小型昆虫整体玻片标本的简便制法

1.处死固定将蚊、蚜等置于70%酒精中杀死固定. 2.脱脂将材料装人试管中注入适量70%的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右. 3.清水漂洗:脱脂后用纱布过滤碱液,用蒸馏水或清水漂洗2-3次,再用蒸馏水将材料浸泡半小时左右. 4.染色用75%酒精、酸性品红饱和液染     

蚜虫整体玻片标本制作方法

<正> 在制作微小昆虫整体玻片标本时,其失败的原因多数出在整姿这个环节上。为此,笔者摸索出一种较为理想的方法。 标本采集与杀死固定 将蚜虫采回,放入70%的酒精中杀死固定备用。 水浴脱脂 材料装入指形管中,注入适量7%的KOH溶液水浴脱脂,水开后用文火约15分钟。腹部特别膨大者,用软毛笔轻压腹     

用蛋白酶法制作家兔骨骼标本

用蛋白酶分解软组织法,制作骨标本,省时、省力,清洁卫生,能保持骨质完好。它既可制作分离骨标本,也可制作保留有韧带、软骨及关节囊的全身骨骼标本。我们用的蛋白酶是北京酶制剂厂生产的中性蛋白酶1398。制作方法如下: 1.首先将兔剥皮,简单去肉后,放入70—80℃温水中加热3小时,以使蛋白质变性易于分解。 2.浸蛋白酶制作保留韧带的骨骼标本,放入0.3％蛋白酶水溶液中,于37—40℃恒温箱内4—6小时,制作分离骨标本时,则需14小时左右。 3.由上液取出用自来水轻轻冲洗,将分解的软组织洗掉。再经漂白、脱脂、晾干后,放入40％缩丁醛树脂乙醇溶液中浸泡30分钟左右取出悬晾。待稍     

蛙类简单的染色体标本制备方法

进行染色体组型分析时,都要制备有丝分裂中期染色体标本。在实验工作中,我用蝌蚪尾部制备染色体标本,方法简便,且效果非常满意。现介绍如下: 1.前处理将刚出卵膜的小蝌蚪放在含有0.2％秋水仙碱的清水中,室温下(25℃左右)培养3小时。 2.低渗将前处理过的蝌蚪尾尖切下,放在蒸馏水或0.075molKCl溶液中30分钟。 3.固定将低渗处理过的尾尖置于固定液[甲醇(或乙醇):冰醋酸=3:1]中固定30分钟。 4.染色压片将经固定的尾尖放在载玻片上,加一     

骨骼标本的修复方法

骨胳标本如果原来工艺质量不高或使用时保存不妥 ,时间长了会发生“反油”、变黄、发霉、穿连铅丝断裂和骨块散落等情况 ,应及时修复。方法如下 :1)标本“反油”、发霉是原先骨胳标本脱脂不够所致。补救办法是 :取 1份氨水加 3份水配制成脱脂液 ,将标本浸泡 36～ 4 8h。比较粗大的骨胳 ,脱脂液可配得浓些、浸泡时间也可长些。相反如鱼、蛇、蛙等动物的小型骨胳可浓度小些、浸泡时间短些。脱脂后用水冲洗干净、晾干。2 )标本发黄 ,可重新漂白。将标本放入体积分数为2 5 %的双氧水中浸泡 4 8h左右即可。当骨胳呈乳白色、各个部位颜色很均匀 ,…     

一种半永久玻片标本的制备方法

这里介绍一种用蔗糖液制备半永久玻片标本的方法。用这种蔗糖液制备半永久玻片标本研究染色体是很方便的和有实际意义的。这种用蔗糖液制备的半永久玻片标本,可以保存较长时间(一年或更长)。蔗糖液的制备方法取40克蔗糖(化学纯)溶解在60毫升水中,并加热至沸,直至溶液总体积减少了1/4时为止。为避免蔗糖液冷却后出现结晶,要向蔗糖液滴入2—3滴香柏油,细心搅匀,然后再加0.2克苯酚结晶,该糖液可保存一个月以上。花药制片方法 1.从经卡诺固定剂(95％酒精:冰醋酸3:1)固定的保存在70％酒精中的花序上取出一些花药,用醋酸地衣红色液(醋酸洋红、醋酸间     

