miR-153-5p靶向SNAI1介导结直肠癌细胞的放疗抵抗

目的 探讨miR-153-5p在结直肠癌放疗抵抗中的作用,并进一步研究其潜在分子机制。方法 首先对放疗敏感细胞系SW480及放疗抵抗结直肠癌细胞系SW480R中miR-153-5p表达水平进行RT-qPCR检测;然后利用转染技术构建过表达miR-153-5p的SW480R细胞株,检测过表达miR-153后SW480R在接受放射后其细胞活力、侵袭能力、集落形成能力、凋亡水平的改变;免疫组织化学染色观察放疗敏感及放疗抵抗结直肠癌组织中SNAI1的表达差异;TargetScan分析miR-153-5p潜在靶点并利用荧光素酶实验验证;检测过表达miR-153-5p及SNAI1后SW480R细胞侵袭能力、集落形成能力及凋亡水平。结果 与SW480组相比,SW480R组细胞中miR-153-5p表达降低;过表达miR-153-5p的SW480R细胞细胞活力、侵袭能力、集落形成能力均明显减弱,而凋亡水平显著增加;与放疗敏感结直肠癌组织相比,放疗抵抗结直肠癌组织中SNAI1显著增加;SNAI1可能为miR-153-5p的作用靶点;过表达miR-153-5p及SNAI1后SW480R细胞侵袭能力、集落形...     

肝细胞癌组织miR-124-3p、miR-212-5p表达与PI3K/Akt信号通路和预后的关系研究

摘要 目的：探讨肝细胞癌组织中微小核糖核酸（miR）-124-3p、miR-212-5p表达与磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路和预后的关系。方法：选择2017年9月至2019年9月徐州医科大学附属医院肝胆外科收治的93例肝细胞癌患者,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肝细胞癌组织中miR-124-3p、miR-212-5p、PI3K 信使RNA（mRNA）、Akt mRNA的表达。Pearson相关性分析miR-124-3p、miR-212-5p表达与PI3K/Akt信号通路相关mRNA表达的相关性。绘制Kaplan-Meier生存曲线,Log-Rank检验不同miR-124-3p、miR-212-5p表达肝细胞癌患者3年总生存率（OS）的差异。结果：肝细胞癌组织中miR-124-3p表达低于癌旁组织（P＜0.05）,miR-212-5p、PI3K mRNA、Akt mRNA表达高于癌旁组织（P＜0.05）。肝细胞癌组织中miR-124-3p表达与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈负相关（P＜0.05）,miR-212-5p表达与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈正相关（P＜0.05）。Ⅱa期、低分化患者肝细胞癌组织中miR-124-3p表达低于Ⅰa-Ⅰb期、中高分化患者（P＜0.05）,miR-212-5p表达高于Ⅰa-Ⅰb期、中高分化患者（P＜0.05）。随访期间死亡37例, miR-124-3p低表达组3年OS为42.55%,低于miR-124-3p高表达组的78.26%（P＜0.05）,miR-212-5p高表达组3年OS为50.00%,低于miR-212-5p低表达组的71.11%（P＜0.05）。结论：肝细胞癌组织中miR-124-3p表达下调,miR-212-5p表达上调,且与肝细胞癌PI3K/Akt信号通路激活,PI3K mRNA和Akt mRNA高表达,低分化,CNLC分期Ⅱa期以及低OS有关。     

