闽产前胡根挥发油的化学成分及其抑菌活性

采用GC-MS技术分析了闽产前胡（Peucedanum praeruptorum Dunn)根挥发油的化学组成,共鉴定了38种化学成分并测定其相对含量,占总含量的77.97%。其中,β-水茴香萜（9.52%),α-没药醇（8.44%),β-蒎烯（5.22%)为主要成分。此外,倍半萜及其氧化物如石竹烯（2.62%)。长叶烯（2.36%)及Z-9-十五烯醇（3.72%)含量也较多,对4种供试病原菌的体外抑菌实验表明,该军发油对大肠杆菌,伤寒杆菌和弗氏志贺氏菌有一定的抑制或杀灭能力。     

红豆树叶挥发油化学成分及其抗氧化和抑菌活性研究

为探究红豆树叶挥发油的化学组成及其生物活性,本研究首次采用水蒸气蒸馏法提取红豆树叶挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析其化学成分,结合DPPH和ABTS法及抑菌圈法,评价其体外抗氧化和抑菌活性。结果表明,从红豆树叶挥发油中共检测出化合物36个,占挥发油总量的90.50%;挥发油主要成分为1,4-二十烷二烯(25.72%)、1,19-二十烷二烯(10.85%)、2,6-二叔丁基对甲酚(10.14%)、邻苯二甲酸正丁基异丁基酯(9.75%)、(Z,Z)-6,9-二十烷二烯(7.60%)、(E,E)-α-金合欢烯(7.51%)、叶醇(4.74%)和2-异丙烯基-5-甲基-6-庚烯-1-醇(4.04%)。红豆树叶挥发油对DPPH自由基和ABTS自由基清除作用的半数有效量(ED₅₀)分别为0.27、0.14 mg/mL,且抗氧化活性与挥发油浓度呈量效相关。红豆树叶挥发油浓度为7.1 mg/mL时,其对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和大肠杆菌(Escherichia coli)的抑菌圈分别为11.29、9.88、10.85和11.03 mm。本研究为红豆树叶资源的综合开发利用提供了理论基础。     

拮抗灰葡萄孢菌乳酸菌的筛选与鉴定

灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)是导致果蔬腐败的主要病原菌之一.乳酸菌因为安全、无毒且具有一定的抗菌作用,在抑制果蔬腐败病原菌方面具有一定的潜在价值.鉴于此,文章期望从发酵食品和常见水果表面分离并筛选出抑制灰葡萄孢菌活性的乳酸菌,结果发现有10株乳酸菌对灰葡萄孢具有抑菌活性.经鉴定,3 株(JZ a1、MJ a2、PS b1)为 Limosilactobacillus fermentum,2 株(ZLJ、MDF b)为 Lactobacillus pentosus,MHT b 为 Lactobacillus acidophilus,4 株(SCb1、MJ a、MDF a、MHT a1)还有待进一步鉴定.文章为开发果蔬生物保鲜剂提供了实践基础与理论支撑.     

杠柳根皮挥发油化学成分及对麦二叉蚜的毒杀活性初探

采用GC/M S联用技术,对杠柳根皮中挥发油的化学成分进行了分析,共分离出15种化合物,对其中10种进行了鉴定,已鉴定成分占挥发油总成分的94.91%,分别为4-甲氧基水杨醛、乙酸丁酯、2-甲基-1,3-二氧环戊基乙酸乙酯、乙羟硫代羧酸-8-二乙氧基磷酰正辛酯、1,1,3,3-四丁氧基-2-丙酮、4-甲基-2-戊酮、甲酸丁酯、1-(1-乙氧基乙氧基)丁烷、2-正丁氧基四氢吡喃及丁醚。以麦二叉蚜为试虫进行挥发油杀虫活性测定。结果表明,杠柳根皮挥发油对试虫具有较强的触杀活性。     

天竺桂挥发油化学成分及抑菌活性研究

用水蒸馏法提取天竺桂(CinnamomumjaponicumSibe)挥发油,并用GC-MS分析化学成分,用滤纸片法测其抑菌活性。结果表明,从天竺桂挥发油中分离出27种化学成分,以冰片为主要成分,占26.03%;抑菌实验中,挥发油对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌都有明显的抑菌作用。     

