辣椒花药培养的胚状体分化及其与成苗率的关系

12个辣椒品种的花药培养的结果表明,所有品种均可诱导出胚状体,其中9个品种可获得健壮的再生植株。每一辣椒品种的适宜植物生长调节利配比不同。不同品种的胚状体诱导率和成苗率有差异。成熟的胚状体均能分化成苗,根先分化或停止发育的胚状体很少成苗。     

蓝莓离体叶片胚状体高效发生及其组织学观察

以高灌蓝莓试管苗叶片为外植体、以改良WPM为基本培养基,研究了外源激素TDZ、ZT及其组合对离体叶片胚状体发生的影响,同时也探讨了蔗糖浓度、水解酪蛋白、椰汁等对胚状体发生、丛芽形成的影响.结果表明:不同浓度的外源激素TDZ、ZT及其组合对胚状体的发生频率、丛芽的形成和生长起重要作用;蔗糖浓度对胚状体的发生及丛芽的生长影响较大,而添加有机质则对胚状体的发生及丛芽的生长没有明显影响.适合高灌蓝莓叶片胚状体发生及成苗的培养基为WPM TDZ 0.04 mg/L ZT 0.25～2.0 mg/L 蔗糖20～40 g/L,而培养基WPM ZT 0.5～1.0 mg/L 蔗糖20 g/L适合于丛芽继代生长.组织学观察表明,蓝莓叶片胚状体发生主要起源于叶上表皮细胞和部分叶肉细胞,可能为多细胞起源,历经多细胞原胚、原球胚、梨形胚、心形胚、子叶胚等发育阶段,并能直接发育成苗.     

甘蓝型油菜小孢子胚状体发生的细胞学观察

应用甘蓝型油菜ＤＨ系保６０４为材料研究小孢子胚发生过程,结果表明,在小孢子离体培养１～５ｄ内,随培养天数增加,小孢子的存活率迅速下降,部分小孢子培养后出现细胞膨大和分裂,并沿２－细胞。“ｆ”形３细胞,多细胞原体,胚柄球形胚,心形胚最终发育成鱼雷形胚,一般在心形胚阶段,胚柄脱离胚主体部分游离到培养基中,大多数膨大的细胞不能分裂或分裂后停止发育或发育异常。     

籼稻体细胞胚胎发生的组织学及细胞学研究

以成熟种子为外植体,在离体培养中研究了体细胞胚胎发生,组织学研究表明,愈伤组织是由成熟种子盾片的表皮吸收细胞首先发生的,随后从愈伤组织分化出胚状体。象水稻合子胚的结构一样,体细胞胚状体主要由盾片,胚芽稍及胚根组成,在胚状体内可以观察到不同发育时期的原胚,包括大量的单一的胚性细胞、二细胞、四细胞及分化程度不同的原胚以及一些畸形胚状体,从本实验可以初步认为由籼稻体细胞培养而获得的胚状体在结构上也有象合子胚一样的基本结构,并且是单细胞起源的。     

菜薹花药培养诱导胚状体的研究

分别以特早50、青梗菜心、9872和四九菜心(19)为供试材料,进行了基因型、温度、碳源等因素对菜心花药培养诱导胚状体影响的研究.结果 表明:不同基因型菜薹花药诱导率的差异显著,在改良B5固体培养基上特早50、9872、四九菜心(19)的诱导率依次降低,而青梗菜心诱导不出胚状体;不同温度的前处理对9872花药的诱导率也存在影响,其中以4℃低温1预处理幼花序1～2d和33℃(2温预培养24～48h的处理效果最佳;碳源对胚状体的诱导也有较大影响,其中蔗糖效果好于麦芽糖,且质量浓度为13%的蔗糖对特早50诱导率最高,而13%的麦芽糖诱导不出胚状体.     

籼稻体细胞胚胎发生的组织学及细胞学研究

以成熟种子为外植体,在离体培养中研究了体细胞胚胎发生,组织学研究表明,愈伤组织是由成熟种子盾片的表皮吸收细胞首先发生的,随后从愈伤组织分化出胚状体。象水稻合子胚的结构一样,体细胞胚状体主要由盾片,胚芽稍及胚根组成,在胚状体内可以观察到不同发育时期的原胚,包括大量的单一的胚性细胞、二细胞、四细胞及分化程度不同的原胚以及一些畸形胚状体,从本实验可以初步认为由籼稻体细胞培养而获得的胚状体在结构上也有象合子胚一样的基本结构,并且是单细胞起源的。     

油菜小孢子胚发生的超微结构和胚状体形态

应用透射电镜和扫描电镜分别研究油菜游离小了包子培养后细胞的超微结构和胚状体的形态。单核晚期小孢子经培养后,具有胚状体发生能力的细胞中央液泡消失,积累淀粉,含丰富细胞器。     

