醣核酸,多醣类,蛋白质的三色染色

甲)材料及固定:哺乳类、两栖组织,包括甲状腺、肾、小肠、胃、睾丸;昆虫的精巢,肌组织;及数种植物组知,固定于 Carnoy 氏液,福尔马林液,Helly 氏液,或 Smith 氏液皆可。乙)试剂试剂 T:天青 A-schiff 液——溶0.5克天青 A(azureA)于100毫升漂白液内(见下)可保持数周,用前加100%偏亚硫酸氢钾(K-me(?)abisulfite)数滴。试剂Ⅱ:漂白液——1N盐酸5毫升;10%偏亚硫酸氢钾或钠5毫升;蒸馏水90毫升;新鲜制备。试剂Ⅲ:高碘酸液(periodic acid solu)——高碘酸0.8克;蒸馏水90毫升;0.2M醋酸钠10毫升;新鲜配制。试剂Ⅳ:硷性复红 schiff 液——根据 Stowell 氏法(1945)配制,溶液置冰箱内可保持数月。     

运动神经末梢(运动终板)制片法

运动神经末梢分布到骨骼肌纤维并和肌纤维紧密相贴,组成运动终板。运动终板呈卵圆形的板状隆起,一般长40—60微米,厚约10微米,大小可随肌纤维的粗细而改变。 1.取材蜥蜴、壁虎、蛇及幼年的哺乳动物的肋间肌。肌肉每块厚度3毫米左右。 2.固定组织人下列固定液呈透明。柠檬酸20克,葡萄糖7克,1％氯化金水溶液1毫升,蒸馏水100毫升 3.方法步骤 (1) 用洁净滤纸将固定后的组织吸干。 (2) 1％氯化金水溶液,浸30—60分钟(放置暗处)至肌肉组织呈金黄色为止。     

涡虫神经纤维的硫酸铜-硝酸银显示法

整体染色:(1)在10毫升福末林(普通的);45毫升95％乙醇;2毫升冰醋酸組成的混合剂內固定24—48小时。(2)不用洗滌,轉入70％乙醇內3—10天。(3)在蒸餾水內洗滌一小时。(4)在50℃下,在10％硫酸銅(CuSO_4·5H_2O)內浸3小时。(5)不經洗滌,在50℃下,轉入1％硝酸銀內1.0—1.5小时。(6)在蒸餾水內洗3分钟,連續三次,每次一分钟。(7)在40—45℃时水浴內,在下述显影剂內还原,显影剂配法:1％連苯三酚10毫升;56％乙醇(一般为60％)     

饲养草蛉的几种饲料

1.发面饲料 做馒头的发酵面头充分发透,以粘手为度,摊开、吹干,研细过筛。配方为: 发面干粉35克; 蜂蜜20毫升(或糖10克,蜂蜜10毫升); 水80毫升。 饲养中华草蛉成虫,产卵前期为3天,每雌平均产卵672—831粒,成虫寿命最长可达2个月。饲养叶色草蛉,大草蛉效果不理想。 2.酵母片饲料 配方:酵母片(医用)……25克;糖……10克;蜂蜜……10毫升;水……100毫升。 饲养中华草蛉成虫,在27℃恒温下,产卵前期4—     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。     

鸡的胚胎发育阶段透明标本的制作

1.药品、用具重铬酸钾、冰醋酸、甲醛、甘油等配制成混合液。玻璃杯、镊子等。 1 号液每克重铬酸钾加水100毫升(可适当多配些备用)。 2 号液冰醋酸175毫升、甲醛500毫升加水1850毫升。 3 号液 10％甲醛、2％甘油加88％的水。     

对弹性组织的选择性染色 (俄西印——新复红法)

1)切片脱蜡,入100%酒精.2)以俄西印——新复红(orcinol-new fuchsin)液于37℃染15分钟。染液配法为:新复红(new fuchsin)(C.I.,No.678)2克俄西印(orcinol)4克蒸馏水 200毫升上液煮佛5分钟,加37.2%三氯化铁溶液(ferricchloride)25毫升,再煮5分钟,待凉,过滤,其沉淀收集于滤约上,并须洗净晾干,将沉淀溶于95%酒精100     

