从不同植物上来的几个烟草花叶病毒分离物的初步比较研究

试验比较了油菜花叶病15号分离物(YMV15),地黄退化病(DDV)分离物,毛白楊球状丛生(PV)的分离物以及烟草花叶病毒(TMVl)在寄主反应、体外抗性和血清学方面的异同。三个分离物和TMv-在心叶烟,普通烟等鉴定寄主有相似的反应,但是它们在另一些寄主上的反应又有显著的差别。例如,只有YMVt5能侵染油菜和白菜;YMV-s和DDV在菜豆上不就产生局部斑点,而TMV。和’PV却与TMv的大多数毒株一样有此反应。YMvB和DDv在卓前的接种叶上产生枯斑反应,而’rMVi和Pv且¨不表现病状。三个分离物都和TMvl一样极易通过机械接种传染而不能借桃蚜传染;井且具有相近TMV-的稀释限度(10一L一10“),但致死温度TMV-和Pv为92~(3及90℃,而YM’V15和DDV均为86qc。四个分离物的抗血清都有交互的血清沉淀反应。但YMVls与DDV之嗣的反应鞍强,TMVt与PV的反应亦较强。在交互吸收试验中证明YMVt,与DDV的抗血清中有较多的共同抗体,而TMvl与PV的抗血清中亦有较多的共同抗体。交互血清反应,寄主范围,体外抗性,传染方法,都指出它们是FMV的毒株。TMVl极接近于国外TMV的普通株,PV近似黄化奥古巴花叶毒株,YMVL15有些象Holmes的卓前株。作为TMV毒株的最大特点是它们来自与烟草相距极远的植物,因此探讨这些毒株的起源将是很有兴趣的。     

几个烟草花叶病毒毒株的化学和物理化学的比较研究

在植物病毒中,烟草花叶病毒(TMV)是研究得最多的一种。从Stanley的工作开始到目前的20几年内,已经积累了有关TMV的大量资料。在化学方面,TMV普通株的氨基酸排列顺序已经完全阐明。在物化方面,它的四级结构,分子形状也研究得很     

豆科植物上分离的黄瓜花叶病毒（CMV）五个分离物的比较研究

从豌豆、扁豆、菜豆和赤豆分离到五个ＣＭＶ分离物,除寄主反应及核酸组分外,５个分离物在体外抗性、蚜虫传毒、提纯病毒粒体形态和稳定性、衣壳蛋白分子过和病毒粒体迁移率等方面无明显差异．在琼脂糖双扩散试验中五个分离物与ＣＭＶ抗血清形成的沉淀线相互融合,在Ａ蛋白双抗体夹心ＥＬＢＡ测定中,也无明显差异。根据在四种豆科植物上的症状反应,五个分离物可归为两个型：Ⅰ型在豌豆、蚕豆、菜豆和豇豆上产生局部枯斑症状;Ⅱ型在这四种植物上产生系统症状。五个分离物中,ＣＭＶＰ＿２含有五个枝酸组分,其它分离物为四个组分,即ＣＭＶＰ＿２可能含有卫星ＲＮＡ．     

十字花科蔬菜上黄瓜花叶病毒分离物的比较研究

对从杭州市郊青菜、萝卜、花椰菜上分离的6个CMV分离物进行了生物学、血清学及双链RNA比较研究。生物学测定结果表明,不同分离物在所测定的6种十字花科蔬菜上的致病力有差异。6种分离物颗粒形态、衣壳蛋白分子量和血清学方面无差异,且都属血清型Ⅰ。dsRNA分析结果表明,6个分离物的dsRNAl,2,3和4在PAGE中迁移率相似,但在1.5kb～0.4kb之间有多条量相对较少的条带,这些条带在不同分离物之间差异较大。6个分离物均含有卫星RNA。     

烟草花叶病毒辽宁分离物Northern杂交检测体系的建立

为了建立烟草花叶病毒辽宁分离物(TMV-LN)的高特异性、高灵敏度的分子杂交检测体系,从粗提纯的TMV-LN粒子中提取RNA,设计特异性引物通过RT-PCR扩增TMV-LN的CP和3'端非翻译区域,将片段连至p UC119载体获得重组质粒p UCTMV-PP,体外转录获得地高辛(DIG)标记的TMV-LN正义链RNA杂交检测探针,同时构建DNA检测探针作为对照。采用点印迹(Dot-blot)杂交和Northern杂交对比RNA探针和DNA探针对TMV-LN的检测特异性和灵敏性。检测结果表明,RNA探针和DNA探针在点印记杂交和Northern杂交中均表现出良好的检测特异性,RNA探针在检测灵敏度方面要略好于DNA探针,且点印迹杂交体系在病毒定性方面较为快捷,Northern杂交体系在病毒基因组RNA的定量方面具有明显优势。     

