关于酶促反应速度与酶反应的初速度的教学

酶促反应速度是酶促反应动力学中的一个基本概念。一定条件下 ,酶催化反应的活力大小要由该反应条件下酶促反应速度来反映和确定 :酶促反应速度越小 ,酶活力越小 ;反之 ,酶促反应速度越大 ,酶活力也越大。在研究底物浓度、酶浓度、温度、ｐＨ、激活剂、抑制剂等因素对酶活力的影响时 ,都必须测定酶促反应的速度。为了排除实验中存在的一些干扰 ,一个酶的酶促反应的速度要在酶促反应进行的初期测定 ,即测定所谓的酶促反应的初速度。在教学过程中 ,学生不易弄清楚酶促反应速度与酶促反应的初速度之间的关系。我们发现 :当一般地问起酶反应速度…     

放线菌果胶酶产酶条件及酶促反应条件的研究

从埋麻土壤中分离到放线菌２９８株,经初筛和复筛得到产酶活性较高的一株放线菌５－７１。最适产酶条件是：果胶０．５％,葡萄糖０．５％,蛋白胨０．５％,酵母粉０．１％,Ｋ２ＨＰＯ４ ０．１％,ＫＨ２ＰＯ４ ０．１％,ＮａＣｌ０．１％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０５％,ｐＨ８．０。２５℃培养３天达产酶高峰。通气量对产酶影响不大。酶促反应最适条件是：ｐＨ９．６,４５℃,底物果胶浓度０．７５％,作用时间９０ｍｉ     

黑曲霉N25株产植酸酶及酶促反应条件研究

从植物种子中研究筛选出高产植酸酶的黑曲霉N25,进行了最适液体培养基的筛选,研究了黑曲霉N25在玉米半合成液体培养基中所产植酸酶的最适酶促反应条件。结果表明：在四种培养基中,玉米半合成液体培养基为最适培养基,黑曲霉N25产植酸酶高峰期在96h,黑曲霉N25所产植酸酶的酶促反应最适pH为2.6和4.6,并具有很好的热稳定性,一定浓度的Ca^2 ,Mg^2 ,Mn^2 ,Cr^3 ,Li^ ,EDTA和高磷是植酸酶活性的抑制剂,1.0mmol/ml聚乙二醇1000,0.3nmol/mL Fe^2 和低磷对植酸酶活性具有激活作用。     

再论一类酶促反应化学动力系统

研究文[2]所讨论过的关于C.S.T.R反应器的一类两分子饱和反应模型x=-k1xy+q(x0+x),y=k1xy-kzy/1+ry-qy,并给出了一些具有指导实践意义的信息.     

血浆氨酶促终点法测定的实验研究

介绍一种用谷氨酸脱氢酶-还原辅酶Ⅰ(GLDH-NADH)为反应系统的血浆氨酶促终点比色测定法.反应体系中加入1.9 kU/L的乳酸脱氢酶(LDH),可排除内源性丙酮酸盐引起NADH消耗所致的吸光度持续下降对测定的干扰.此法测定线性范围为6～200 μmol/L,回收率为90%～105%,批内变异系数小于5%,常规条件下的变异系数小于10%.30例健康志愿者清晨空腹静脉血浆氨水平为10～70 μmol/L.此法操作简单、迅速、精确,适合于常规分析.     

过氧化物酶的定性反应实验的改进

过氧化物酶(peroxidase)广泛存在于植物组织中,少数动物组织也有该酶的存在。过氧化物酶能催化过氧化氢对各种多元酚式芳香族胺的氧化,即 ZMH~++H_2O_2→ZM+H_2O,是生物细胞代谢中起氧化还原反应的重要酶类,在生物氧化中具有重要的位置。此外,它还能有效地防止过氧化氢在机体内的积累,促进组织代谢,对机体具有独特的保护作用。由于该酶在生物氧化、组织代谢等生物化学反应中的重要地位,人们对它的存在、分布、含量、理化性质、提取纯化及结构等方面颇为重视,在诸方面都进行了较深刻的     

酶促反应制备壳寡糖条件的研究

通过膜分离法从Microbacterium sp.OU01的发酵液中分离到内切壳聚糖酶ChiN,并对其酶解制备壳寡糖条件进行了优化,获得的酶解产物数均分子量为1200。经薄层层析与HPLC分析,降解产物中不含单糖,初步说明降解产物为壳寡糖。酶解制备壳寡糖反应条件温和,操作简便,为实现壳寡糖产业化奠定了基础。     

超声对酶的影响

超声对酶的影响与超声的强度和介质的性质有关。适宜的超声可提高酶促反应速度,较低强度的超声可提高酶的活性,而较高强度的超声会降低酶促反应速度甚至使酶失活。介质性质不同时,超声对酶活力的促进效果与稳定性不同。非极性介质中酶对于超声的抗性要优于水溶液。在较低强度的超声作用下,超声增加了底物的传质作用,并可导致酶分子的构象发生变化。     

