不同花色紫斑牡丹的CDDP体系优化及其遗传多样性分析

利用CDDP（ Conserved DNA derived Polymorphism）分子标记方法,对47个不同花色紫斑牡丹品种的基因组DNA进行遗传多样性分析。结果显示：（1）采用正交实验设计,对影响紫斑牡丹CDDP PCR反应的引物浓度、DNA模板浓度两因素进行优化,优化后紫斑牡丹CDDP PCR反应体系为：总反应体系20 μL,其中包括2×Es Taq MasterMix酶（含染料）10 μL,10 pmol/μL引物1.5 μL,15 ng/μL DNA模板4 μL,ddH₂O 4.5 μL。（2）21条引物中,有19条产生了清晰的条带。19条引物共扩增出112条带,其中多态性条带 97条,占总条带数的 86.61％,多态性比例高。（3）UPGMA聚类显示,47个紫斑牡丹品种的聚类大体按照花色聚类,品种间遗传相似系数值在0.72~0.95,说明品种间相似度高,差异程度小。研究表明,CDDP分子标记方法适用于紫斑牡丹遗传关系分析,且特异条带的产生为深入研究紫斑牡丹品种鉴别提供理论依据。     

一种新的产虫茶昆虫——紫斑谷螟的生物学特性研究

本文首次对贵州省赤水地区新发现的一种主要产虫茶昆虫紫斑谷螟Pyralis farinalis Linnaeus进行了报道。结合野外调查和室内饲养的方法,对紫斑谷螟的形态特征和生物学特性进行了较为系统的研究。结果表明,紫斑谷螟在赤水地区一年发生3代,以老熟幼虫在吐丝连缀茶叶形成的隧道内越冬。其中以越冬代历时最长,共经历约200d,越冬代成虫翌年4月下旬开始羽化;第1代历时最短,从5月上旬至7月上旬,仅经历约60d;第2代历时较长,从7月中旬到9月下旬,共经过约90d。     

赤霉素和温水浸种对紫斑牡丹种子下胚轴萌发及其种胚解剖结构的影响

以紫斑牡丹种子为试验材料,采用不同浓度（0、100、300、500 mg/L）赤霉素（GA₃）浸种和不同温度温水浸种（25、30、40和50℃）处理,考察各处理种子生根率的变化,并通过透射电镜观察不同生根发育时期种子种胚超微结构,探究赤霉素和温水浸种处理解除紫斑牡丹种子休眠进程中种胚超微结构变化以及这种变化与休眠解除的相关性。结果表明:（1）GA₃和温水浸种均明显提前了紫斑牡丹种子生根时间,并以300 mg/L GA₃和40℃温水处理的生根效果最好,分别较对照提前14.7 d和16.0 d,生根率分别达62.33%和67.00%。（2）光学显微镜观察发现,GA₃、温水浸种处理较对照组紫斑牡丹种胚子叶的上、下表皮细胞形状及排列方式无明显影响,但其厚度均变薄,维管束结构明显,以300 mg/L GA₃和40℃温水浸种处理生根效果最佳。（3）透射电镜观察发现,在各GA₃浸种和温水浸种处理下,紫斑牡丹种子萌发前期,种胚子叶脂类物质出现降解现象,脂体呈大小不一的圆形或块状分布在细胞壁周边,数量明显减少,细胞核明显,核仁清晰,出现少量线粒体,细胞质内开始有蛋白质积累,在液泡的周围形成蛋白质沉积物;在种子萌发后期,种胚子叶细胞内物质稠密,脂体已降解融合成较大块状,细胞中储存的营养物质基本降解完全,内质网、高尔基体、线粒体等细胞器出现,结构更加完整,表明此时细胞内物质代谢活动加强,种子休眠解除,且300 mg/L GA₃、40℃温水浸种处理种子种胚子叶结构变化最为明显。研究发现,300 mg/L GA₃浸种和40℃温水浸种均可显著提高种子的萌发率,且40℃温水浸种的效果更好,在实际生产中建议使用温水浸种法。     