异补骨脂查尔酮对葡萄灰霉病菌的抑菌作用

背景 灰霉病是由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)引起的世界性真菌病害,对农作物产量和品质产生巨大危害。异补骨脂查尔酮(isobavachalcone, ISO)是一种植物源黄酮类化合物,具有农用和药用活性,对植物病原菌有良好的生物防治潜力。目的 探讨ISO对灰葡萄孢菌的抑菌效果和作用机制,为葡萄灰霉病防治提供新的绿色高效药剂。方法 采用离体活性测定研究不同浓度ISO对灰葡萄孢菌菌丝生长、孢子萌发、细胞膜通透性,以及过氧化氢(H₂O₂)、超氧阴离子自由基(O₂^-)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、过氧化物酶(peroxidase, POD)活性的影响;采用接种侵染法测定ISO对葡萄灰霉病的防治效果。结果 ISO可以显著抑制灰葡萄孢菌的菌丝生长和孢子萌发,同时能降低葡萄灰霉病的发病率和病斑蔓延;当ISO浓度为24 mg/L时,孢子萌发率低至2.5%。用浓度为24 mg/L的ISO处理后,扫描电镜结果显示灰葡萄孢菌菌丝发生畸变,出现明显皱缩、膨大,甚至断裂;并随着处理时间延长,相对电导率和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量升高,显示细胞膜通透性增加;此外,ISO处理会引起胞内活性氧积累,H₂O₂和O₂^-含量显著升高,并且SOD、CAT、POD活性上升。结论 ISO通过改变菌丝形态,增加细胞膜通透性,增加胞内活性氧积累,从而有效抑制灰葡萄孢菌的生长和侵染,在葡萄灰霉病绿色防控上具有良好的应用潜力。     

青海省茄果类蔬菜灰霉病菌灰葡萄孢的遗传多样性

为明确青海省侵染茄果类蔬菜的灰葡萄孢菌Botrytis cinerea遗传多样性及群体遗传结构,采用ISSR分子标记技术对分离得到的213株茄果类蔬菜灰葡萄孢菌进行了遗传多样性分析,12条引物共扩增出243个多态性位点。基于ISSR数据的聚类分析显示,213个菌株在0.65相似系数水平上可划分为9个类群。5个地理种群间Nei's基因多样性指数为(H)为0.437 0,多态位点百分率(P)达100%,有效等位基因数(Ne)为1.807 3,Shannon信息指数(I)为0.625 6,观测等位基因数为2.000 0。遗传分化系数(Gst)为0.203 6,基因流(Nm)为1.956 4。灰葡萄孢菌群体遗传变异主要来源于种群内部(85%)。基于0.89相似系数,5个地理种群可划分为2个主要类群和3个亚群。从PCoA分析看出5个种群间存在部分交叉,但整体呈现地理聚集趋势。3个寄主划分的种群间,存在种群间的遗传变异仅为2%。较地理来源种群来看,种群遗传距离近,遗传相似度高。在PCoA分析中,大部分种群单株形成了交叉紧密,少部分菌株较离散。     

6-甲基香豆素抑菌活性及抑菌稳定性研究

为探究6-甲基香豆素对灰葡萄孢菌（Botrytis c ine re a）的抑菌活性及抑菌稳定性,文章选取灰葡萄孢菌作为研究对象,采用生长速率法测定6-甲基香豆素对灰葡萄孢菌丝的体外抑菌活性,并测定不同条件下6-甲基香豆素对灰葡萄孢菌的抑菌活性。结果表明,不同质量浓度的6-甲基香豆素对灰葡萄孢菌均具有一定的抑菌活性,剂量-抑菌率的线性关系成正比;随着处理温度升高,抑菌活性逐渐下降,当处理温度达到60℃时,抑菌率达23.40±4.05%,抑菌活性显著降低（P<0.05）;随着紫外线照射时间延长,6-甲基香豆素对灰葡萄孢菌的抑菌活性逐渐增强,当照射时间达到12 h时,抑菌率为73.86±2.23%,显著高于对照组（P<0.05）。不同类型的金属离子对6-甲基香豆素抑菌效果的影响不同。其中,经Na⁺、Ca²⁺金属离子处理后,6-甲基香豆素的抑菌效果显著增强（P<0.05）;K⁺处理后,6-甲基香豆素的抑菌活性仍保持稳定。pH为6～9时,6-甲基香豆素对灰葡萄孢菌的抑菌活性稳定。研究结果可为利用6-甲基香豆素进行灰霉病防治提供理论依据。     