弥散加权成像参数联合血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p对脑胶质瘤术前分级的评估价值

摘要 目的：探讨弥散加权成像（DWI）参数联合血清长链非编码核糖核酸-核富集丰富转录本1（LncRNA-NEAT1）、microRNA（miR）-182-5p对脑胶质瘤术前分级的评估价值。方法：112例脑胶质瘤患者根据术后病理分级将其分为低级别组（60例）和高级别组（52例）。术前所有患者接受DWI检查获得表观弥散系数（ADC）、相对ADC（rADC）参数。检测脑胶质瘤患者的血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p表达。受试者工作特征（ROC）曲线分析DWI参数联合血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p诊断脑胶质瘤术前分级的价值。结果：高级别组ADC、rADC值低于低级别组（P＜0.05）,血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p高于低级别组（P＜0.05）。ADC、rADC、LncRNA-NEAT1、miR-182-5p诊断脑胶质瘤术前高分级的曲线下面积（AUC）分别为0.834（95%CI：0.756~0.896）、0.840（95%CI：0.762~0.900）、0.784（95%CI：0.700~0.853）、0.812（95%CI：0.731~0.878）,联合诊断AUC为0.959（95%CI：0.907~0.987）,高于单独指标诊断。结论：高级别脑胶质瘤患者ADC、rADC降低,血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p升高,联合DWI参数（ADC、rADC）和血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p检测对脑胶质瘤术前分级具有较高的诊断价值。     

miR-192-5p调节TP53对肝细胞癌顺铂耐药的影响

[目的]探索miR-192-5p与TP53在顺铂耐药的SMMC-7721细胞(SMMC-7721/DDP)中的作用。[方法]实时荧光定量PCR检测顺铂耐药与非耐药的肝细胞癌组织中miR-192-5p及TP53的表达。将顺铂耐药的SMMC-7721细胞分为4组：miR NC组、miR-192-5p inhibitor、pcDNA3.1 NC和pcDNA3.1 TP53组。实时荧光定量PCR检测顺铂耐药和非耐药细胞中miR-192-5p与TP53的表达;CCK-8实验分析SMMC-7721/DDP细胞的增殖能力;通过Transwell实验分析SMMC-7721/DDP细胞的侵袭能力;通过流式细胞术分析SMMC-7721/DDP细胞的凋亡率;通过荧光素酶报告基因实验分析SMMC-7721/DDP细胞中miR-192-5p与TP53的靶向关系。[结果]与非耐药的肝细胞癌组织比较,顺铂耐药的肝细胞癌组织中的miR-192-5p表达水平增加,TP53表达水平降低。与SMMC-7721细胞比较,SMMC-7721/DDP细胞中的miR-192-5p表达水平增加,TP53表达水平降低。与miR NC组比较,miR-192-5p inhibitor组的SMMC-7721/DDP细胞的增殖活性降低、侵袭能力降低(78.26±1.36 vs 36.52±2.33,P<0.05)、凋亡率增加(5.75%±0.17%vs 10.76%±0.62%,P<0.05)。与pcDNA3.1 NC组比较,pcDNA3.1 TP53组的SMMC-7721/DDP细胞的增殖活性降低、侵袭能力降低(72.11±2.56 vs 33.73±1.83,P<0.05)、凋亡率增加(5.86%±1.51%vs 9.28%±1.39%,P<0.05)。荧光素酶活性测定显示,与miR NC组比较,在TP53-WT组中转染miR-192-5p inhibitor后荧光素酶活性增加(0.51±0.06 vs 0.78±0.02,P<0.05),TP53表达水平增加(0.38±0.05 vs 0.69±0.05,P<0.05)。[结论]在顺铂耐药的肝细胞癌组织和细胞中,miR-192-5p高表达而TP53低表达,并且miR-192-5p能够靶向抑制TP53的表达。通过下调miR-192-5p或增加TP53的表达能够抑制顺铂耐药的肝细胞癌的进展。     