6月份生物各科实验准备

植物学补充实验苔藓植物的采集、保存和观察 1.采集: 春末夏初,在溪边、田圃、庭院墙角或树林树根下,土质较肥沃背阴潮湿的泥土上,常可见到苔藓植物、如:葫芦藓、墙藓和地钱。采集时须成片地将苔藓连同泥土掘起,放人塑料袋带回。 2.保存: (1)风干保存先将植株上的泥土洗净,放在滤纸上晾干后收存。观察前先用清水浸泡使风干的植株吸水胀大后,再用放大镜观察。 (2)固定保存在标本瓶中加入70%的酒精和少量甘油,将洗净的苔藓植物、假根向下慢慢浸入瓶中,再用熔融的石蜡封好瓶口。若固定葫芦藓,由于     

制作眼球切片标本方法的改进

我们经过几年的实践,对制作眼球切片标本的方法作了一些改进,其制备过程如下: 取材固定取下狗、猫或兔的眼球并立即置于复方甲醛固定液中。配方是: 丙酮:50毫升,冰醋酸:2毫升,甲醛液:4毫升,蒸馏水:3毫升。固定一周后,将原液倒出一半,再加等量丙酮固定5天,再直接放入95％酒精中。     

观察有丝分裂方法的改进

在观察植物细胞的有丝分裂实验中,通常的步骤为:将取下的根尖在固定液中固定15—30分钟,然后用95％酒精洗净醋酸,移入70％酒精中,再水洗后转入1N盐酸中60℃下水解10分钟,之后水洗1—2次,压片,用醋酸洋红染色10分钟。整个过程约需35—50分钟,耗时长,且操作繁琐。近年来,我们采用了一种较为简便的方法,具体如下:     

一种快速、简便诊断布病的方法——虎红缓冲凝集试验

<正>1.浓集菌体:用牛种菌制成菌液,70—80℃1小时灭活,离心、浓缩、称湿重。 2.配制抗原:首先配制缓冲液和染料液。缓冲液为NaOH中和的乳酸生理溶液,pH3.65,染料液是用虎红染料配成1％水溶液。 将浓集菌体按每克加22.5ml酚盐水,     

做减数分裂实验的几种好材料

1.大葱花序在地里越冬的大葱(2n=16),第二年春天三四月便可长出花序,待花序长到象枣大小时,颜色呈绿色(呈黄色时已晚),采摘花序,置于卡诺固定液中(3份酒精:1份冰醋酸),固定24小时,然后取出花序,挑取小花即可制片。如不及时制片,可将固定后的花序,用95％酒精冲洗后(直至闻不到醋酸味为止),放入70％酒精中,存于冰箱内,可随时取用。     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

硬体壁动物和昆虫扫描的简便制作方法

扫描电子显微镜在各学科广泛应用以后,在动物,昆虫分类学中应用很广,但有些标本采到的数量很少,经扫描电镜标本常规制作镀金后标本不能再作分类用;经固定、脱水、干燥、镀金等处理后,原有姿态很难保存,我们试验了直接拍摄活虫、干标本、70％乙醇保存1年以上的标本、导电液浸泡及双重导电法等,得到了正在取食、产卵、交尾孵化等的照片,细微结构清晰,为分类及形态学研究提供了方便的手段。过去很多     

腓肠肌标本制备的简易方法

下面介绍一种在体的坐骨神经肌肉标本制备的简易方法 ,以供在教学实验中参考。具体方法、操作步骤如下 :1)取蛙 1只 ,毁髓后用手术剪将蛙的一侧后肢皮肤环形切开 ,并将该侧后肢皮肤撕去。2 )将蛙腹位固定在蜡盘上 (用大头钉将蛙的四肢固定即可 ) ,用玻璃分针沿半膜肌和股二头肌的裂缝找出坐骨神经 ,游离出 1段 (2 cm左右 )并穿线。3)用手术镊在腓肠肌跟腱下穿线并结扎 ,提起结扎线剪断肌腱与胫腓骨之间的联系 ,游离出腓肠肌。至此 ,在体的坐骨神经腓肠肌标本制备完毕。此法的优点 :手术简便易操作 ,不易损伤坐骨神经 ,由于是在体标本 ,动物…     