四川省草莓主产区灰葡萄孢菌的遗传多样性

为明确四川省草莓灰葡萄孢Botrytis cinerea群体遗传结构及其多样性水平,采用ISSR分子标记技术对分离自四川省10个县（市）的195株灰葡萄孢菌进行了遗传多态性分析。结果表明,四川省灰葡萄孢菌多态性丰富,6条ISSR引物共产生了63个多态性位点,应用Popgene32软件计算四川省不同主产区域（除德阳广汉种群外）种群的Nei’s基因多样性指数（H）和Shannon信息指数（I）均达到了H>0.2、I>0.3的水平,表明四川省的灰葡萄孢菌具有丰富的遗传多样性;灰葡萄孢菌群体的遗传多样性（Ht）均值为0.2976,种群内遗传多样性（Hs=0.2458）远远高于种群间（Dst=0.0518）的遗传多样性;遗传分化系数（Gst）均值0.1742,基因流（Nm）均值2.3696,说明该地区灰葡萄孢菌种群间遗传分化不明显,群体内基因交流频繁。通过UPGMA法和Omishare Tools热图软件均可将10个采集点分为3个类群,来自绵阳江油的菌株单独构成一个类群,来自成都崇州和德阳广汉的菌株构成一个类群,其余的菌株构成另外一个类群;利用Structure 2.3软件对195份灰葡萄孢菌进行群体结构分析,可将134份菌株划分成21个群,另外61个菌株被列为混合群体。     

缘座壳孢菌抑菌活性化合物的分离及鉴定

【目的】座壳孢菌是粉虱和蚧壳虫的一种重要昆虫病原真菌,其代谢产物具有抑菌、杀虫、抗肿瘤和抗氧化等生物活性。本研究旨在分离并鉴定缘座壳孢发酵物中的代谢物,以期为拓展该生防菌的应用提供依据。【方法】基于色谱技术从缘座壳孢菌A. marginata WYTF2017-01发酵培养物中分离化合物,借助波谱手段鉴定其化合物结构,分析化合物的抑菌活性。【结果】本研究共鉴定了12种化合物,包括Methyl 24-methylene-3-oxolanost-8-en-26-oic ester (1)、Ergosta-5,7,22-trien-3-ol,4-methyl-,(3β,4α,22E) (2)、杜斯塔宁(3)、3β-acetoxy-15α,22-dihydroxyhopane (4)、麦角固醇(5)、4-(Hydroxymethyl)-3-furancarboxylic acid (6)、Eupenicisirenin B (7)、4,6-dihydroxy-1(3H)-isobenzofuranone (8)、β-谷甾醇(9)、对叔丁基苯甲酸甲酯(10)、2-benzyl-4H-pyran-4-one(11)和6-benzyl-4-oxo-4H-pyran-3-carboxamide (12),其中化合物1、2、6~12为首次从昆虫病原真菌中分离鉴定。化合物1、2、3、6、7、8、11和12对真菌或细菌具有不同程度的抑制活性,MIC值为3.13~50.00 μg·mL^-1。化合物7、8和12抑菌活性较为突出,化合物7对大肠杆菌的MIC值为3.13 μg·mL^-1,效果与阳性对照链霉素相同,而8和12对青枯劳尔氏菌的MIC值分别为6.25和12.50 μg·mL^-1,优于或等同于链霉素(MIC值为12.50 μg·mL^-1)。【结论】从缘座壳孢菌分离的多种代谢物具有良好的抑菌活性,显示了防治植物病害的潜力。     

灰葡萄孢菌过氧化物酶体及细胞核的荧光蛋白标记

[目的]对灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的细胞核和过氧化物酶体进行荧光蛋白标记,为研究其生长发育和侵染过程中细胞结构和细胞器动态提供基础.[方法]以绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(DsRED、mCherry)为报告基因,利用根癌农杆菌介导转化(Agrobacterium tumefaciens m...     

