不同来源绿僵菌对云斑金龟蛴螬致病力评价

以云斑金龟蛴螬为检测昆虫,检测了不同来源的6株金龟子绿僵菌（Metarhiziumanisopliae）菌株,结果认为,以RAW8菌株对云斑金龟蛴螬的致病力最强。     

白星花金龟成虫肠道细菌的分离鉴定

目的自星花金龟是我国北方常见腐食性昆虫,为了利用其腐食性行为转化处理有机垃圾、畜禽粪便及农作物秸杆等农业有机废弃物资源,并探索其中肠消化的微生态机制,而对其肠道细菌进行系统研究。方法从白星花金龟成虫肠道中无菌操作分离获得5株细菌,对其菌体形态、培养性状、染色反应、生理生化反应等进行鉴定及数量测定。结果白星花金龟成虫肠道的5个细菌菌株分别属于气球菌属（Aerococcus）、短状杆菌属（Brachybacterium）、棍状杆菌属（Clavibacter）、李斯特菌属（Listeria）、皮杆菌属（Dermabacter）,以皮杆菌属和棍状杆菌属数量最多,分别为1．3×10^7和1．0×10^7;其次为短状杆菌属和气球菌属,分别为8×10^6和5×10^6;李斯特菌属数量最少,为7×10^5。结论各菌株之间细菌数量存在明显差异,以皮杆菌属细菌数量最多,分离未获得真菌和放线菌。     

不同绿僵菌、白僵菌菌株对铜绿丽金龟幼虫的毒力生物测定

应用五株虫生真菌对铜绿丽金龟的幼虫的感染试验结果,将终浓度为1×107孢子/mL的孢悬液对铜绿丽金龟幼虫进行毒力测定。试验结果为:绿僵菌Ma09、Ma20,布氏白僵菌Bbr06、Bbr17,球孢白僵菌Bb202 15d的感染率分别为20.83%、14.58%、8.33%、95.83%、6.25%,其中布氏白僵菌Bbr17显示了较高的毒力,其LT50和LT95分别为10d、18d,该菌株对今后在花生蛴螬防治具有较大的应用价值。     

白星花金龟室内外繁育技术研究

[目的]根据新疆气候特点和白星花金龟Protaetia brevitarsis Lewis生物学特性,探究在新疆人工繁育白星花金龟的可行性及潜力,以期为白星花金龟在新疆的人工繁殖和转化利用畜禽粪便提供科学依据.[方法]以牛粪为繁育基质,在适宜季节分别在室内外保育白星花金龟的蛹及作为成虫产卵基质,最终统计比较室内外成虫的羽化及产卵情况.[结果]室外露天条件更利于白星花金龟的羽化,老熟幼虫做土室26 d后羽化出成虫,比室内及室外棚下处理提前4d.在化蛹30d后进入羽化高峰期,持续13d,羽化率83％.成虫雌雄比接近1∶1,雌虫羽化时间早于雄虫1-3 d.白星花金龟成虫室内外产卵量差异不显著(P＜0.05),室内单雌产卵量109.80粒,室外105.94粒,成虫羽化后30-35 d进入产卵高峰期,第60天室内外成虫产卵量显著下降(P＜0.05),甚至不产卵.[结论]白星花金龟规模化人工繁育在新疆是可行性的,在室外自然条件和室内控温条件下白星花金龟繁育的效果差异不显著.     

绿僵菌素的分离制备及其对蛴螬的毒力

以金龟子绿僵菌金龟子变种Metarhizium anisopliae var. anisopliae菌株MaQ10发酵液为材料,采用萃取、浓缩、制备色谱及重结晶技术,分离纯化出5种绿僵菌素的晶体,经与标准样品以及参考文献相对照,此5种晶体与绿僵菌素A、A2、B、C和E相吻合。进而,采用浸渍法测定了绿僵菌素A和B对大等鳃金龟Exolontha serrulata (Gyllenhall) 和卵圆齿爪鳃金龟Holotrichia ovata Chang 1龄幼虫的触杀毒力。结果表明： 绿僵菌素A和B对大等鳃金龟的触杀活性,在处理后96～120 h内最高,LC₅₀分别为78.1571 mg/L和88.7562 mg/L; 处理浓度为300 mg/L时,LT₅₀分别为13.4159 h和10.5331 h。绿僵菌素A和B对卵圆齿爪鳃金龟的触杀活性,在处理后96 h时最高,LC₅₀分别为66.5308 mg/L和79.4309 mg/L;处理浓度为300 mg/L时,LT₅₀分别是13.6399 h和9.9451 h。     