甘蓝型油菜小孢子胚状体发生的细胞学观察

应用甘蓝型油菜ＤＨ系保６０４为材料研究小孢子胚发生过程,结果表明,在小孢子离体培养１～５ｄ内,随培养天数增加,小孢子的存活率迅速下降,部分小孢子培养后出现细胞膨大和分裂,并沿２－细胞。“ｆ”形３细胞,多细胞原体,胚柄球形胚,心形胚最终发育成鱼雷形胚,一般在心形胚阶段,胚柄脱离胚主体部分游离到培养基中,大多数膨大的细胞不能分裂或分裂后停止发育或发育异常。     

甘蓝花药培养胚状体诱导形成影响因子研究

用甘蓝F1、F2和自交系S33个世代6种基因型材料进行甘蓝花药培养诱导胚状体形成影响因子研究。结果显示:(1)高浓度蔗糖对甘蓝胚状体形成具有显著的诱导作用,6%蔗糖浓度是甘蓝花药培养的最适浓度,其胚状体的诱导率最高达12.2%;(2)材料基因型是影响花药培养的主要因素,F2和F1代材料胚状体诱导效果好,且胚状体诱导率F2代(F2P192和F2P194)18.9%比F1代(F1S17和F1S13)17.1%较高,但差异不显著,自交系S3代材料很难诱导出胚状体;(3)B5培养基比MS培养基更适合甘蓝花药胚状体的诱导培养。结果表明,甘蓝F2代是其花药诱导培养胚状体的最佳基因型材料,B5 2.0 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L KT 6%Suc是甘蓝花药诱导培养胚状体的最适培养基。     

防风组织培养中畸形胚状体的发生和控制

采用组织培养和石蜡切片法,分析多种因素对防风畸形胚状体发生和发育过程的影响及控制。结果表明,诱导正常体细胞胚高频发生的培养基组合是：启动胚性愈伤组织的培养基是MS 0．5mg／L 2．4-D,蔗糖浓度3％;分化培养基是MS 1mg／L 6-BA 0．2mg／L NAA 0．5mg／L ABA,蔗糖浓度4％～5％;成熟培养基是MS培养基,蔗糖浓度3％。结论：一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素,细胞分裂素在体细胞胚的分化和发育过程中起协同作用;蔗糖浓度、ABA、接种方法以及适宜的培养条件和培养容器等均可有效降低畸形胚状体的发生率。     

凝固剂对水稻花药培养愈伤组织诱导的影响

本文初步研究了不同类型的凝固剂对水稻花药培养愈伤组织形成的影响。结果发现,用Gelrite、马铃薯淀粉、甘薯淀粉、可溶性淀粉代替琼脂可明显促进水稻花药培养愈伤组织的产生而尤以5.0%马铃薯淀粉为最佳。出愈率比琼脂增加5.2倍,达液体培养水平。以8个不同基因型,为材料研究发现,5.0%马铃薯淀粉作凝固剂,有7个材料出愈率高于对照,最高的BC 163比对照增加7.75倍,平均增加1.15倍。另外,以5.0%马铃薯淀粉作凝固剂代替0.8%琼脂可降低成本30%。因此,用马铃薯淀粉作凝固剂在水稻花药培养中可能具有潜在的应用价值。     

甲基磺酸乙酯对水稻花药离体培养效应的研究

本文以粳稻“105”、籼稻“华03"和“鄂早6号”为实验材料,研究了不同浓度化学诱变剂EMS处理对离体培养水稻花药中花粉细胞脱分化与再分化和培养初期花药呼吸作用的影响。结果表明,低浓度EMS能显著提高花药愈伤组织诱导率;高浓度EMS则有明显的抑制作用。EMS对培养初期花药呼吸作用的影响与花药愈伤组织诱导率之间存在明显的平行关系。     

基因型和培养条件对大麦花药培养的影响

不同基因型大麦(Hordeum vulgare)的花粉愈伤组织诱导率不同。带大麦黄花叶病抗性基因的品种、品系或F_1杂种的诱导率(8.83—14.21％)高于不带抗性基因的材料(1.04～6.25％)。MS基本培养基舔加2,4-D,1 mg/l,Kt0.1 mg/l,BA0.2 mg/l,生物素0.1 mg,其诱导率(平均11.0995)高于MS添加2,4-D3 mg/l和Kt0.1 mg/l的诱导率(6.33％)及MS添加2,4-D 1 mg/l和Kt0.1 mg/l的诱导率(8.21％)。接种后先15℃暗培养5天,再转入25℃暗培养,其产生愈伤组织的高峰期推迟2—4天,但诱导率却从对照的5.84％提高到11.59％;25℃暗培养与25℃光-暗交替培养,诱导率无显著差异。     

