实时荧光核酸恒温扩增技术和液体培养法检测解脲脲原体的比较

目的:对实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)和液体培养法检测解脲脲体(UU)的结果进行评估,以选择更为快速、准确、实用的临床检测方法.方法:共采集180例疑似泌尿生殖道感染患者的尿液及2份拭子样本,一份拭子样本用液体培养,另一份拭子和尿液样本用 SAT 检测.结果:液体培养和尿液 SAT 检测阳性率均为61.1%,拭子SAT 检测阳性率为63.3%,其中16例拭子培养和拭子 SAT 检测结果不一致,18例拭子培养和尿液 SAT 结果不一致,但与拭子培养比较,拭子和尿液 SAT 结果均无统计学意义(P>0.05,kappa>0.75).结论:SAT 检测 UU 可以尿液为样本,检测效能与液体培养和拭子 SAT 基本相当,但尿液 SAT 法取样方便,检测快速,适临床实验室对 UU 的检测.     

环介导等温扩增技术对解脲脲原体的临床检测

目的建立并优化环介导等温扩增(LAMP)技术对解脲脲原体(U.urealyticum)的检测,并应用于临床样本分析。方法针对U.urealyticum的urease基因设计LAMP引物;研究LAMP的最适温度、最佳检测时间及灵敏度和特异度;与传统PCR检测进行方法学比对。结果 LAMP技术检测U.urealyticum的最适温度和最佳时间分别是61℃和60 min,并且具有良好灵敏度和特异度,较普通PCR检测的灵敏度高出1 000倍。临床样本检测中,PCR和LAMP技术达到的灵敏度分别为25.00%和87.50%。两种方法的特异度均为100.00%。结论 LAMP与PCR相比在基层检测和大规模筛查方面有显著的优势和巨大的利用价值。     

实时荧光核酸恒温扩增技术在检测分泌物中MRSA的应用

目的 对实时荧光核酸恒温扩增技术（simultaneous amplification and testing method,SAT）检测创面分泌物中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）核酸试剂盒（RNA恒温扩增）应用进行评价。方法 收集我院临床各科室于2016年12月至2017年1月送至检验科微生物室347份分泌物标本,分别用实时恒温扩增技术和ChromID MRSA产色平板筛选MRSA。当SAT法和MRSA培养结果不相符时,进行冻存的备用标本PCR扩增、第三方测序,以MRSA培养结果加PCR测序结果作为本次试验“扩大金标准”,计算SAT的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值,并进行相应的统计学分析。结果 以ChromID MRSA产色平板筛选加PCR测序作为“扩大金标准”,SAT法检测MRSA的敏感度为90.91%、特异度为99.40%、阳性预测值为83.33%、阴性预测值为99.40%,对MRSA的最低检出下线为102拷贝/mL,Kappa系数为0.85。结论 SAT技术在检测分泌物中MRSA具有很高的灵敏度、特异性,而且准确、可靠,与传统的细菌培养相比耗时短,为MRSA的实验室诊断提供新的检测方法。     

核酸恒温扩增技术研究进展

核酸恒温扩增技术在生命科学研究及相关诸多领域已经得到了广泛应用。我们对核酸恒温扩增技术的最新进展作一简要综述,包括环介导恒温扩增、链替代扩增、依赖核酸序列的扩增、滚环扩增、切口酶核酸恒温扩增、依赖解旋酶的恒温扩增、转录依赖的扩增、杂交捕获法、转录介导的扩增等的原理、优缺点及应用。     

自然流产胚胎组织解脲脲原体检测分析

初步探讨解脲脲原体（Uu）感染与自然流产的相关性。对82例自然流产,44例人工流产（对照组）的胚胎组织进行Uu的人工分离培养,并对部分组织的超薄切片及培养物负染片置电镜下观察。结果显示,自然流产胚胎组织Uu的检出率为64．6％（53．82）,与对照组相比6．8％（3／44）,具有显著性差异（P＜0．001）;电镜下观察,Uu检出阳性标本中合体滋养细胞和细胞滋养细胞膜表面见大量的Uu颗粒,与阳性培养物经负染后了颗粒相似,而Uu阴性对照标本中未见此颗粒,提示：Uu可引起宫内感染,损伤绒毛膜滋养细胞,是导致自然流产的重要病原体之一。     