UPF1甲基化和miR-744-5p/CCND1在甲状腺乳头状癌中的作用机制研究

摘要 目的：探讨UPF1甲基化和miR-744-5p/CCND1在甲状腺乳头状癌中的作用机制研究。方法：将人甲状腺乳头状癌细胞株TCP-1和正常甲状腺上皮细胞Nthy-ori-3分别用去甲基化试剂5-Aza-CdR进行干预,分别在干预前后采用甲基化特异性PCR技术检测UPF1基因甲基化变化,采用Western-Blotting 检测干预UPF1、DNMT1、miR-744-5p、CCND1蛋白相对表达,采用transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭情况。结果：PCR扩增显示,UPF1基因在Nthy-ori-3组仅出现非甲基化引物扩增条带（U条带）,在TCP-1组仅出现甲基化引物扩增条带（M条带）。经5-Aza-Cdr作用后,UPF1基因甲基化扩增条带减少,甲基化表达降低。各组UPF1、DNMT1、miR-744-5p、CCND1蛋白相对表达差异具有统计学意义（P＜0.05）。与Nthy-ori-3组比较,TCP-1组DNMT1、UPF1蛋白相对表达明显提高,miR-744-5p、CCND1蛋白相对表达明显降低（P＜0.05）;与TCP-1组比较,TCP-1干预组DNMT1、UPF1蛋白相对表达明显降低,miR-744-5p、CCND1蛋白相对表达明显提高（P＜0.05）。与TCP-1组比较,TCP-1干预组细胞侵袭、迁移数量明显减少（P＜0.05）。结论：UPF1甲基化存在于甲状腺乳头状癌中,UPF1基因甲基化的表达缺失可能抑制miR-744-5p/CCND1轴,在甲状腺乳头状癌发生发展中发挥关键作用。     

LINC00342/miR-505-3p/PGK1基因在乳腺癌患者肿瘤转移中的表达以及对细胞生物学特性的影响

长链非编码RNA LINC00342已被证实在多种癌症中参与重要生物学功能。然而,LINC00342在乳腺癌中的作用和机制尚不清楚。在该研究中,选取28例乳腺癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织,乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞,用qRT-PCR检测LINC00342、miR-505-3p和磷酸甘油酸激酶1(PGK1) mRNA的表达情况。Western blot检测PGK1蛋白的表达情况。将乳腺癌细胞MCF-7分为NC组(空白)、si-LINC00342组(转染si-LINC00342)、si-NC组(转染si-NC)、miR-505-3p组(转染miR-505-3p模拟物)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-PGK1组(转染si-PGK1)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC00342+pcDNA-PGK1组(同时转染si-LINC00342与pcDNA-PGK1)和siLINC00342+pcDNA组(同时转染si-LINC00342与pcDNA)。利用Western blot检测PGK1、迁移侵袭标志物基质金属蛋白酶MMP2和MMP9的表达情况, MTT法检测细胞增殖能...     

基于生物信息学分析研究miR-182-5p通过靶向调控EP300促进乳腺癌细胞的侵袭和转移

近期研究表明,miR-182-5p对多种癌症的侵袭和转移具有重要作用,但其在乳腺癌侵袭转移中的研究相对较少。本研究通过网上在线microRNA分析工具下载乳腺癌组织及正常乳腺组织表达比较的数据集,分析发现在GSE4589、GSE38167、GSE61438等3个数据库中,在乳腺癌组织中存在26个相同的microRNA,其中8个上调,而我们实验验证发现hsa-miR-182在8例病理组织中的表达上调差异最显著(P=0.001),选定目的基因hsa-miR-182;qRT-PCR检测细胞中miR-182-5p的表达,结果显示,与MCF-10A相比,miR-182-5p在MDA-MB-231、T47D、MDA-MB-453、MCF-7中表达上调(P<0.05);转染miR-182-5p干扰质粒,qRT-PCR检测细胞中miR-182-5p的表达情况。结果显示,miR-182-5p表达显著降低(P=0.003),提示转染成功;Transwell侵袭结果显示, MDA-MB-231细胞敲低miR-182-5p,与对照组相比,体外侵袭能力明显降低(P=0.002);Western印迹检测转染miR-182-5p干扰质粒时,MDA-MB-231中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物的表达情况,结果显示,与对照组相比,敲低miR-182-5p使细胞中上皮-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达上调,神经-钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达下调。为研究探讨miR-182-5p的靶蛋白,采用在线预测软件预测可能与miR-182-5p结合的靶蛋白,cytoscape构建蛋白质互作网络图并筛选出hub基因;双荧光素酶结果证实,miR-182-5p可与EP300靶向结合(P=0.001);采用qRT-PCR、Western印迹检测转染miR-182-5p干扰质粒后EP300在mRNA及蛋白质水平的表达,结果显示,与对照组相比,在敲低miR-182-5p组中EP300在mRNA及蛋白质的表达上调(P=0.001)。综上所述,miR-182-5p可靶向调节EP300,促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。     

