磺胺甲噁唑(SMZ)和甲氧苄啶(TMP)在彭泽鲫组织中的残留消除研究

采用高效液相色谱技术研究了磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole, SMZ)及其增效剂甲氧苄啶(Trimethoprim, TMP)在彭泽鲫体(Carassius auratus var. pengze)内的残留消除规律。在(18±1)℃水温条件下, 将实验鱼随机分为2组, 分别用于多剂量混饲和口灌给药, 剂量为150 mg·kg^-1SMZ 和30 mg·kg^-1 TMP, 每天1 次, 连给10 d。用高效液相色谱法检测残留量, 此法检测限为0.05 μg·mL^-1。结果表明: 在两种给药方式下, 停药后第1 天SMZ 和TMP 都在彭泽鲫各组织中达到峰值, SMZ 在肌肉中最高, 肾脏中最低, 而TMP 在肾脏中最高, 血液中最低。混饲给药彭泽鲫各组织SMZ 和TMP 残留量都分别低于口灌给药各相应组织中的残留量, 两种给药方式下SMZ 残留的消除速度不同, 混饲给药比口灌给药慢, 前者需要24-25 d 各组织中才检测不到SMZ 残留, 而后者仅需要22 d; 与此相反, TMP 残留的消除速度在两种给药方式中相似, 即至各组织中检测不出TMP 残留都需21 d。根据这些结果综合确定对彭泽鲫多次用SMZ+TMP 后, 休药期至少22 d。     

卡泊芬净联合复方磺胺甲噁唑治疗艾滋病合并肺孢子菌肺炎

目的探讨卡泊芬净联合复方磺胺甲噁唑(TMP-SMX)治疗艾滋病合并肺孢子菌肺炎(PCP)的疗效。方法回顾性总结分析9例艾滋病合并肺孢子菌肺炎的临床资料,包括临床特点及诊疗经过。结果 9例患者临床诊断PCP成立,经卡泊芬净联合TMP-SMX抗PCP治疗后,除1例死亡(老年患者合并慢性支气管炎病史)外,其余8例均得到满意疗效。结论卡泊芬净联合TMP-SMX治疗艾滋病合并PCP,可达到良好的治疗效果。     

复方磺胺甲噁唑联合卡泊芬净治疗耶氏肺孢子菌肺炎疗效与安全性的Meta分析

目的 系统评估复方磺胺甲噁唑(TMP/SMZ)与卡泊芬净联合对耶氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystis jirovecii pneumonia, PJP)的治疗效果和安全性。方法 搜索PubMed、Embase、Cochrane library、CBM、知网、万方、维普中,TMP/SMZ联合卡泊芬净治疗PJP的临床随机对照试验,进行Meta分析,结局指标为总有效率、不良反应发生率,使用RevMan5.4软件统计分析。结果 共纳入20项研究,PJP患者共1 802例。Meta分析结果显示,相较TMP/SMZ单药治疗,TMP/SMZ联合卡泊芬净治疗PJP的有效率显著提高[RR=1.29,95%CI(1.22,1.37),P<0.00001],且不增加药物不良反应发生率[RR=0.91,95%CI(0.79,1.05),P=0.21>0.05]。结论 TMP/SMZ联合卡泊芬净治疗PJP的效果优于TMP/SMZ单药治疗,且不增加药物不良反应,推荐临床使用。     

重金属污染土壤中细菌抗生素抗性基因分布特征

重金属作为常见的土壤污染物,可通过共选择作用诱导土壤微生物群落的抗生素抗性基因(antibioticresistancegenes,ARGs)的产生和扩散,并促进ARGs在环境中持久存在。本研究建立了不同铜(Cu)浓度和镉(Cd)浓度的土壤微宇宙实验,基于高通量测序和实时荧光定量PCR技术分析不同重金属浓度和复合污染条件下ARGs的分布特征以及土壤细菌群落对不同浓度Cu、Cd污染的响应,旨在解析ARGs与土壤细菌群落在重金属污染土壤中的分布特征。此外,通过探究影响ARGs变化的关键环境因子,以期找出有效减缓环境中抗生素抗性的传播和扩散现状的途径。研究表明:高浓度Cu(400 mg/kg)与Cd(1 mg/kg和5 mg/kg)的复合污染显著(P <0.05)提高了土壤中抗生素抗性基因sul1、intl1、bla VIM的相对丰度,抗生素抗性基因tet X、tet G对Cd响应最敏感,低浓度Cd (1 mg/kg)可明显提高tet X、tet G的丰度。此外, Cu、Cd显著(P <0.05)改变了土壤细菌群落结构,并且使细菌群落对Cu的响应更加明显。相关性分析和网络分析表明,sul1、tet X、tet M02、bla VIM广泛分布在多个细菌门,而ARGs的变化与细菌群落(如链霉菌属Streptomyces、慢生根瘤菌属Bradyrhizobium、BIrii41属(Polyangiales)、海无柄孢囊黏细菌属Haliangium等)的变化密切相关,推测这些细菌可能是携带ARGs的主要宿主。     