男性患者解脲脲原体三种不同检测方法评价及药敏分析

目的 对男性患者解脲脲原体进行三种检测方法的对比研究及药敏分析。方法 选取桂林医学院附属医院自2015年1月至2015年12月收治的406例男性解脲脲原体感染患者作为临床研究对象,分别同时用培养鉴定法、DNA实时荧光定量法（RT-PCR）及RNA实时荧光恒温扩增检测（SAT）法三种方法对标本进行检测。以培养鉴定法作为对照组,对比RT-PCR及SAT方法对解脲脲原体的阳性检出率。结果 培养鉴定法、RT-PCR、SAT法阳性检出率分别为41.7%、35.5%、43.6%,培养鉴定法与SAT法阳性检出率明显高于RT-PCR,具有显著差异(χ2=4.35,P=0.0362);培养鉴定法与SAT法阳性率无明显差异（χ2=2.89,P=0.0982）,有较好的一致性（K=0.890,P＜0.05）;药敏结果显示,解脲脲原体对强力霉素、美满霉素敏感性较高,敏感率为97.6%。结论 对男性疑似解脲脲原体感染患者建议选择不同检测方法诊断以保证阳性检出率,可以更好指导临床抗生素合理使用。     

不孕不育患者解脲脲原体菌株血清型别的检测

本文以解脲脲原体标准菌株１－１４型免疫家获得ＵＵ１－１４型抗血清。用ＩＤＴ法对４８株自不孕不育患者分离的地方株作分型试验。结果在１．２．４．５．６．７．８和１２血八个清型中出现强阳性反应,其中４型最多。另有４株混合型。对四种血清型无反应。     

解脲脲原体生物膜药敏检测方法的研究进展

解脲脲原体（Uu）生物膜的培养及药敏检测技术是继支原体体外游离药敏试验之后,探讨Uu耐药水平与耐药机制的又一重要手段。然而由于支原体生长的生物学特性,使实验中需要多次更换培养基,增加了污染的概率。培养过程中的杂菌污染由此成为决定Uu生物膜实验成功与否的一大问题。本文将对解脲脲原体生物膜的培养与药敏检测技术,从检测方法、常见污染途径与解决策略3个方面展开,对相关文献作一综述。     

溶脲脲原体12个血清型标准株与6个地方分离株主要蛋白组份的分析

经SDS—PAGE和薄层扫描分析,18株溶脲脲原体有从分子量19—175KD 20多条蛋白区带。主要蛋白组份分布在32—140KD范围之间。其中32、52和94KD蛋白组份各株间差别较大,而其余主要蛋白组份各株间较类似。按蛋白组份的不同可将溶脲脲原体分为A、B两群。^群包括2、5、7、9、10、11、12血清型标准株和U_C、U_D、U_E、U_F地方分离株。B群包括1、3、6、13、14和U_A、U_B株。仅用SDS—PAGE方法分析溶脲脲原体蛋白组份不能区别菌株间的血清型。     

不育患者精子溶脲脲原体的分离和活动力的观察

本文对８７例不明原因不育的男性患者的精液,进行了溶脲脲原体的分离,检出率为６２．０７％,而３８例正常对照中,溶脲脲原体的检出率为１８．４２％,二者差别非常显著（Ｐ＜０．００１）。溶脲脲原体感染者精子的活动率与活动力同正常人相比,差异显著（Ｐ＜０．０５）,提示溶脲脲原体感染与部分男性不育有关。     