‘伦晚脐橙’成熟果实及其留树保鲜果实的香气成分分析

采用顶空固相微萃取-气质联用技术测定了‘伦晚脐橙’成熟果实和留树保鲜果实的香气成分,结果表明,成熟采收（3月30日）后的果实中香气物质有28种,占挥发性物质总量的97.69%,主要成分为烃类、醛类、醇类、酯类和酮类化合物;而留在树上保鲜（5月7日）的果实中香气成分仅检测到15种,占挥发性物质总量的87.11%,特征香气成分D-柠檬烯和β-月桂烯明显减少,且未检测到醇类和酮类化合物,但巴伦西亚桔烯的相对含量剧增,相对含量高达20.27%,成为主要香气物质之一。     

制首乌醇提物及其主要成分大黄素对斑马鱼非酒精性脂肪肝的治疗作用

研究制首乌醇提物及其主要成分大黄素对斑马鱼非酒精性脂肪肝疾病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)的治疗作用。选取野生型斑马鱼若干,随机均分为对照组、模型组、制首乌醇提物(RPMP)组和大黄素(emodin)组,于胚胎受精后5天,对照组给于普通饲料AP100,模型组给予2 mg/mL蛋黄粉(EY powder),制首乌醇提物组分别给予2 mg/mL蛋黄粉与低剂量组(1 mg/mL)、中剂量组(1.5 mg/mL)、高剂量组(2 mg/mL),大黄素组分别给予2 mg/mL蛋黄粉与低剂量组(0.25μg/mL)、中剂量组(0.5μg/mL)、高剂量组(1μg/mL)。72 h后观察斑马鱼存活率和体重、体长、BMI的变化■,用整体油红染色评判脂肪肝发生率,石蜡切片观察肝组织病理形态,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)试剂盒判断斑马鱼体脂含量。制首乌醇提物组与大黄素组能显著降低非酒精性脂肪肝斑马鱼的死亡率、BMI、TG含量,并显著改善斑马鱼幼鱼肝脏脂质沉积情况(P<0.05)。由此可见制首乌醇提物与大黄素可有效治疗斑马鱼NAFLD,且大黄素可能为制首乌治疗NAFLD的主要有效成分。     

桃及其主要近缘种花挥发性物质成分的鉴定与香气特征分析

以光核桃029-1、红根甘肃桃1号、帚形山桃、新疆黄肉、桃形扁桃、中碧早香菊、早上海水蜜和探春为试验材料,利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术（HS-SPEM-GC-MS）检测桃花挥发性物质成分,并通过气味活性值（OAV,odor activity value）、主成分分析（PCA,principal component analysis）和正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA,orthogonal partial least squares-discriminant analysis）鉴定不同样本的特征香气和主要香气物质。结果表明,8份桃花中共鉴定出14类471种挥发性物质,其中物质种类较为丰富的是杂环化合物、萜类和酯类,分别为78种、77种和66种,而物质含量较高的是杂环化合物、酮类和醇类物质,总含量分别为4473460.22μg/kg、539998.06μg/kg、480975.72μg/kg。基于OAV值,以变量投影重要性（VIP,variable importance in projection）> 1,P<0.05为标准,筛选到14种关键差异挥发性物质,其中丁基苯的VIP值最高（2.72）,其次是大马士酮（2.50）。通过香气特征分析,发现青草香、脂肪香和蜡味是桃花中主要的香气特征,其中光核桃029-1的香气类型以青草香、脂肪香、蜡味、甜瓜香、黄瓜香为主,坚果香为辅;红根甘肃桃1号、中碧早香菊的香气类型以青草香、脂肪香、蜡味、甜瓜香、黄瓜香、果香为主,清新、药草香、坚果香为辅;帚形山桃的香气类型以青草香、脂肪香、蜡味、甜瓜香、黄瓜香、果香、坚果香为主,清新、药草香为辅。     