miR-182-5p靶向XBP1对氧糖剥夺/复氧诱导的神经细胞损伤的影响

该文探究mi R-182-5p靶向内质网应激相关蛋白剪接型X盒结合蛋白1(X-box bindingprotein1,XBP1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucosedeprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的神经细胞损伤的影响。选择大鼠神经细胞(PC-12)对研究对象,随机将其分为:Control组、OGD/R组、mi R-NC组(OGD/R+转染mi R-NC)、mi R-182-5pmimics组(OGD/R+转染mi R-182-5pmimics)、mi R-182-5pmimics+pc DNA-NC组(OGD/R+转染mi R-182-5pmimics+pc DNANC)、mi R-182-5pmimics+pc DNA-XBP1组(OGD/R+转染mi R-182-5pmimics+pc DNA-XBP1)。除Control组常规培养外,其余各组均进行OGD/R诱导。q RT-PCR法检测细胞mi R-182-5p、XBP1m RNA表达情况;CCK8检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA法检测细胞SOD、MDA、IL-6、TNF-α水平; Western blot检测细胞中PCNA、caspase-9、Bax、XBP1蛋白的表达情况;双荧光素酶实验检测mi R-182-5p与XBP1互作情况。结果显示,与Control组相比, OGD/R组mi R-182-5p表达、存活率、克隆数、SOD水平、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05);与OGD/R组、mi R-NC组相比,mi R-182-5pmimics组mi R-182-5p表达、存活率、克隆数、SOD水平及PCNA蛋白表达水平升高(P<0.05),凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平降低(P<0.05);与mi R-182-5p mimics组、mi R-182-5p mimics+pc DNA-NC组相比,mi R-182-5pmimics+pc DNA-XBP1组存活率、克隆数、SOD水平及PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05);与mi R-NC+XBP1-WT组相比,mi R-182-5pmimics+XBP1-WT组双荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。总之,mi R-182-5p可能通过靶向抑制XBP1表达,进而抑制OGD/R诱导的神经细胞损伤。     

miR-1271-5p靶向PDK1促进胃癌细胞凋亡

目的 探讨miR-1271-5p在胃癌的作用和可能的作用机制。方法 RT-qPCR和原位杂交法检测胃癌组织和胃癌细胞株中miR-1271-5p的表达。Lipofectamine 2000转染miR-1271-5p mimics后,噻唑蓝（MTT）法和台盼蓝染色法检测SGC-790细胞的活性,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,JC-1探针检测线粒体膜电位,Western blot检测PDK1/Akt/凋亡信号相关蛋白的表达。荧光素酶法以及功能修复实验评估miR-1271-5p与PDK1的靶向关系。结果 胃癌组织和细胞中miR-1271-5p的表达降低。转染miR-1271-5p mimics后,SGC-790细胞的存活率下降,凋亡率上升,线粒体膜电位以及Bcl-2和p-AKT表达降低,Bax和Cleaved caspase-3表达增高。PDK1为miR-1271-5p的靶基因,过表达PDK1能逆转miR-1271-5p对胃癌细胞的促凋亡作用。结论 过表达miR-1271-5p可促进胃癌细胞凋亡,其机制可能与其靶向PDK1进而抑制AKT信号活性有关。     

LINC00680通过靶向miR-195-5p调控IL-17诱导的肺癌细胞增殖、迁移和侵袭

该文主要讨论LINC00680靶向调控miR-195-5p对IL-17诱导的肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。将肺癌细胞H1299分为Control组、IL-17组、IL-17+si-NC组、IL-17+si-LINC00680组、IL-17+si-LINC00680+anti-miR-NC组、IL-17+si-LINC00680+anti-miR-195-5p组。采用qRT-PCR检测LINC00680和miR-195-5p的表达;克隆形成实验、MTT检测细胞增殖情况;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测Ki67、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平;荧光素报告实验验证LINC00680和miR-195-5p靶向关系。与Control组比较,IL-17组LINC00680相对表达量、克隆细胞数、细胞活力、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67和N-cadherin蛋白合成产物明显增加,E-cadherin蛋白、miR-195-5p相对表达量明显减少。与IL-17+si-NC组比较,IL-17+si-LINC00680组LINC00680...     