从烟草上分离的黄瓜花叶病毒

黄瓜花叶病毒(CMV)危害烟草已成为烟区严重病害之一,如山东烟区CMV引起的烟草病毒病发病率达50%以上。CMV在福建烟区的发病率也达15～30%。上述调查系根据烟草田间症状表现以及温室内不同鉴别寄主的反应和抗性测定得到。为了进一步     

从烟草上分离的黄瓜花叶病毒

黄瓜花叶病毒(CMV)危害烟草已成为烟区严重病害之一,如山东烟区CMV 引起的烟草病毒病发病率达50%以上。GMV 在福建烟区的发病率也达15～30%。上述调查系根据烟草田间症状表现以及温室内不同鉴别寄主的反应和抗性测定得到。为了进一步研究与肯定CMV 引起的烟草病毒病,有必要由病株分离病毒和进行电子显微镜观察鉴定。     

用互补DNA杂交技术研究中国分离的几个烟草花叶病毒组RNA序列的同源性

用互补DNA分子杂交技术研究了烟草花叶病毒组的几个中国分离物RNA序列的同源性。结果表明,杨树丛顶病毒(PV)、地黄退化病毒(DDV)、烟草花叶病毒普通株(TMVc)、番茄株(TMVts)及其突变体(TMV_(N_(14))可归于TMV-U_1株所代表的亚组。油菜花叶病毒15(YMV_(15))与TMV-U_1株无关,在所比较的病毒中是一独特的成员。     

用互补DNA杂交技术研究中国分离的几个烟草花叶病毒组RNA序列的同源性

用互补DNA分子杂交技术研究了烟草花叶病毒组的几个中国分离物RNA序列的同源性。结果表明,杨树丛顶病毒(PV)、地黄退化病毒(DDV)、烟草花叶病毒普通株(TMVc)、番茄株(TMVts)及其突变体(TMVN_(N_(14)))可归于TMV-U_1株所代表的亚组。油菜花叶病毒15(YMV_(15))与TMV-U_1株无关,在所比较的病毒中是一独特的成员。     

从云南烟草上检测到的黄瓜花叶病毒亚组II分离物

在对云南省烟草病毒病的研究中,分离到一种直径约26～30nm的球形病毒。提纯病毒进行的SDSPAGE发现一条55kD蛋白带。55kD蛋白N端10个氨基酸与CMV亚组II的Q株系外壳蛋白N端氨基酸同源性为100%。以CMVQ抗血清对55kD蛋白进行了Western blot检测,发现55kD蛋白与CMV Q株系抗血清有血清学反应。根据已报道的CMV亚组II外壳蛋白基因序列合成引物,采用RTPCR技术扩增到一条约09kb的cDNA条带,并进行了克隆及序列测定,经Genbank比较,发现此09kb cDNA包含一657bp的外壳蛋白基因,其核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与CMV亚组II分离物有极高的同源性,分别达97%～98%和96%～99%,而与亚组I分离物的同源性仅为75%～76%和78%～79%。因此,该球形病毒应为CMV亚组II的一个分离物,命名为CMVYnb。     

从云南烟草上检测到的黄瓜花叶病毒亚组Ⅱ分离物*

在对云南省烟草病毒病的研究中,分离到一种直径约２６￣３０ｎｍ的球形病毒。提纯病毒进行的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ发现一条５５ｋＤ蛋白带。５５ｋＤ蛋白Ｎ－端１０个氨基酸与ＣＭＶ亚组Ⅱ的Ｑ株系外壳蛋白Ｎ－氨基酸同源性为１００％。以ＣＭＶ－Ｑ抗血清对５５ｋＤ蛋白进行了Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测,发现５５ｋＤ蛋白与ＣＭＶ Ｑ株系抗血清有血清学反应。根据已报道的ＣＭＶ亚组Ⅱ外壳蛋白基因序列合成引物,采用ＲＴ－ＰＣＲ     

侵染西番莲属(Passiflora)植物的五个黄瓜花叶病毒分离物的特性比较

从紫果西番莲（Ｐａｓｉｆｌｏｒａｅｄｕｌｉｓ）、杂交种西番莲（Ｐ．ｅｄｕｌｉｓＸＰ．ｅｄｕｌｉｓｖａｒ．ｆｌａｖｉｃａｒｐａ）、黄果西番莲（Ｐ．ｅｄｕｌｉｓｖａｒ．ｆｌａｖｉｃａｒｐａ）、转心莲（Ｐ．ｃａｅｒｕｌｅａ）及龙珠果（Ｐ．ｆｏｅｔｉｄａ）分离到的５个黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离物（ＰＥ、ＰＥ２、ＰＥｆ、ＰＣ、ＰＦ）所作的生物学性质、理化特性和血清学关系的比较研究结果表明,５个分离物在寄主反应及血清学性质上存在不同,而在病毒粒体形态、体外抗性、蚜虫传毒和病毒外壳蛋白分子量方面无明显差异。根据５个分离物的寄主反应和血清学关系,可将其区分为ＣＭＶ的两个亚组,其中ＰＥ、ＰＥ２、ＰＣ和ＰＦ属ＣＭＶ亚组Ｉ,ＰＥｆ属ＣＭＶ亚组Ｉ。     