蕲蛇酶,凝血酶对人及牛纤维蛋白原的凝血反应比较

目的 研究蕲蛇酶、凝血酶与不同种 纤维蛋白原的凝血作用的差异,以选择检定蕲蛇酶活力的最适底物。方法 取不同的浓度人凝血酶与人纤维蛋白原（ＨＦｇ）、牛纤维蛋白原（ＢＦｇ）及人血小板血浆（ＰＰＰ）反应（试管法或用血液凝聚仪）,分别记录初凝时间并求反应曲线的回归方程。蕲蛇酶也稀释成不同深度 上法测定,并求回归方程。另以人凝血酶（１．２５ＩＵ／ｍｌ）、蕲蛇酶（１．２５ＡＵ／ｍｌ）与梯度浓度的ＨＦｇ反应并求     

脆弱拟杆菌β-内酰胺酶的理化及酶学特性

本文对临床分离的脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis),55的β-内酰胺进行了理化及酶学特性的研究。该酶为非诱导性,以头胞菌素酶活性为主．分子量为4 3000,等电点pl为4.95,酶反立最适pH为7.2,最适温变为37℃。该酶对各种底物的Km(μmol／L)值为：头孢噻吩185,头孢噻啶103、头孢唑琳200,头孢羟唑263．头孢氧哌羟苯唑830。对各种底物的相对水解率为头孢羟唑>头孢噻吩>头孢唑啉>头孢塞啶>头孢氧哌羟苯唑>青霉素>氧苄青霉素>头霉甲氧噻吩>羟羧氧酰胺菌素。该酶对羧苄青霉素、头霉甲氧噻吩棒酸青霉烷砜、对氯安息香酸汞及邻氯青霉素的抑制作用敏感。     

酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的酶促反应条件研究

目的:考察酶源保存方式、酶促反应时间、底物pH值、底物浓度、酶浓度、金属离子等因素对酶活力的影响。方法:以假单胞菌(Pseudomonassp.)TS1138为供试菌株,采用酸式茚三酮法测定L-半胱氨酸含量,研究了酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的酶促反应条件。结果:TS1138菌株中L-半胱氨酸脱巯基酶具有较高的活性,而且Mg2 、Mn2 、Fe2 、Zn2 、Cu2 等5种金属离子对DL-ATC水解酶酶系有不同程度的抑制,其中Cu2 对该酶系的抑制作用很大。结论:确定了TS1138菌株酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的最适酶促反应条件,为酶促反应动力学的研究奠定了基础。     

γ-环状糊精葡萄糖基转移酶产生菌32-3-10产酶条件及酶促反应条件的研究

筛选到一株牙孢杆菌32－3－10,它所产γ-环状糊精葡萄糖基转移酶可以淀粉为底物生成γ-环状糊精,对其产酶条件及酶促反应条件进行了研究。     

金针菇酶促褐变的区域分布及调控

金针菇的多酚氧化酶（ＰＰＯ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性在全株中呈现区域化分布。菌盖的酶活性最低,菌柄上部酶活性稍高,菌柄中部较高,菌柄下部活必同。用硫脲、亚硫酸盐、ＣａＣｌ２、高ＣＯ２、低Ｏ２、低温等方法处理金针菇,对以上三种酶的活性均有抑制作用。高Ｏ２、Ｈ２Ｏ２和温度的提高无益一种酶生。高Ｎ２（减压后充Ｎ２）不能抑制三种酶活性。     

竹笋脚料过氧化物酶的提纯及酶学性质的研究

竹笋经加工成食品后,大量脚料被丢弃,严重浪费资源,污染环境.文中采用水抽提、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-52离子交换层析三步法从竹笋脚料中快速提取并纯化该酶;同时对该酶部分的醇学性质(温度、pH时酶促反应的影响、酶的热稳定性、酸碱稳定性)进行了考查.结果表明经过纯化后的过氧化物酶的Rz值达到2.5,纯化倍数为12倍,回收率为28%.最适反应温度为55℃,最适pH为6.8,且其温度和pH的适用范围均较宽,热稳定性和酸碱稳定性均较高的中性同工酶.这些优越的酶学性质能为竹笋脚料过氧化物酶的应用提供依据.     

荧光发光测定AGPase活力方法初步建立及应用

腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)活力传统上采用32P同位素标记反应底物来测定,但因测定条件的限制而极大地影响了其应用.该研究依据荧光素酶催化荧光素生成发光氧化荧光素的原理,在优化基本反应体系、确立反应体系ATP浓度和荧光强度线性关系等基础上,初步建立了以荧光发光反应测定AGPase活力的新方法,并运用新方法测定了含有不同glgC基因拷贝数菌株的AGPase活力.测定结果显示,不同菌株AGPase活力随glgC拷贝数不同存在显著差异,且其变化趋势与理论预期一致,即新方法可用于AGPase活力的体外测定,且具有更加安全、灵敏、简便和成本低的特点.