LncRNA MCM3AP-AS1调节miR-424-5p/PSAT1轴对乳腺癌恶性进展的影响

摘要 目的：探讨长链非编码核糖核酸（lncRNA）微小染色体维持蛋白3相关蛋白-反义链1（MCM3AP-AS1）调节微小核糖核酸（miR）-424-5p/磷酸丝氨酸氨基转移酶1（PSAT1）轴对乳腺癌恶性进展的影响。方法：采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞株MDA-MB-231、BT549、BT20中LncRNA MCM3AP-AS1、miR-424-5p和PSAT1 信使核糖核酸（mRNA）的表达水平。构建LncRNA MCM3AP-AS1低表达模型、miR-424-5p敲低与过表达模型,并使用RT-qPCR方法验证转染模型构建的成功。分别采用四氮甲基唑蓝（MTT）法、Transwell实验检测乳腺癌细胞株的增殖、迁移、侵袭能力。免疫印迹法检测各组MDA-MB-231细胞中细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和PSAT1蛋白的表达。经生物信息学分析后,采用双荧光素酶报告基因实验与RNA免疫共沉淀（RIP）实验分别验证LncRNA MCM3AP-AS1与miR-424-5p、miR-424-5p与PSAT1之间的靶向关系。结果：在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、BT549、BT20中MCM3AP-AS1、PSAT1 mRNA的表达水平显著高于MCF-10A（P＜0.05）,miR-424-5p表达水平显著低于MCF-10A（P＜0.05）。敲低MCM3AP-AS1或过表达miR-424-5p均可以降低MDA-MB-231细胞的吸光度（OD₄₉₀）值、细胞迁移数目和细胞侵袭数目、CyclinD1、N-cadherin和PSAT1蛋白表达水平（P＜0.05）,提高细胞E-cadherin蛋白表达水平（P＜0.05）。敲低miR-424-5p的表达逆转了下调MCM3AP-AS1对MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭以及相关蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验与RIP实验证实MCM3AP-AS1靶向负调控miR-424-5p表达,miR-424-5p靶向负调控PSAT1的表达。结论：LncRNA MCM3AP-AS1在乳腺癌中呈高表达,其低表达可通过靶向调节miR-424-5p/PSAT1轴抑制乳腺癌的恶性进展。     

miR-28-5p影响结肠癌细胞迁移活力的分子机制初探

目的 探讨miR-28-5p影响结肠癌细胞迁移活力的分子机制. 方法 选用结肠癌细胞(HCT116细胞)进行实验,实验分为两部分.第一部分实验:将HCT116细胞分为空白对照组(control组)和爱拉斯汀组(erastin组),control组不进行特殊处理,erastin组使用加有20μM erastin的培养基培...     

血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平与股骨颈骨折患者骨折延迟愈合的关系及其预测价值分析

摘要 目的：探讨血清微小核糖核酸（miR）-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平与股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的关系及对术后骨折延迟愈合的预测价值。方法：选择2020年1月~2022年10月在徐州医科大学附属医院行内固定治疗的292例新鲜股骨颈骨折患者为研究对象。于术后4周复查时,检测患者血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平;并根据其骨折愈合情况分为延迟组（n=36）和愈合组（n=256）。采用多因素Logistic回归分析股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p对股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的预测价值。结果：术后4个月复查时,骨折延迟愈合发生率为12.33%。两组年龄、吸烟史、合并糖尿病组间比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。愈合组血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平均高于延迟组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、合并糖尿病、血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平降低是股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的独立危险因素（P＜0.05）。ROC曲线结果显示,三者联合检测的曲线下面积（AUC）（0.95CI）为0.841（0.738~0.936）,高于各指标单独应用时的AUC,三者联合检测的灵敏度和特异度亦高于单一指标检测。结论：血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p在股骨颈骨折术后骨折延迟愈合患者中呈低表达,是骨折延迟愈合的独立危险因素,三者联合检测对股骨颈骨折患者骨折延迟愈合具有较高的预测价值。     