解淀粉芽孢杆菌B15抑菌物质对葡萄灰霉病灰葡萄孢的抑菌机理

【目的】利用荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜技术初步探讨解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloquefaciens)B15菌株发酵液中的抑菌混合物质伊枯草菌素A(iturin A)和芬芥素(fengycin)对葡萄灰霉病病原菌灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的抑菌机理。【方法】采用琼脂稀释法讨论解淀粉芽孢杆菌B15发酵液对灰葡萄孢的抑菌活性。利用台盼蓝(trypan blue)染色、4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、双氢罗丹明123(DHR123)、钙离子探针fluo-3/am和Annexin V-PI探针染色来观察解淀粉芽孢杆菌B15发酵液对灰葡萄孢细胞膜和菌丝形态、细胞核、活性氧、钙离子和磷脂酰丝氨酸层的影响。【结果】抑菌活性实验发现解淀粉芽孢杆菌B15发酵液对灰葡萄孢具有良好抑菌效果。荧光显微镜台盼蓝染色观察发现,经B15发酵液处理过的灰葡萄孢出现菌丝畸形、菌丝体粗大、尖端肿胀并被染成蓝色和明显的液泡化现象。同时未在处理组中观察到细胞内容物泄漏,说明处理组菌丝细胞膜未发生破损。该结果表明在此次试验中,B15发酵液中的抑菌有效物质不以破损细胞膜的方式直接导致灰葡萄孢的死亡。激光共聚焦显微镜观察结果发现,处理组的灰葡萄孢菌丝出现典型的细胞凋亡现象、染色质固缩、细胞核裂解、磷脂酰丝氨酸层外翻、活性氧和钙离子积累。【结论】该实验表明解淀粉芽孢杆菌B15发酵液以诱导细胞凋亡的形式来抑制灰葡萄孢菌丝的生长。     

甲基营养型芽孢杆菌拮抗玉蜀黍尾孢菌、链格菌和灰葡萄孢菌及环脂肽分析

[目的]探究甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)对植物病原菌玉蜀黍尾孢菌(Cercospora zeae-maydis Tehon et Daniels)、链格菌(Alternaria alternate)和灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的拮抗作用并鉴定抗菌物质,为其...     

乐东拟单性木兰花部挥发油的化学成分及其抑菌活性

采用GS－MS技术分析了乐东拟单性木兰花部挥发油的化学组成,共鉴定了57种成分的化学结构与相对含量,占总含量地85．59％。其中,β－ 蒎烯（12．85％）、D－柠檬烯（7．78％）、石竹烯（4．89％）、十氢－4a－甲基－1－亚甲基－7－（1－甲基乙烯基）－萘（4．70％）为主要成分。此外,醇类中α-杜松醇（3．61％）、1氢－[1,3]环戊并[1,2]环戊并[1,2]环丙并－苯（3．52％）、倍半萜含氧衍生物石竹烯氧化物（3．33％）和α－蒎烯（3．22％）也占有较大比例。体外对4种供试病原菌的抑菌实验表明,该挥发油对大肠杆菌和伤寒杆菌有一定的抑制或杀灭能力。     

灰葡萄孢产孢新基因的功能分析

灰葡萄孢是一种重要的植物病原真菌,其寄主范围广泛,能危害世界上230多种双子叶植物,常给农业生产造成重大的经济损失[1-3].由灰葡萄孢引起的灰霉病是目前我国温室蔬菜生产中最主要的病害之一,一般造成全年减产20％-25％,严重时达到40％以上[4].因此,研究该病菌的致病机理对该病防治具有重要意义,并且随着灰葡萄孢基因组测序的完成,灰葡萄孢已成为发育生物学、分子植物病理学研究的模式生物之一.     

根癌农杆菌介导的灰葡萄孢菌遗传转化研究

以pCAMBIA1300-N载体为骨架, 成功构建了以绿色荧光蛋白(gfp)为报告基因, 潮霉素(hph)为抗性筛选标记的载体pKPG, 并利用根癌农杆菌介导转化系统, 成功获得了能表达绿色荧光蛋白的重组灰葡萄孢菌。通过PCR检测转化子的绿色荧光蛋白基因和潮霉素抗性表达框, 观察菌丝和分生孢子的荧光表型, 以及gfp基因的Southern杂交验证, 结果表明：被测转化子基因组中均成功整合了目的基因片段。     