不同水温和给药方式下磺胺甲噁唑在草鱼体内的药动学研究

在 18℃和 2 8℃的不同水温条件下 ,分别采用口灌和腹腔注射的给药方式 ,给予草鱼 10 0mg/kg体重单剂量的磺胺甲唑 (SMZ) ,以HPLC法测定草鱼血浆和肌肉中药物浓度 ,用MCPKP药代动力学软件处理药时数据 ,结果表明 ,18℃条件下 ,草鱼口灌SMZ的分布半衰期T1/2α、消除半衰期T1/2 β、达峰时间Tp 均显著长于 2 8℃ (P <0 .0 1) ,其峰浓度Cmax显著低于 2 8℃下的值 (P <0 .0 1) ;腹腔注射给药时 ,SMZ在鱼体血浆和肌肉中的吸收与分布较口服快 ,消除较口服也快。在水温 18℃条件下 ,口灌SMZ在草鱼血浆中的药时数据符合带时滞的二室开放模型 ,腹腔注射的符合无时滞二室开放模型 ;水温 2 8℃条件下 ,口灌SMZ在草鱼血浆中的药时数据符合可忽略时滞的二室开放模型。根据SMZ的药代动力学规律、最低有效血药浓度和抗菌药物应用的一般原则 ,制定了SMZ的用药方案 :治疗温水性鱼类细菌性疾病 ,在水温 18℃左右 ,口服或注射 10 0mg/kg剂量的SMZ ,以每天给药两次 ,3d一个疗程为宜 ;在水温2 8℃左右 ,以每天给药 3— 4次为宜。该项研究全面了解了在不同水温和不同给药方式下SMZ在鱼体内的药动学规律 ,为确定合理的临床用药方案以及无公害水产品中药物残留监测提供了可靠的理论依据。     

河口微塑料对抗生素抗性基因的影响研究进展

河口是河流和海洋环境之间过渡的人类活动频繁和充满活力的地区,人类活动产生的污染物使河口生态系统受到威胁。其中,微塑料和抗生素抗性基因作为新型污染物因对河口生物和人类健康具有潜在影响而受到广泛关注。微塑料可以形成独特的生物膜,吸附周围环境中的污染物,为抗生素抗性基因提供潜在宿主,并促进抗生素抗性基因的水平转移。本文综述了微塑料和抗生素抗性基因在河口地区的污染现状,并重点强调了微塑料上形成的生物膜对抗生素抗性基因的富集、运输和转移产生的影响,提出了现有研究中微塑料采样、分析方法和表述单位不同等不足,并对微塑料的生物降解技术和微塑料的潜在风险评估进行展望。     

气溶胶中抗生素抗性基因研究进展

抗生素的不合理使用导致细菌耐药问题日趋严峻,给人类健康造成巨大威胁。学者们对抗生素抗性菌和抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes, ARGs)在多种环境介质中的环境行为开展了大量研究。气溶胶作为ARGs的潜在储存库,是抗生素抗性基因在环境中的重要传播途径之一。目前缺乏对其来源、传播、人类接触和健康风险系统性的梳理。本文针对人类生活功能场所、养殖场、城市污水处理厂和医院等4类气溶胶研究的典型场所,重点综述了上述4类典型场所中气溶胶ARGs的来源、传播途径及对人体的暴露和对健康的危害,为气溶胶中ARGs的预防和控制提供参考。     

土壤噬菌体及其介导的抗生素抗性基因水平转移研究进展

土壤中抗生素耐药性的扩散对全球的公共卫生和食品安全造成威胁,严重挑战人类感染类疾病的预防与治疗.噬菌体介导的抗生素抗性基因(ARGs)的水平转移是环境中抗性基因扩散的重要机制.但是,噬菌体对土壤环境中抗性基因传播的贡献尚未见报道.本文综述了土壤环境中噬菌体的分布特征与影响因子,总结了纯化和富集土壤噬菌体的主要研究方法;...     