乙型肝炎病毒通过miR-183-5p/THBS1轴促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭

乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）是一种嗜肝性非细胞病变DNA病毒,可导致肝硬化、肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）等严重的肝脏疾病。目前认为HBV诱导的HCC涉及病毒因素和多个宿主因素之间复杂的相互作用。环状RNA(circRNA)是一种新型非编码RNA分子,在肿瘤的发生、发展中有重要的调控作用。有研究表明circRNA THBS1通过吸附miR-129-5p调控基因SOX4的表达促进非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭。然而,circRNA THBS1在肝癌中的作用机制尚不清楚。miRNA在多种癌症中作为致癌物或抑癌因子调控肿瘤的形成。本研究拟探究HBV对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响和具体作用机制,CCK8和Transwell实验探究HBV对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的影响;双荧光素酶报告验证miR-183-5p和THBS1的关系;qRT-PCR检测miR-183-5p和THBS1 mRNA水平;Western blot检测增殖、迁移相关蛋白PCNA、MMP2和MMP9水平。在本研究中,用含HBV基因组的腺病毒感染HepG2细胞记为HBV组,正常HepG2细胞记为NC组。将过表达miR-183-5p、过表达miR-183-5p+沉默THBS1病毒载体转染至HBV感染的HepG细胞中,记为miR-183-5p过表达组、miR-183-5p+THBS1沉默组。与NC组相比,HBV组内miR-183-5p表达水平降低,THBS1表达水平升高,HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力显著增强;与HBV组相比,miR-183-5p过表达组、miR-183-5p+THBS1沉默组HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力被显著抑制。乙型肝炎病毒通过降低miR-183-5p表达上调THBS1,进而促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

肝细胞癌中miR-92a的表达及其对HepG2细胞凋亡的影响

目的:探讨miR-92a与肝细胞癌的相关性,及其表达改变对肝细胞癌HepG2细胞凋亡的影响.方法:实时定量PCR检测肝细胞癌和癌旁正常组织中miR-92a的表达;将miR-92a的抑制物miR-92a inhibitor转染了肝细胞癌HepG2细胞,然后检测了转染后细胞的凋亡.结果:与癌旁正常组织相比,肝细胞癌组织中miR-92a的表达显著上调;转染后miR-92a inhibitor组的凋亡率显著增加.结论:miR-92a与肝细胞癌的发生相关,抑制其表达能够促进肝细胞癌细胞凋亡,在肝细胞癌中发挥癌基因的作用.     

lncRNA BCAN-AS1/miR-1224-5p/Wnt轴调控舌鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的机制研究

为探讨长链非编码RNA(lncRNA)BCAN-AS1在舌鳞状细胞癌中的表达以及BCAN-AS1/miR-1224-5p/Wnt轴调控舌鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的机制,本研究用cBioPortal数据库分析舌鳞状细胞癌组织中BCANAS1的表达,利用qRT-PCR检测BCAN-AS1在人正常口腔角质细胞（HOK）和舌鳞状细胞癌细胞（Tca8113、HNl3、SCC-9、TSCCA、SCC-15）中的表达。体外培养SCC-9细胞,并将其分为Con组（转染阴性质粒）和si-BCAN-AS1组（转染si-BCAN-AS1质粒）。利用克隆形成试验和Transwell试验分别检测各组SCC-9细胞的增殖和侵袭能力。利用双荧光素酶报告试验验证BCAN-AS1和miR-1224-5p的互补结合。利用cBioPortal数据库分析舌鳞状细胞癌组织中BCAN-AS1和miR-1224-5p表达的相关性。利用qRT-PCR检测miR-1224-5p在各组SCC-9细胞中的表达。利用Western blot法检测SCC-9细胞中Wnt/β-catenin通路蛋白的表达。与癌旁组织比较,BCAN-AS1在舌鳞状细胞癌组织中表达较高（P<0.01）。与HOK细胞相比,BCAN-AS1在Tca8113、HNl3、SCC-9、TSCCA、SCC-15细胞中表达均较高（P<0.01）。si-BCAN-AS1组细胞增殖能力和侵袭能力均低于Con组（均P<0.01）。BCAN-AS1可靶向结合miR-1224-5p(P<0.01)。舌鳞状细胞癌组织中BCAN-AS1和miR-1224-5p的表达呈现明显的负相关（P<0.01）。干扰BCAN-AS1表达后,SCC-9细胞中miR-1224-5p表达升高（P<0.01）,Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Cyclin D1、с-mус、MMP-7表达均下降（均P<0.01）。舌鳞状细胞癌中BCAN-AS1高表达,下调BCAN-AS1可通过miR-1224-5p/Wnt/β-catenin轴调控舌鳞状细胞癌SCC-9细胞的增殖和侵袭。本研究表明,BCAN-AS1可能成为舌鳞状细胞癌靶向治疗的分子靶点。     