不同保存方式下蝗虫组织DNA的提取及RAPD分析

为了开展蝗虫分子系统学研究,分别对冷冻、乙醇浸泡(100%、乙醇、70％乙醇)和干制蝗虫标本用饱和NaCl法进行了基因组DNA的提取,并用随机引物进行扩增,结果表明：70％乙醇固定的标本和部分干标本提取的总DNA得率较低,在琼脂糖凝胶电泳检测中大音琏分有明显降解,导致PCR扩增中信息缺失,甚至无扩增条带;而保存完好的干标本、-20℃冷冻标本和100%,乙醇浸泡标本提取的总DNA带型整齐,无拖尾,PCR扩增结果的稳定性好,成为蝗虫分子系统学研究中首选的三种保存方式。     

小肠绒毛标本制作的一点改进

过去通常是将小肠壁剪开,洗净,浸入清水中观察小肠绒毛。我们作了如下改进: 1.不剪开猪小肠壁,而是将一段长约25厘米的小肠内壁外翻,使小肠绒毛全部外露; 2.反复水洗,去净食糜; 3.把一洁净玻璃试管(直径18mm,长180mm)塞入内壁已外翻的小肠内,使肠壁被撑展,然后用线将小肠两端结扎紧; 4.用医用注射器穿刺过小肠壁向试管内注满5％甲醛溶液; 5.浸于含5％甲醛溶液的标本缸中,石蜡密封瓶口。可观察到外翻出的内壁上密生绒毛。该标本的优点:显示小肠绒毛更为清晰,同时也保     

福尔马林保存的动物标本基因组DNA的提取方法

从在福尔马林长期保存的动物标本中提取基因组DNA用于分子生物学研究一直是一个未得到彻底解决的难题。本文提出了一种从浸泡在福尔马林的大仓鼠肝脏和日本鳗鲡肌肉标本中提取基因组DNA的新方法。取浸泡于福尔马林中的大仓鼠肝脏或日本鳗2鲡肌肉适量,用PBS溶液冲洗,放在灭菌的吸水纸上将其揩干,于超净工作台内用无菌剪刀将材料剪成50mg的小块,放入PBS液浸泡12－24h;然后转入70％的乙醇中处理12－24h。依次换入下列梯度酒精中处理：80％乙醇,2h,重复一次;90％乙醇,2h,重复一次;95％乙醇,2h,重复一次;100％乙醇,1h,重复一次。然后将材料放入1／2倍的PBS液中浸泡12h。其间更换一次溶液。提取方法参考Sambroock等人（1989）,加蛋白K瓣量按标准量（100μg/mlL),在50－56℃温浴3－6h处理过程中,不断轻摇混匀,视消化效果可以重复加入标准量的1／2倍蛋白酶K进行消化,直至将材料完全消化为止;酚氯仿抽提最后一次的上清液移入透析袋中透析;沉淀DNA时,在－20℃下20min效果为宜。该方法主要特点在于对标本进行预处理,在保证不使DNA进一步了解的前提下,首先去除标本中所含的福尔马林溶液的成分,然后利用改进的酚氯仿抽提法提取该类标本的基因组DNA,再进一步用透析法纯化DNA。研究结果表明,采用该方法提取和纯化被试标本基因组DNA能较好地应用于RAPD,微卫星位点的PCR扩增、Suthern和斑点杂交。     

鳞翅目昆虫生殖器装片方法的小改进

制作鳞翅目昆虫针插标本的生殖器常将整个腹部取下,用NaOH溶液处理后,分离生殖器装片。这样针插标本就失去了腹部。为了保留腹部,或将标本重新还软,或将腹部取下还软,解部后再用虫胶粘回去。但这样做效果不好,鳞粉磨损太大,不易恢复旧观。我们做了一些小改进,取得了较好的效果。 1.在干制的展翅标本稍加还软后,固定在泡沫塑料制成的展翅板上,使标本在操作过程中不会移动; 2.从生殖器与生殖前节间腹侧膜上,由后向前插入一昆虫针;再用一锋利的刀片将生殖节前两节的侧膜沿尾虫针割开一裂口;     

蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

用明胶粘贴法制作小型动物标本

制作蛇、壁虎、蜥蜴等小型动物标本,常用的办法是先将材料固定,再将材料用线缚在玻璃片上,然后放人甲醛溶液中保存,成为浸制标本。用这种方法制作的标本不生动,一看就是“死”的(图1)。我们用明胶将材料粘贴在玻璃片上,不用线绑,这样制出的标本栩栩如生,极象活的动物爬在标本瓶中(图2)。自1980