白星花金龟捕食落叶松毛虫蛹

白星花金龟Potosia brevitarsis Lewis属鞘翅目金龟甲科的一种杂食性昆虫。近年来作者在对落叶松毛虫的调查中发现,白星花金龟对该害虫种群数量的调控起着不可忽视的作用。     

白星花金龟聚集信息素的分离鉴定及引诱效果

[目的]明确白星花金龟Protaetia brevitarsis Lewis聚集信息素的有效成分,为白星花金龟的绿色防控提供支持.[方法]通过动态顶空法收集白星花金龟雌虫、雄虫和雌雄虫混合挥发物,用气相色谱-质谱(Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)联用技术对收集的挥发物进行分析鉴定,并利用触角电位(Electroantennogram,EAG)仪和Y型嗅觉仪测定白星花金龟对8种化合物的触角电位和行为选择反应.[结果]白星花金龟雌虫、雄虫和雌雄虫混合挥发物中皆鉴定出8类15种化合物,包括6种烷烃类、2种酚类、2种芳香烃类、1种烯类、1种吡啶类、1种胺类、1种醇类和1种酮类.EAG试验结果表明,白星花金龟对8种化合物都有EAG反应,且不同挥发物间、同种挥发物不同浓度间的EAG反应存在差异.白星花金龟对蒎烷胺、3,4-二甲基-6-乙基苯酚、2,3-二甲基苯乙酮和2,6,10,14-四甲基十七烷4种挥发物的EAG反应相对值在1μg/μtL时达到最大,对萘、苯并噻唑、百里酚和正十四烷4种挥发物的EAG反应相对值在10 μtg/μtL时达到最大.行为选择反应表明,白星花金龟雌成虫、雄成虫对2,3-二甲基苯乙酮有明显趋向性,选择反应率大于70％,对2,6,10,14-四甲基十七烷、萘、苯并噻唑、百里酚和正十四烷5种物质均表现出显著或极显著的驱避效果,对3,4-二甲基-6-乙基苯酚和蒎烷胺表现出了性别上的差异,雄虫对3,4-二甲基-6-乙基苯酚表现出显著的趋向性,对蒎烷胺表现出显著的驱避性,而雌虫对这2种挥发物却无明显反应.[结论]2,3-二甲基苯乙酮对白星花金龟雌成虫、雄成虫有明显的引诱效果,2,6,10,14-四甲基十七烷、萘、苯并噻唑、正十四烷和百里酚有较强的驱避作用,推测2,3-二甲基苯乙酮是白星花金龟聚集信息素的有效组分.     

不同补水方式对白星花金龟水分平衡的影响

为研究水分散失和水分补充对新疆新害虫白星花金龟Potosia brevitarsis Lewis的影响,在30℃恒温条件下,采用重量法测定白星花金龟脱水过程以及不同补水方式下(补蒸馏水;补盐水;补糖水)体内水分含量的变化,并与步甲、拟步甲的水分代谢进行比较。结果表明,白星花金龟的脱水与拟步甲科的网目拟地甲Opatrum subaratum Fald相似,在10h内脱水率均约为5%,而斑步甲Anisodactylus signatus 10h内脱水率约为20%。不同补水处理后,白星花金龟体内含水量迅速增加,随后继续脱水;脱水10d后,补蒸馏水、补盐水和补糖水处理的白星花金龟脱水率分别为28%,27%和21%,而未补水白星花金龟的脱水率为34%;未补水处理的甲虫脱水率和补蒸馏水和补盐水处理之间无显著性差异,而和补糖水处理之间存在显著性差异。未补水、补蒸馏水、补盐水和补糖水处理的LT50分别约为9,12,13和17d,补糖水能有效延长甲虫的存活时间。糖能有效地增加白星花金龟体内含水量,对维持其体内水分平衡起重要作用。     

绿僵菌与白僵菌对黑翅土白蚁的室内毒力测定

白蚁是世界性的主要害虫之一,世界各大洲都有分布,其为害面积约占全球总面积的50％,尤其在热带、亚热带地区,白蚁为害更为突出(李桂祥等,1989)。福建省的白蚁种类之多位居全国第三。     