广州地区女性下生殖道感染致病微生物分析

目的 对广州地区女性下生殖道感染致病微生物状况进行调查,用以指导临床正确诊断治疗。方法 对以外阴瘙痒及自带增多为主诉的妇女患者进行临床检查,先取阴道分泌物进行pH、胺试验及假丝酵母菌、滴虫和线索细胞检查,同时采用特制密封棉拭子宫颈管内取样,然后采用重量差减法,求出分泌物的重量,采用荧光定量PCR测定解脲脲原体、淋球菌、沙眼衣原体,可疑部位取材作HSV和HPV检测及梅毒血清学检查。结果 在533例入选患者中,解脲脲原体感染345例占64．7％,沙眼衣原体感染142例占26．6％,阴道假丝酵母菌病117例占22％,非特异性阴道炎81例占15％,细菌性阴道病17例占0．03％。尖锐湿疣12例占0．02％。淋病5例,梅毒4例,生殖器疱疹2例,滴虫阴道炎2例。结论 解脲脲原体、沙眼衣原体、阴道假丝酵母菌病是当前广州地区女性下生殖道感染的主要致病微生物,在选用抗生素时要兼顾解脲脲原体、沙眼衣原体。     

2018-2020年杭州市泌尿生殖道炎症患者生殖支原体感染调查

目的 检测泌尿生殖支原体（Mycoplasma genitalium,MG）核酸以了解杭州地区泌尿生殖道炎症患者生殖支原体（MG）感染情况。方法 采用实时荧光核酸恒温扩增技术（SAT）检测杭州市第三人民医院2018年1月至2020年12月共3 901例疑似生殖泌尿道感染患者MG-RNA,同时也检测淋球菌（NG）、沙眼衣原体（CT）和解脲支原体（UU）。结果 3 901例患者中,共检测出MG-RNA阳性患者262例,阳性率为6.7%,其中男性MG阳性率为7.0%(237/3364),女性为4.7%(25/537),两组差异具有统计学意义（P<0.05）。随着年龄的增大,阳性率越低。男性≤20岁组阳性率最高,为13.9%(16/115);女性≥60岁组无检出（0/52）。MG与UU合并感染率最高,女性感染率高于男性（P<0.01）。各年龄组MG阳性率差异有统计学意义（P<0.01）。结论 杭州地区泌尿生殖道感染患者的MG感染率较高,男性MG感染率高于女性,不同年龄段男女MG感染情况并不相同,提示临床需重视该类疾病的MG检测。     

Inhibition of adhesion-promoting activity of a human salivary protein which promotes adhesion of Streptococcus mutans JBP to hydroxyapatite

The adhesion-promoting proteins (APP) (molecular mass approx. 300 kDa), which promote adhesion of Streptococcus mutans JBP (serotype c) to hydroxyapatite, were isolated from human submandibular-sublingual (SMSL) saliva by gel filtration on a Trisacryl GP2000 M column. The effects of hexoses, pentoses, methyl-pentoses, hexosamines, N-acetylhexosamines, a basic amino acid, polyamines and ammonium chloride on the bacterial adhesion-promoting activity of the APP were examined. Galactosamine, mannosamine, L-lysine, spermine, putrescine, and ammonium chloride inhibited the adhesion-promoting activities of the APP. The other sugars, including the N-acetylhexosamines, were without effect. Thus, compounds containing a primary amino-group appear to have a specific inhibitory effect on adhesion of S. mutans JBP to APP adsorbed onto hydroxyapatite, an activity which is lost if the amino-group is acetylated.     

解脲脲原体药物敏感性变迁研究

目的:探讨上海地区2008与2012年泌尿生殖道解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)耐药性变化,为临床合理用药提供参考。方法:采用自制UU药物敏感检测试剂对2008年450例和2012年459例患者的标本进行检测,观察UU阳性情况及UU对交沙霉素、氧氟沙星、阿奇霉素和强力霉素的药物敏感性。结果:2008年分离到150例UU阳性标本和2012年分离到134例UU阳性标本分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等4种抗菌素的敏感率有显著性差异;2008年46例和2012年38例男性患者阳性标本中分离的UU分别对交沙霉素和阿奇霉素敏感率有显著性差异;对强力霉素和氧氟沙星敏感率无显著性差异。2008年104例和2012年96例女性患者阳性标本中分离的UU分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等4中抗菌素的敏感率都有显著性差异。结论:5年间UU药物敏感性发生了变迁;临床医师应该关注本地区药物敏感性变迁,合理选用抗生素。