Ⅳ型分泌系统及其对细菌重金属抗性的影响

Ⅳ型分泌系统(type Ⅳ secretion system, T4SS)是广泛存在于细菌中的特殊蛋白分泌系统,不同于其他分泌系统,该系统不仅能够转运蛋白质,还能转移DNA、DNA-蛋白质复合物。因此,T4SS具有多种生物学特性。T4SS能介导细菌的接合作用,而接合是水平基因转移(horizontal gene transfer, HGT)的重要机制之一,细菌能够利用T4SS介导的接合作用转移大部分可移动基因元件(mobile genetic element, MGE),如接合型质粒和整合性元件,从而使细菌获得新的基因,这些辅助基因在特定环境条件下有益于帮助细菌获得新功能,有助于细菌在新环境中占据生态位,极大地促进了细菌对环境条件变化的适应性。本文主要对细菌T4SS的生物学作用研究进展进行综述,并探讨了T4SS在细菌适应重金属环境中的作用。     

抗磺胺对甲氧嘧啶单克隆抗体的研制及其特性分析

目的制备针对磺胺对甲氧嘧啶的单克隆抗体,建立对该物质的免疫学检测方法。方法以BSA-磺胺对甲氧嘧啶为免疫原,免疫BALB／c小鼠,取脾细胞与小鼠Sp-2／0骨髓瘤细胞融合后,经筛选和亚克隆,建立杂交瘤细胞株。结果获得2株能稳定分泌抗磺胺对甲氧嘧啶抗体的细胞株。对抗体进行了特性分析,抗体的效价分别为1：400000和1：1630000,抗体类型及亚类都为IgGl。其中,单克隆抗体1H10的亲和力为1．4×109L／mol,利用该抗体采用竞争间接ELISA法检测磺胺对甲氧嘧啶的范围是1025—16μg/mL,最低检测浓度是8μg/mL。单抗1H10与其他6种磺胺药（SMM、SMZ、SM2、SD、SulfaquinoxalineSodium、Sulfametetyrazine）无交叉反应。结论单克隆抗体1H10可用于研制免疫学方法检测磺胺对甲氧嘧啶残留的产品。     

细菌的锌抗性基因及其在生物修复中的应用

随着工业时代的发展,人源性排放已成为环境锌污染的主要来源.这不但破坏了生态系统的稳定,更经食物链富集,对人类健康造成严重威胁.利用含锌抗性基因的(重组)细菌等进行锌治理是生物修复的途径之一.阐述了细菌锌抗性基因的结构、表达产物和一些相关的作用机制,展望其在生物修复方面的应用.     

环境中胞内胞外抗性基因的分离检测、分布与传播

抗生素抗性基因(ARGs)传播对人类健康具有潜在的风险。胞内抗性基因(iARGs)和胞外抗性基因(eARGs)是抗生素抗性基因的两种存在形式,其在不同环境介质中的分布与传播过程具有截然不同的特征。本文首先基于ARGs赋存形态的差异,对染色体抗性基因、质粒抗性基因、噬菌体抗性基因等ARGs的胞内/胞外分类给予明确界定,并根据环境样品来源归纳了现有分离检测技术的应用场景,总结了iARGs和eARGs在养殖场、污水处理厂、河道、海洋、大气等环境中的分布特征,同时比较了其在传播方式和传播能力上的差异,以期为ARGs的分类阻控和健康风险评估提供理论参考。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因与消毒剂抗性的研究

摘要：目的 了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐消毒剂基因携带状况及其对消毒剂抗性水平。方法 采用聚合酶链反应（PCR）法和体外抗菌试验方法进行实验室检测。结果 10株临床分离的MRSA中,检出4株携带qacA/B基因,检出率为40.0%。含氯消毒剂对4株qacA/B基因阳性MRSA的MIC值均高于标准菌株。戊二醛消毒剂对2株MRSA基因阳性MRSA的MIC值和1株MRSA基因阳性MRSA的MBC值高于标准菌株,其他均与标准株相同。结论 临床分离的MRSA qacA/B基因阳性率较高,携带qacA/B基因阳性的MRSA对含氯消毒剂有产生抗性的趋势。     