一种灰茶尺蠖高效引诱剂的研制及其田间防效评价

为研制有效诱杀重要害虫灰茶尺蠖雌、雄成虫的性信息素/植物源信息物复合型性诱剂,选源自茶梢和茶花挥发物的30个主要成分,分别配成10^-6 g/mL、10^-4 g/mL和10^-2 g/mL液体石蜡溶液作味源,检测其引起1日龄灰茶尺蠖雌、雄成虫的EAG反应值。结果表明：（1）每种味源的3个剂量处理皆引起明显的EAG反应;随着味源浓度增加,EAG反应值显著增大;（2）引起的雌、雄成虫EAG反应值相近,差异不显著;（3）芳樟醇、反-2-己烯醛、顺-3-己烯-1-醇、己醇、苯乙醇和6-甲基-5-庚烯-2-酮的每个剂量处理引起强烈的EAG反应。将这6种EAG活性成分与灰茶尺蠖2个主要的性信息素成分Z,Z,Z-3, 6, 9-十八碳三烯和Z,Z-3, 9-6, 7-环氧-十八碳二烯配成数个备选的复合型性诱剂,载于羊毛毡细条上、塑封、制成诱芯,在茶园中检测其引诱活性,发现诱效最优的复合型性诱剂在每个诱芯上组成为：6种EAG活性成分各2 mg、Z,Z,Z-3, 6, 9-十八碳三烯0.4 mg、Z,Z-3, 9-6, 7-环氧-十八碳二烯0.6 mg、抗氧化剂——2, 6-二叔丁基-4-甲基苯酚1 mg、正己烷100μL。此外,使用土黄、荧光黄、米黄、素馨黄、桔黄、土褐、墨绿、芽绿、草绿、荧光绿、天蓝、大红和纯白等13种色板诱杀灰茶尺蠖成虫,发现其偏嗜暗黄色,以土黄色效果最佳。遂将该诱芯载于土黄色粘板上组成诱捕器,诱杀防治灰茶尺蠖主害代——第3代,试验程序：在第2代羽化始盛期用诱捕器诱杀成虫以减少交尾几率而压低第3代幼虫数,在第3代初龄幼虫期喷施2.5%联苯菊酯、茶尺蠖核型多角体病毒·苏云金杆菌悬浮剂（1×10～4 PIB·2000 IU/μL）,接着定期调查三者的防治效果,结果表明复合型性诱剂的防效显著优于后两者。该研究为灰茶尺蠖的绿色防控提供了可敷应用的技术产品。     

银屏牡丹——花王牡丹的野生近亲

ＴｒｅｅｐｅｏｎｙｈａｓｂｅｎｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｆｏｒｔｈｏｕｓａｎｄｓｏｆｙｅａｒｓｉｎＣｈｉｎａ,ａｎｄｎｏｗｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｔｏｃｏｕｎｔｒｉｅｓｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｅｒｅｇｉｏｎ．Ｉｔｉｓｃａｌｅｄａｓ“Ｋｉｎｇｏ...     

牡丹二氢黄酮醇4-还原酶基因PsDFR1的克隆及表达分析

二氢黄酮醇4-还原酶（DFR）是花色素苷合成途径中的关键酶,在植物花色的形成过程中起重要作用。本研究以牡丹品种‘彩绘’为试材,采用RT-PCR和RACE方法从花瓣中获得了一个牡丹DFR基因cDNA全长,命名为PsDFR1,GenBank登录号为HQ283448。序列分析结果表明,PsDFR1全长1242bp,包含一个长为1095bp的开放阅读框,编码364个氨基酸。生物信息学分析显示该基因编码的蛋白具有典型的DFR蛋白功能结构域,包括多个保守的短链脱氢/还原酶家族的特征位点,属于NADB_Rossmann超家族。氨基酸序列比对和系统进化树分析表明,PsDFR1与葡萄、棉花、毛果杨、梨等植物的DFR相似性都在75%以上。实时荧光定量PCR分析表明,PsDFR1在花色素大量积累的花瓣中表达量最高,其次是萼片和雄蕊,再次是叶片,在心皮中表达量最低。     

Paeonia suffruticosa Andrews 的界定，兼论栽培牡丹的分类鉴定问题

栽培牡丹一直称为Paeonia suffruticosa Andrews。 在把作丹皮用的栽培牡丹（凤丹）描述为新种P. ostii后,观赏的栽培牡丹仍然被统称为P. suffruticosa。 但在P. suffruticosa复合体内, P. rockii, P. jishanensis, P. qiui 和P. suffruticosa ssp. yinpingmudan 等野生类型相继被描述并得到承认。于是,有人提出了栽培牡丹多元发生的观点,同时也出现了P. suffruticosa “是牡丹组数     