喉鳞状细胞癌组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达水平与PI3K/Akt信号通路、临床病理特征和预后的关系

摘要 目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达水平与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、临床病理特征和预后的关系。方法：选取2017年1月至2020年1月南充市中心医院收治的120例LSCC患者,取手术切除的LSCC组织和癌旁组织。检测miR-1207-5p、miR-186-5p、PI3K mRNA、Akt mRNA表达。患者出院后随访3年,统计总生存（OS）和无复发生存（RFS）情况。分析miR-1207-5p、miR-186-5p与PI3K、Akt的相关性以及影响LSCC患者预后的因素。结果：LSCC组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达低于癌旁组织（P＜0.05）,PI3K mRNA、Akt mRNA表达高于癌旁组织（P＜0.05）。LSCC组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈负相关（P＜0.05）。肿瘤直径≥1 cm、低分化、TNM分期Ⅲ期、颈部淋巴结转移LSCC组织中miR-1207-5p、miR-186-5p表达低于肿瘤直径＜1 cm、中高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无颈部淋巴结转移（P＜0.05）。miR-1207-5p低表达、miR-186-5p低表达LSCC患者3年总生存（OS）率和无复发生存（RFS）率低于miR-1207-5p高表达、miR-186-5p高表达LSCC患者（P＜0.05）。多因素COX回归分析显示TNM III期、颈部淋巴结转移是LSCC患者复发和死亡的危险因素（P＜0.05）,高miR-1207-5p、高miR-186-5p是保护因素（P＜0.05）。结论：LSCC组织中miR-1207-5p和miR-186-5p表达均下调,与LSCC恶性病理特征、PI3K/Akt信号通路激活以及低生存率有关。     

miR-138-5p靶向缺氧诱导因子1α对胰腺癌PANC-1细胞生长和转移的调节作用

目的探索miR-138-5p对胰腺癌细胞PANC-1生长、转移的影响及其相关机制。方法应用荧光实时定量PCR (real-time quantitative PCR, RT-PCR)检测miR-138-5p及其缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1 alpha, HIF-1α)在PANC-1细胞中的表达。应用荧光素酶报告检测验证miR-138-5p与HIF-1α之间的生物学关系。通过体外试验研究miR-138-5p、HIF-1α在PANC-1细胞中的生物学功能,Western blot检测蛋白表达情况;CCK-8检测PANC-1细胞增殖能力;Transwell试验检测PANC-1细胞侵袭能力;划痕试验检测PANC-1细胞迁移能力。结果 miR-138-5p表达明显下调HIF-1α表达水平(P<0.01),生物信息学预测和荧光素酶报告试验证明miR-138-5p通过直接结合HIF-1α 3′-未翻译区域(3′-UTR)抑制HIF-1α。在PANC-1细胞中,miR-138-5p过表达可抑制HIF-1α表达及细胞增殖、侵袭、迁移,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-138-5p结合HIF-1α 3′-UTR的沉默HIF-1α;miR-138-5p通过打靶HIF-1α而抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖和转移。HIF-1α可能是胰腺癌的治疗靶点。