成都平原不同种植方式折耳根表面附生细菌群落结构与抗生素抗性基因分析

【目的】分析有机、化肥和野生折耳根表面的附生细菌群落结构和抗生素抗性基因(ARGs),揭示细菌群落结构与ARGs相互关系。【方法】高通量测定16SrRNAV3-V4可变区序列分析样品表面附生细菌群落结构;PCR和qPCR扩增29种ARGs基因分析样品表面ARGs污染情况;冗余分析(RDA)探讨细菌群落结构与ARGs的相互关系。【结果】折耳根表面检测到35个属的细菌,其中有机折耳根表面附生细菌多样性低于化肥和野生折耳根(P<0.05);29种被检的ARGs中,有14种在折耳根中被检出,其中有机折耳根含有全部被检出的ARGs,化肥和野生折耳根则含有部分被检出的ARGs。折耳根表面ARGs污染的多样性和丰度显著受到样品表面的菌群结构影响,其中Lactococcus、 Escherichia、Fluviicola、Enterococcus、Sanguibacter和Acidovorax是影响ARGs最主要的菌群。【结论】有机种植极大地改变了折耳根表面附生细菌的群落结构,增加了ARGs的多样性和丰度,对有机折耳根的食品安全带来了潜在威胁。因此,有必要将ARGs污染监测纳入到有机折耳根的食品安全考核范围内。     

磺胺甲恶唑高效降解菌群的多样性分析和降解微生物的分离表征

为了解决养殖水体中抗菌药物磺胺甲恶唑残留污染的问题,以抗菌药物磺胺甲恶唑为唯一碳源,通过连续4次传代富集,获得了磺胺甲恶唑降解菌群。通过16S V3-V4区高通量测序分析了每个代次的群落组成和丰度变化,推测了与磺胺甲恶唑降解相关的菌株信息,进一步连续分离纯化到了磺胺甲恶唑降解菌株LLE3。经16S rDNA及生理生化鉴定,初步将LLE3鉴定为鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）菌株。对该菌进行了降解条件优化,在最优降解条件下（30 ℃,pH 7,接种浓度为5×107 CFU·mL-1）,该菌7 d内对50 mg·L-1的磺胺甲恶唑降解效率可达93.7%。运用高效液相色谱与质谱联用鉴定了菌株LLE3降解后的代谢产物为N-[4-(1,2-恶唑-3-基氨磺酰基)苯基]乙酰胺。研究结果为磺胺甲恶唑污染的水体和土壤环境修复提供了优良的微生物资源。     

不同施肥处理农田土壤中噬菌体与细菌携带抗生素抗性基因的比较

为了揭示有机肥和化肥长期施用对农田土壤噬菌体携带的抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)多样性和丰度的影响,并与土壤细菌携带的ARGs进行对比,本文将土壤抗生素抗性分为细菌和噬菌体两个部分,利用微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术定量分析了土壤噬菌体和细菌DNA中25种ARGs亚型和I类整合子(intl1)的丰度。结果表明,土壤噬菌体中ARGs的检出率和总丰度以及intl1丰度均低于土壤细菌,其中噬菌体中检测到20种ARGs亚型,在不施肥、单施化肥和单施有机肥土壤的噬菌体中,目标ARGs的检出率分别为68%、72%和76%。土壤噬菌体中ARGs的总丰度在有机肥施用土壤中显著高于不施肥和化肥施用土壤(P<0.05),其中多耐药类、大环内酯-林肯酰胺-链阳性菌素B(MLSB)类和β-内酰胺类抗性基因丰度占显著优势。除了β-内酰胺类抗性基因blaTEM,噬菌体中其他ARGs亚型的丰度均显著低于细菌(P<0.05)。噬菌体与细菌携带ARGs在不同施肥处理中均存在显著正相关(P<0.05)。冗余分析...     