用减压法固定处理草履虫

在制作草履虫玻片标本时,在常压下对草履虫进行固定处理,虫体容易收缩变形,效果不佳。采用抽真空减压的方法,对草履虫进行固定处理,可避免上述缺点,效果比较好。制作过程简述如下: 1.离心浓缩把含有草履虫的培养液,用2000—3000转离心5—10分钟,制取出浓缩的草履虫液备用。 2.分装处置取浓缩的草履虫液50—100毫升,倒入大培养皿(直径100—150毫米)内,并将皿放到真空干燥器内。另用指管或安瓶装满40％甲醛或     

消化系统实验

(一) 淀粉的消化 1.材料 5个长10厘米,直径1.5—2厘米的透析袋;5支口径大于透析袋的试管和5个塞子;Lugol氏碘溶液(即I-KI溶液)100毫升;可溶性淀粉溶液100毫升;唾液(2毫升唾液加2毫升水混合);1米长的线;若干小试管;5支滴管;Benedict氏溶液(简称班氏液)20毫升;葡萄糖液15毫升;淀粉糖化酶溶液20毫     

猕猴肝细胞的分离及培养

用浓度为50毫克/100毫升的胶原酶液,在体外无菌的条件下灌注分离猕猴肝组织块,所分离到的肝细胞活性率达88—91％。用含10％胎牛血清,0.2％牛血清白蛋白,1毫升/100毫升牛咦岛素的基础培养基(MEM),在37℃含5％CO_2:的培养箱中培养。细胞在塑料培养皿中贴壁伸展良好,培养一个月后,仍见有大量贴壁的肝细胞,它可满足弓形体的生长发育。     

对Бильшовский-Γросс氏浸渍法的一些应用上的意见

著者建议一种简单的染周围神经系及末梢的浸渍改良方法,操作如下:标本在5%硫酸镁(Mag·sulphate)液中约洗5—40分钟,并以15%中性甲醛固定,固定时间不少于7天(可保存甲醛中数月),水洗,冰冻切片。切片浸于10%硝酸银5—30分钟,移入20%酸性甲醛,在此液中勿超过5秒,迅速通过蒸馏水。切片放在2张滤纸间吸干(此步重要!),入10%硝酸银     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

绿色植物保存法的一点经验

在制作绿色植物浸渍标本时我们研究出下列方法可得满意的结果,兹介绍如后。保色液的配制:硫酸铜20克、浓盐酸2或3滴、水100毫升。将植物材料放入保色液中,如热至95℃左右,经半小时(视材料大小而略有增减)后,取出,在清水内充分洗净,然后放入5—10%福尔马林或70%酒精中保存即可。     

实验8 质粒DNA的提取

一、氯化铯超速离心提取法 1.在LB培养基(10克蛋白胨,5克酵母膏,10克氯化钠,15克琼脂粉,溶解于水后,用1N NaOH调节pH至中性,加水至1,000毫升,高压蒸汽灭菌)上划线接种含有待抽提的质粒的细菌。37℃培养过夜。如果质粒上带有抗性基因,则在培养基内加入相应的抗菌素,例如20微克氨苄青霉素/毫升,12.5—15微克四环素/毫升。 2.挑出单菌落接种在10毫升LB培养液(除不加琼脂粉外,成份与LB培养液相同)中,37℃培养过夜。     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

茶叶中咖啡碱的快速测定法

咖啡碱是茶叶中主要成分之一,测定方法较多,但各有不足之处。我们通过反复比较、试验,提出一种简便快速的氧化镁浸提-紫外分光光度法,现将测定方法介绍如下: (1)咖啡碱标准液:无水咖啡碱(卫生部药检所),熔点237℃,配制成20微克/毫升水液,在岛津LLV-200型双光束分光光度计上测定273nm处吸收值—A_0。 (2)茶叶中咖啡碱测定:茶叶0.5000克(过20目)加入氧化镁(分析纯)5克,蒸馏水40毫升,搅匀;     

实验15 DNA介导转移基因(DMGT)

1.配制试剂 100×磷酸缓冲液:Na_2HPO_4·7H_2O 0.49克。NaH_2PO_4·H_2O 0.7克,溶于100毫升水中,过滤除菌。—20℃贮存。Hepes缓冲液:Hepes(50mM)1.19克(分子量为238.3),NaCl(280mM)1.64克,溶于水中,用1N NaOH调节pH为7.05—7.10,加水至100毫升,过滤除菌。—20℃贮存。     

草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1