草莓花药培养获得无病毒植株的技术研究

以花粉发育为单核期的花药接种,在MS附加IAA 4ppm、K 2ppm、BA 2ppm的培养基上诱导愈伤组织,并可直接分化出“沙尔普斯”、“红岗利德”、“春香”3个品种的花药植株。稍加调整附加激素成分和浓度,可在“索非亚”、“宝交早生”、“戈雷拉”、“红衣”、“丽红”等品种的花药上直接经愈伤组织分化出植株。其中有“沙尔普斯”、“红岗利德”、“春香”、“宝交早生”、“索非亚”等5个品种的花药植株经过病毒检测确认不带SMoV、SCrV、SMYEV和SVBV4种病毒。对无病毒植株进行了田间对比试验,植株生长势和果实产量都明显超过对照品种。     

粳稻花药培养基优化试验研究

培养基的筛选研究,是提高花药培养率的关键问题之一。国内外不少研究人员进行了大量工作,取得了一定的进展。我们自1986年开始以 N_6培养基为基础,对培养基的各个组分进行全面的变量分析和主次因子的研究。我们已报道1987、1988年二个试验周期的结果。本文报道1989、1990年第三、四周期的试验结果。     

毒莠定作为外源激素促进水稻子房培养中胚状体的分化

用毒莠定(4-氨基-3,5,6-三氯-2-羧基吡啶)代替MCPA(2-甲基-4-氯苯氧乙酸)作为水稻未传粉子房培养中的外源激素,所诱导的助细胞无配子生殖胚状体分化率大幅度提高,愈伤组织化的倾向大为减弱,并观察到在诱导培养基上直接出苗的现象。用N_6基本培养基附加3%的蔗糖、2毫克/升的毒莠定与500毫克/升的水解乳蛋白可获得较佳的培养效果。组织学观察表明在毒莠定的作用下,原胚多数是沿着接近体内合子胚正常分化的途径形成具根、芽的两极结构,而和MCPA所诱导的原胚不分化与愈伤组织化有很大的差异。讨论了毒莠定作为外源激素在植物组织培养中应用的潜力。     

苜蓿胚状体的分离及其发育过程中三种同工酶酶谱分析(简报)

目前,对胚状体发生过程中的生理生化研究表明,这一过程伴随有核酸、蛋白质等大分子物质合成速度的增加及与胚胎发生有关的特异性蛋白的合成;一些同工酶,如过氧化物酶、脂酶、细胞色素氧化酶和谷氨酸脱氢酶     

大花蕙兰茎尖组织培养及其形态建成的研究

以大花蕙兰(Cymbidium grandi,lorium)茎尖为外植体,在改良的Vacin和Went培养基上诱导形成了原球苹,并且在添加有1 mg/1BA的‘Vacin和Went培养基上获得了快速繁殖无性系,将原球茎转移到加有香蕉匀浆汁的Knudson c培养基上,很快长出叶片和根,形成完整的再生植株。较高浓度的BA(1.O mg/1)能促进原球茎的增殖;较低浓度的BA(O.4mg/1)能促进原球茎的分化。形态发生的显微观察表明原球茎来源于体细胞胚,它的发育过程与合子胚十分相似。     

初始培养条件对定兴芥小孢子胚胎发生的影响

本文探索了油菜花药培养中小孢子胚早期发育的适宜条件。花药分步悬浮法第一培养基的简化实验表明,小孢子胚在仅含有20%蔗糖的空白培养基上的诱导率(212%)与对照的(202%)无显著差异。这样,第一培养基便从原Keller培养基简化为不含大量、微量和有机元素而仅含有20%蔗糖的水溶液,并且,花药第一阶段的培养时间从原来的3—5天减少到1.5—2天。此外,研究了花药在蔗糖水溶液上的滞留时间对小孢子胚胎早期发育的影响。滞留36～48小时,小孢子胚的诱导率(135%)最佳。考察小孢子胚胎早期发育的状况与不同滞留时间的关系则发现,36—48小时内每100个活细胞里,膨大细胞约占70%。这表明,早期培养时,花粉只要膨大而不需分裂即可转入第二阶段培养,便可获得较高产率的胚状体。     

小麦花药培养中小孢子DNA合成的放射自显影研究

用放射自显影术研究小麦花药培养中小孢子的雄核发育,发现培养24小时后3H－胸腺嘧啶核苷掺入单核晚期小孢子,2．5天后营养细胞核中有3H－胸腺嘧啶核苷掺入,由A和B途径形成多细胞花粉的过程中,超始几次孢子体分裂,细胞的DNA合成是同步进行的。在多细胞花粉形成时逐渐变为不同步,生殖核的DNA合成不活跃,偶而能被标记上,个别合成DNA的生殖细胞形成类胚柄结构,当培养基中蔗糖浓度低（3％）时,培养早期小孢子内核的DNA合成正常进行,3H－胸腺嘧啶核苷比高糖浓度（9％）更易惨入小孢子,但经1－2次分裂后,核不再分裂,细胞壁不形成,所以3％的糖浓度中,多细胞花粉不能形成,主要不是DNA不能复制,而是细胞分裂和细胞壁的形成受阻所致。