不同水温和给药方式下磺胺甲(口恶)唑在草鱼体内的药动学研究

在18℃和28℃的不同水温条件下,分别采用口灌和腹腔注射的给药方式,给予草鱼100mg/kg体重单剂量的磺胺甲(口恶)唑(SMZ),以HPLC法测定草鱼血浆和肌肉中药物浓度,用MCPKP药代动力学软件处理药时数据,结果表明,18℃条件下,草鱼口灌SMZ的分布半衰期T1/2α、消除半衰期T1/2β、达峰时间Tp均显著长于28℃(P＜0.01),其峰浓度Cmax显著低于28℃下的值(P＜0.01);腹腔注射给药时,SMZ在鱼体血浆和肌肉中的吸收与分布较口服快,消除较口服也快.在水温18℃条件下,口灌SMZ在草鱼血浆中的药时数据符合带时滞的二室开放模型,腹腔注射的符合无时滞二室开放模型;水温28℃条件下,口灌SMZ在草鱼血浆中的药时数据符合可忽略时滞的二室开放模型.根据SMZ的药代动力学规律、最低有效血药浓度和抗菌药物应用的一般原则,制定了SMZ的用药方案:治疗温水性鱼类细菌性疾病,在水温18℃左右,口服或注射100mg/kg剂量的SMZ,以每天给药两次,3d一个疗程为宜;在水温28℃左右,以每天给药3-4次为宜.该项研究全面了解了在不同水温和不同给药方式下SMZ在鱼体内的药动学规律,为确定合理的临床用药方案以及无公害水产品中药物残留监测提供了可靠的理论依据.     

生物炭对外源抗生素及其抗性基因的吸附行为与去除机制

随着抗生素在医疗卫生和畜牧养殖等领域的大量使用,目前在很多国家和地区的畜禽粪便、土壤和水体等样品中检测出多种抗生素及其抗性基因残留,这类新型污染物给环境和人类健康带来的危害不容忽视.在当前还无法做到抗生素“零排放”的情况下,如何有效控制抗生素及其抗性基因在环境中的污染水平,是降低其生态风险的有效途径之一.生物炭因具有比...     

九龙江河口及厦门污水处理设施抗生素抗性基因污染分析

【目的】近年来由于抗生素的滥用,导致了多药物抗性超级细菌的产生,有关抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)在环境介质中分布、迁移和扩散已经引起人们的广泛关注。针对九龙江河口及厦门污水处理设施抗生素抗性基因污染情况开展研究。【方法】通过定性PCR研究九龙江河口水体、沉积物和厦门污水处理设施活性污泥中4种磺胺类、13种四环素类ARGs及2种整合子基因的污染情况,并选择四环素类tet(W)基因进行克隆文库测序分析。【结果】除tet(O)和tet(S)外,其他基因均被检出。不同环境介质中的ARGs及整合子基因检出率为活性污泥(0.86)>沉积物(0.57)>水体(0.24)。在淡水和淡盐水中,sul(l)、int(1)、tet(A)、tet(C)、tet(E)、tet(M)和tet(W)的检出率要高于海水,表明九龙江上游可能是ARGs的污染源之一。【结论】主成分分析表明污水处理设施是ARGs的高发载体;沉积物是ARGs的稳定载体;而水体中的ARGs易于分解。此外,tet(W)基因克隆文库分析表明,厦门污水处理设施也可能是九龙江河口及厦门沿岸的ARG污染源。     

基于CiteSpace文献计量的畜禽粪便抗生素抗性基因研究进展与热点分析

自20世纪40年代抗生素被发现以来,抗生素广泛应用于畜禽养殖系统,极大地促进了畜禽健康和生长。由于大多数抗生素的性质都是水溶性的,有30%−90%的兽用抗生素会以母体化合物的形式通过尿液或粪便释放到环境中。抗生素的不当使用会对环境产生选择性压力,促使抗生素抗性基因(antibiotic resistance gene,ARG)快速传播,对人类健康和生态系统构成潜在风险。因此,认识和回顾近20年国内外关于畜禽粪便ARG的研究热点、前沿和趋势,可为畜禽粪便ARG污染管控提供重要参考,也为今后的研究提供思路。本研究应用CiteSpace可视化软件对2002–2022年发表在Web of Science (WoS)核心合集和中国知网(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)的文献通过关键词共现分析、关键词聚类分析、关键词突现分析、发文数量分析、国家分布机构合作共现等方式对畜禽养殖系统中ARG研究现状及新兴趋势进行分析,最终共筛选出896篇有效文献。自2011年以来,畜禽粪便ARG国内外文献发表数量逐年增加,2014年以后增速明显加快,其中英文文献的发文量要多于中文文献;中国是发文量最多的国家,而中国科学院是发文量最多的机构。热门的研究领域包括ARG的产生和来源、在环境中的传播及其对人类病原体的潜在暴露途径及消减机制。今后研究工作可利用宏基组学技术、高通量定量基因芯片手段和单细胞拉曼光谱等新兴分子生物学技术进行更为深入的机理性探索,同时加强畜禽粪便ARG消减技术策略的发展和应用。本文以可视化的方式阐释了畜禽粪便ARG研究发展态势,提出了未来重点研究方向,为管控畜禽粪便ARG提供了理论基础。