侵染西番莲属(Passiflora)植物的五个黄瓜花叶病毒分离物的特性比较

从紫果西番莲(Passiflora edulis)、杂交种西番莲(P. edulis X P.edulis var. flavicarpa)、黄果西番莲(P.edulis var. flavicarpa)、转心莲(P.caerulea)及龙珠果(P.foetida)分离到的5个黄瓜花叶病毒(CMV)分离物(PE、PE2、PEf、PC、PF)所作的生物学性质、理化特性和血清学关系的比较研究结果表明,5个分离物在寄主反应及血清学性质上存在不同,而在病毒粒体形态、体外抗性、蚜虫传毒和病毒外壳蛋白分子量方面无明显差异.根据5个分离物的寄主反应和血清学关系,可将其区分为CMV的两个亚组,其中PE、PE2、PC和PF属CMV亚组I,PEf属CMV亚组II.     

广东烟草花叶病毒株系研究

烟草花叶病毒（TMV）引起的烟草花叶病在广东不同的烟草主产区存在着症状的差异。从广东梅州和南雄烟区采集的138个TMV标样中,选取6个不同症状的分离物作为研究对象,发现它们在不同种属寄主和不同烟草品种上表现明显的TMV普通株特征症状,虽然在某些寄主上其症状也有一些差异,但未能反映株系间的差异。这6个分离物具有几乎相同的病毒粒体形态、电泳迁移率、钝化温度以及紫外吸收特征。经琼脂双扩散法和间接ELISA法的血清学反应,表明它们具较强的血清学关系。因而它们有很强的同源性。经病毒粒体外壳蛋白的氨基酸分析,在氨基酸总数上,分离物GD1和GD3各有156个氨基酸．GD2和GD4各有159个,GD5和GD6分别有158和157个氨基酸。上述分析试验结果初步表明,在广东不同烟草主产区引起的症状有所差异的6个分离物均属IMV普通株。     

云南五个不同地区烟草花叶病毒外壳蛋白基因的序列比较

Five Tobacco mosaic virus isolates, obtained from tobacco leaves showing typical symptom in Qujing, Honghe, Dali, Chuxiong and Yuxi in Yunnan province, were selected and studied from 637 TMV samples. Using a pair of primers specific for TMV-U1 strain, a specific fragment of 530bp including the TMV coat protein gene was amplified using IC-PCR. The products of PCR were cloned and sequenced. The nucleotide and amino acid sequences of the coat protein of the five isolates were found to be very similar each other and have more than 90% sequence identity with TMV-U1, TMV-B,TMV-P, TMV-FUJIAN, although minor differences existed among them. The results showed that the five isolates from Yunnan province belong toTMV-U1 strain.     

云南五个不同地区烟草花叶病毒外壳蛋白基因的序列比较

烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是烟草花叶病毒属(Tobamovirus)中的典型成员,具有极广的寄主范围,可以侵染30个科的310多种植物,为单组份正链ssRNA病毒,TMV基因组RNA由6395个核苷酸组成,共有4个ORF,分别编码183kDa、126 kDa、30 kDa和17.5 kDa蛋白[1,2].     

侵染蚕豆的烟草花叶病毒研究

１９９３年４月从杭州蚕豆田病株上分离获得病毒分离物Ｂ－９３５Ａ,汁液摩擦接种５科１９种植物,Ｂ－９３５Ａ能侵染３科１２种植物。被侵染的蚕豆产生黄斑、花叶,后期叶片黄化并有坏列;在菜豆上产生局部枯斑。Ｂ－９３５Ａ的钝化温度为８５－９０摄氏度,稀释限点为１０＾－８－１０＾－７。病毒粒体杆状,平均长度约３０ｎｍ,病毒的衣壳蛋白亚基只有一条多肽链,分子量约为１７．５ＫＤ,包裹的核酸为单链ＲＮＡ,长约６．４     

用单克隆抗体作芜菁花叶病毒不同分离物外壳蛋白抗原结构的比较研究

用芜菁花叶病毒辽宁分离物（ＴｕＭＶ－ＬＮ）,山东分离物（ＴｕＭＶ－ＳＤ）和榨菜分离物（ＴｕＭＶ－ＺＣ）作抗原,分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,经脾细胞与ＳＰ２／Ｏ－Ａｇ１４骨髓细胞融合,共获得７个单克隆抗体分泌细胞株,为研究３个分离物的抗原差异,用胰蛋白酶消化ＴｕＭＶ的外壳蛋白（ＣＰ）。分别形成４、２和１条降解带,经ＳＤＳ－１５％ＰＡＧＥ后,转移至硝酸纤维薄膜上,用３个分离物的抗血清和７种单隆抗体分别做