绿僵菌属的三个新种

作者从广东、贵州、北京等地收集的虫生真菌中,发现在我国具有绿僵菌属特征的真菌可分为四个种。根据菌落颜色、分生孢子团块大小、紧密和牢固程度、孢子链连接方式、分生孢子形状等,将我们收集的属于本属的菌株分为四个种。本文报道绿僵菌属三个新种的描述。金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Metsch.)Sorokin为最常见的甘蔗金龟子致病菌,是本属的模式种。平沙绿僵菌Metarhizium pingshaense Chen et Guo sp.nov.、柱孢绿僵菌Metarhizium cylindrosporae Chen et Guo sp.nov.和贵州绿僵菌Metarhizium guizhouense Chen et Guo sp.nov.是三个新种。     

白星花金龟人为条件生物学与应用潜力

本文选取人工饲养的东亚飞蝗虫砂作为白星花金龟Potosia brevitarsis Lewis幼虫饲料、成虫产卵基质进行人为条件下的生物学研究。测定了其在不同温度条件下各虫态发育历期、不同食物下成虫单雌产卵量、不同酵化周期条件下东亚飞蝗虫砂2龄、3龄幼虫的转化力;分析了幼虫虫体和虫砂的主要营养成分;实施了虫砂盆栽小白菜试验。结果显示,白星花金龟适宜的繁育温度为22~28℃,25℃全世代发育历期为126.62(±1.05)d;以11种水果为食料,成虫单雌产卵量顺序为:芒果>菠萝>葡萄>苹果>桃>梨>西瓜>甜瓜>李子>杏>西红柿,最高207粒,最低68粒;东亚飞蝗虫砂酵化周期与取食龄期的最佳对应组合分别为2龄30 d和3龄25 d,折合每转化100 g可增长2龄虫体3.04 g、产生虫砂81.90 g或3龄虫体4.37 g、虫砂74.48 g;3龄幼虫含蛋白质(53.8%)、脂肪(6.6%)、18种氨基酸(44.68%),是昆虫源高蛋白原料;虫砂含有机质(18.72%)和氮磷钾(5.95%)。盆栽小白菜试验表明,1 cm^2施用0.13 g,效果最佳。水果残余物作为白星花金龟成虫食物,东亚飞蝗虫砂作为成虫产卵基质和幼虫繁育饲料,保持适宜温光条件,可以实现白星花金龟周年繁育。白星花金龟虫体和虫砂在生态循环农业、医药等领域具有应用潜力。     

黄绿绿僵菌Mf82悬乳剂对褐飞虱作用的时间-剂量-死亡率模型分析

为了寻找褐飞虱Nilaparvata lugens生物防治的新途径,用新分离出的黄绿绿僵菌Metarhiziumflavoviride(Mf82)菌株与实验室保存的黄绿绿僵菌、金龟子绿僵菌和球孢白僵菌3种菌种9个菌株作对比,测定了它们对褐飞虱成虫的毒力。结果表明:Mf82菌株对褐飞虱成虫的毒力最高,以1.0×108个孢子/mL的孢子液喷雾接种到褐飞虱成虫体表上,累积死亡率高达81.7%,LT50为4.6d,致病效果显著高于其他受测菌株。在此基础上研制了黄绿绿僵菌悬乳剂,并研究了其对褐飞虱的致病力。结果表明:随着黄绿绿僵菌浓度的增加,褐飞虱的累计死亡率增加,在浓度为1,048个孢子/mm2时,累计死亡率达到85.0%。利用时间-剂量-死亡率模型对数据进行处理,所建模型均顺利通过Hosmer-Lemeshow拟合异质性检验,表明模型拟合良好,并由模型估计出了该剂型对褐飞虱的致死剂量与致死时间。在接种后第7天和第9天,LC50值分别为2.1×103、9.9×102个孢子/mm2,LC90分别为7.8×104、3.7×104个孢子/mm2。黄绿绿僵菌悬乳剂对褐飞虱的致死时间与对数剂量相关,供试菌剂LT50值随着对数剂量的增加而递减,对数剂量由7.0增加到8.0时,LT50由8.9d降为5.7d。可见该黄绿绿僵菌悬乳剂对褐飞虱具有较强的毒力,在褐飞虱生物防治中具有广阔的应用前景。     