椿根皮的化学成分及抑菌活性研究

为探寻椿根皮抑菌的物质基础,该研究采用硅胶、Sephadex LH-20等方法对椿根皮甲醇提取物进行分离和纯化,通过理化性质和波谱数据分析单体化合物的结构,并以卡那霉素为对照组采用流式细胞法测试化合物的抑菌活性。结果表明：从椿根皮中得到22个化合物,分别鉴定为pleuchiol (1)、withastramonolide (2)、7-ketositosterol (3)、白桦酯醇(4)、桦木酸甲酯(5)、1, 2, 4-trimethoxybenzene (6)、顺丁烯二酸二甲酯(7)、sonderianol (8)、dibutyl phthalate (9)、pinoresinol (10)、对羟基苯甲酸乙酯(11)、avenalumic acid methyl ester (12)、5,3′-dihydroxy-3,7,4′-trimethoxy-flavone (13)、spathulenol (14)、2-甲基-5-丙基酮-7-羟基色原酮(15)、 7,4′-dihydroxyflavone (16)、annphenone (17)、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(18)、5,3′...     

多种抑制剂对灰葡萄孢菌多聚半乳糖醛酸酶和漆酶活性的影响

目的:研究EDTA、CaCl2、红酵母酸和肠菌素对Botrytis cinerea多聚半乳糖醛酸酶(PG)和漆酶(LC)的抑制作用。方法:分离得到2株具有致病性、能抵抗杀菌剂以及分泌PG和LC的灰葡萄孢菌。观察四种抑制剂对B.Cinerea感染苹果的防治效果。将菌种活化后分别给予四种抑制剂(EDTA、CaCl2、红酵母酸和肠菌素)处理7d后,测定不同组别菌体干重和总蛋白含量。利用酶动力学的方法比较四种抑制剂EDTA、CaCl2、红酵母酸和肠菌素对两株灰葡萄孢菌中PG和LC活性的影响。结果:EDTA和红酵母酸能显著提高健康苹果对B.Cinerea感染的抵抗能力,而氯化钙和肠菌素则对已感染了B.Cinerea的苹果感染面积的扩大有较好的控制作用。肠菌素对两菌株LC酶活性的抑制作用最强、抑制率达70-80%,氯化钙对PG活性的抑制作用最强、抑制率达45%。结论:EDTA和红酵母酸可预防B.Cinerea的感染,肠菌素和氯化钙对B.Cinerea的感染有治疗作用。其防治作用可能与抑制B.Cinerea中PG和LC的活性有关。     

枯草芽胞杆菌EDR4抑制灰葡萄孢菌的细胞学研究

通过菌丝生长抑制方法测定枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis EDR4对灰葡萄孢菌Botrytis cinerea的抑制作用,利用电子显微镜观察受到抑制的灰葡萄孢菌丝形态和细胞结构的变化。结果表明,菌丝生长异常,分支变多,出现不规则膨大和缢缩;线粒体数量异常增多并出现不规则肿胀;细胞质外渗,出现空腔化细胞;细胞器泡囊化解体和细胞崩解,细胞趋于死亡。     

疣孢漆斑菌发酵液的化学成分及其农药活性的研究北大核心CSCD

对一株羌活内生真菌—疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria)的发酵液进行化学成分研究,采用乙酸乙酯萃取,硅胶柱色谱和制备型HPLC等色谱手段分离、纯化,从中分离得到14个单体化合物。通过理化性质与波谱数据分析,分别鉴定为:疣孢菌素B(1)、8-乙酰基漆斑菌素H(2)、疣孢菌素M(3)、疣孢菌素J(4)、漆斑菌素D(5)、乙酰基疣孢菌素L(6)、异漆斑菌素E(7)、漆斑菌素E(8)、漆斑菌素H(9)、漆斑菌素A(10)、乙酰基漆斑菌素E(11)、Isotrichoverrin A(12)、Isotrichoverrin B(13)、疣孢菌素A(14)。其中化合物2、6、7为首次从该种真菌中分离得到。并对14个化合物进行农药活性测试,结果表明化合物10 ppm对拟南芥有显著的生长抑制作用,32 ppm对早熟禾有生长抑制作用,1000 ppm对绿棉铃虫的致死率大于70%,具有良好的除草和杀虫活性。这为进一步开发疣孢漆斑菌作为生物除草剂和杀虫剂提供理论依据。