牡丹试管苗玻璃化的研究

以MS为基本培养基,研究品种、琼脂、6-BA、大量元素、蔗糖、光照等因素对牡丹试管苗玻璃化的影响。结果显示：不同品种的牡丹试管苗在组织培养的过程中,出现不同程度的玻璃化,增加培养基中琼脂浓度、降低细胞分裂素6-BA的浓度、降低大量元素的浓度和增加光照强度或采用自然光照均可以有效地降低试管苗玻璃化。     

牡丹染色体的Ag-NORs和Giemsa C带的研究

本文首次报道了紫斑牡丹和栽培牡丹5个重要品种的Ag-NORs和Giemsa C带带型。所有材料的核型组成均为2n=2x=10=6m+2sm+2st。多数材料具6个Ag-NORs,但在染色体上的分布位点不同。C带的差别主要表现在第1、2、3对染色体上。以上两种核学特征,具有品种的特异性。分带所显示的端(T)带和Ag-NORs的数目及分布基本一致。牡丹染色体的端带,本质上是N带;常规染色所显示的所谓随体,实际上是瑞部核仁组成区(NORs)。此外,对牡丹的细胞学研究技术进行了讨论。     

丛枝菌根真菌对牡丹生长及相关生理指标的影响

以采自山东省菏泽牡丹园的牡丹'凤丹'种子为试材,采用盆栽的方法研究了接种丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizal,AM)真菌Glomus mosseae、Glomus versiforme和Glomus intraradices对牡丹幼苗生长及生理生化特性的影响.结果表明:(1)不同AM真菌的侵染率不同,并以G.mosseae的侵染率最高,为48.3%;(2)AM真菌能够促进牡丹幼苗生长,接种G.mosseae的植株干重比对照显著提高了69.5%;(3)AM真菌能够提高牡丹的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白、矿质元素(N、P、K)含量和硝酸还原酶活性,并对可溶性蛋白含量和硝酸还原酶活性的影响达显著水平.(4)植株总干重与菌根侵染率、硝酸还原酶活性、叶绿素含量呈极显著正相关,与可溶性糖、可溶性蛋白含量呈显著正相关.研究发现,G.mosseae是最适宜牡丹接种的优良菌种.     

矮牡丹的树干解析

通过矮牡丹的树干解析,得出了以下结论：矮牡丹的地径的增长速度、株高的增长速度在植株生长３─９年时最快,以后逐渐变慢;株高生长的成熟龄为６─１２年,在植株生长９年以后,几个标本的生长速度都明显降低;在材积的增长过程中,１６年株龄的标本仍然没有达到成熟龄,连年生长曲线和平均生长曲线没有交点,表明矮牡丹的生长仍然处于旺盛阶段;立地条件对植株的生长也有着较大的影响,在立地条件较好的区域,植株明显生长比较快,而在立地条件较差的区域生长也差。     

甘肃紫斑牡丹品种与中原牡丹品种银带和Giemsa C带的研究

分别对甘肃紫斑牡丹品种和中原牡丹品种进行了核型,Ａｇｇｋｐｈｔ Ｇｉｅｎｓａ Ｃ带的研究。发现紫斑牡丹品种核型组成为２ ＝１０＝８ｍ＋２ｓｔ;中原牡丹品种核型组成为２ｎ＝１０＝６ｍ＋２ｓｍ＋２ｓｔ。ＧｉｅｍｓａＣ带带型显示,供试品种均能显示染色体端带,但天染色体端带的数目及分布位置上具品种特异性。     

牡丹品种‘胡红’开花和衰老过程中花瓣脂肪酶活性的变化

以牡丹品种‘胡红’为材料,采用改良铜皂法测定了牡丹花发育过程中花瓣脂肪酶活性的变化。结果表明,牡丹花瓣粗脂肪酶作用的最适pH为6．5,最适温度为35℃。OP乳化剂提高酶活性3．5倍,Mg2＋对酶活性没有影响。露色期（I级）脂肪酶活性和游离脂肪酸含量最高,之后各时期酶活性逐渐下降并维持在低水平;而游离脂肪酸含量在盛开期（V级）有一小高峰。