Viability and virulence of blastospores of Metarhizium anisopliae (Metch.) Sorokin after storage in various liquids at different temperatures

Blastospores of three strains of Metarhizium anisopliae were stored in 18 liquids at 4°C, 20°C and 35°C for 18 weeks, 12 weeks or 9 days respectively. Viability was quantified by determination of their germination. In bioassays the virulence of stored blastospores was studied using adults and third instars of Locusta migratoria migratorioides (R. & F.) and compared to those of freshly produced blastospores and conidia. Generally, there was great variability in the viability of blastospores, depending on the fungal strain and the liquids used. Blastospores survived best at 4°C in 10% hydroxyethyl starch; for example, germination of M. anisopliae strain 97 still amounted to more than 80% after storage for 18 weeks. Other suitable liquids were deionized water, 25% Ringer's solution and 1% sodium alginate. The viability of blastospores stored at 20°C was considerably shorter than at 4°C. During storage for 12 weeks at 20°C the best protective liquids for M. anisopliae strain 97 were 25% Ringer's solution (43% germination), deionized water (23%) and 10% hydroxyethyl starch (23%). At 35°C, 45% of M. anisopliae strain 97 blastospores still germinated after storage for 7 days in 25% glycerol. The bioassays revealed that the virulence of blastospores after storage was comparable to that of fresh ones and even better than that of fresh conidia. In general, the LT₅₀ was about 4–6 days at an alternating day/night temperature of 28/20°C.     

几种虫生真菌菌株的培养性状及其对褐飞虱的毒力

从褐飞虱Nilaparvata lugens (St(a)l)罹病虫体上新分离出的一种黄绿绿僵菌菌株Metarhizium flavoviride (Mf82),与实验室保存的黄绿绿僵菌、金龟于绿僵菌和白僵菌3种菌种5个菌株作为对比,研究了在SDAY和PDA培养基上的培养性状,并测定了它们对褐飞虱成虫的毒力.结果表明:...     

褐飞虱高毒力绿僵菌菌株的筛选

从田间褐飞虱Nilaparvata lugens (St?l)罹病虫体上新分离鉴定一株黄绿绿僵菌Mf82,将其与实验室保存的8株绿僵菌Metarhizium spp.一起,分别测定其对褐飞虱成虫毒力和几丁质酶活力,并用扫描电镜观察侵入昆虫表皮的过程和体表的形态变化,进而分析侵入能力与几丁质酶的相关性。结果表明：菌株Mf82累计校正死亡率和几丁质酶活力均最高,为82.1%和9.78U/mg,与其他菌株差异显著。同时,扫描电镜照片显示Mf82分生孢子既可以由褐飞虱体壁节间膜和凹陷处侵入,还可以从含几丁质较多的胸部背板侵入。比较9株绿僵菌菌株菌落生长速度、产孢初始时间、产孢量和萌发率显示,Mf82菌株具有生长速度快、产孢初始时间短、萌发率高和产孢量大等优点,可见筛选的Mf82菌株致病力强,在褐飞虱的微生物防治方面将有良好的应用前景。     

Algorithm-based design of synthetic growth media stimulating virulence properties of Metarhizium anisopliae conidia

Aims: Synthetic media should be designed for the production of Metarhizium anisopliae conidia with improved virulence properties. Methods and Results: A genetic algorithm (GA), demonstrated to be suitable for the design of media for spore mass production ( Hutwimmer et al. 2008 ), was utilized for a multi‐objective medium design to improve conidia yield and three proposed virulence properties of conidia: C : N ratio, germination speed and amount of spore‐bound Pr1 protease. After five iterative optimizations, 52 media were improved over Sabouraud dextrose agar (SDA). Four media exhibited medium performances (a factor derived from the four single optimization variables) of around 0·7; cf. SDA = 0·532; media with enhanced properties were reached for each single optimization variable; Bioassays against Tenebrio larvae indicated also a slight improvement in virulence of conidia from designed media. A degenerated phenotype of the same strain did not exhibit differences in colony appearance, spore characteristics and virulence if grown on designed media. Conclusions: The application of a problem‐oriented GA is a practical and rapid method to design media for multi‐objective purposes. Significance and Impact of the Study: The applicability of a GA for multi‐objective medium design was demonstrated for the cultivation of anamorphic fungi on solid media.