Variant forms ofα-2-l-fucosyltransferase in human submaxillary glands from blood group ABH “secretor” and “non-secretor” individuals

The properties of the -2-l-fucosyltransferases in submaxillary gland preparations from blood group ABH secrefors and non-secretors were compared. The level of activity in the non-secretor gland homogenates amounted to about 5% only of that found in the secretor gland preparations. The enzymes from the two sources differed in solubility properties, charge and affinities for donor and acceptor substrates. The enzyme from secretor glands showed a preference for acceptors with Type 1 [d-galactosyl(1–3)-N-acetyl-d-glucosamine] structures whereas the enzyme from non-secretor glands had a preference for Type 2 [d-galactosyl(1–4)-N-acetyl-d-glucosamine] structures.These results demonstrate that expression of the secretor gene (Se) is associated with a molecular form of the -2-l-fucosyltransferase that is different from the species present in the same tissue when theSe gene is not expressed.     

Carotenoid pigments of Stigmatella aurantiaca (Myxobacterales)

Summary In this first article on the carotenoids of Myxobacterales we report on the minor carotenoids of Stigmatella aurantiaca: phytoene, phytofluene, lycopene, -carotene, 4-keto--carotene, 1,2-dihydro-1-hydroxy--carotene, 4-keto-1,2-dihydro-1-hydroxy--carotene, 4-keto-1,2-dihydro-1-hydroxy-torulene, and 1,2,1,2-tetrahydro-1,1-dihydroxy-lycopene. These pigments account for about 10% of total carotenoids.     

An elongated segment of DNA observed between two human α globin genes

Summary Detailed restriction enzyme analysis of the DNA from a Chinese female showed that one of her chromosomes had a >17.5 kb deletion of DNA, including the , 2, and 1 globin genes, which is present in many Southeast Asians with an -thalassemia-1 chromosome. Her normal chromosome had the expected cluster of -like globin genes (5----2-1-3), but the segment of DNA between the two globin genes was elongated by some 0.5–0.7 kb. Analyses of various restriction sites suggested that this normal variant of the human globin gene complex is due to a crossover between a normal chromosome with () and a chromosome with an -thalassemia-2 (–^3.7) and an -21-hybrid gene.     

A comparison and evaluation of some phytosociological techniques

Summary In three areas of vegetation (dune, mountain heath and salt marsh) the following phytosociological techniques have been tested and compared, using the same data: the Braun-Blanquet method; association and inverse analysis ofWilliams &Lambert; cluster analysis (agglomerative classification) based on different coefficients of similarity; and ordination (principal components analysis performed on matrices of different coefficients).The Braun-Blanquet method is considered to combine several advantages of the other methods and to be most economical in terms of efficiency (ratio of time input to information emerging).

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Zusammenfassung Auf drei verschiedenen Vegetationsflächen (Bergheide, Küstendünen und Salzwiesen) sind die folgenden pflanzensoziologischen Methoden geprüft und verglichen worden: die Methode von Braun-Blanquet; association analysis vonWilliams &Lambert (1959, 1961); Ordination (principal components analysis); und cluster analysis (Sokal &Sneath, 1963). Die letzteren beiden wurden mit verschiedenen Ähnlichkeitskoeffizienten geprüft.Auf Grund solchen Erfahrungen, zeigte sich die Braun-Blanquetische Methode leistungsfähiger als die anderen Methoden (d.h. optimale Einsicht in der Vegetation pro Arbeitsstunde). Sie vereinigte viele Vorteile der anderen Methoden.

     

über die biologie blutsaugender simuliiden (diptera) I. Besamungsrate der ♀♀ beim blütenbesuch und anflug auf den blutwirt

Zusammenfassung Außer an ihren Blutwirten findet man die bei uns heimischen Simuliiden regelmäßig im Frühjahr auf der Weißweide (Salix alba), im Sommer auf den gelbgrünen Blüten und Früchten des Pastinak (Pastinca sativa) und im Herbst auf den grünen Blüten des Efeu (Hedera helix). Die Blüten zumindest von Pastinak und Efeu werden von allen Simuliidenarten selektiv angeflogen. Die übrigen Umbelliferen bleiben, auch wenn sie in unmittelbarer Nähe von Pastinak wachsen, unberührt. Efeu wird auch dann reichlich angeflogen, wenn er in einzelnen Stöcken an entlegenen Plätzen wächst. Alle von Simuhiden nachweislich direkt angeflogenen Blüten haben eine in der Natur unauffällige, entweder gelbe, gelbgrüne oder rein grüne Farbe und offene Nektarien. Aus diesen Gründen scheint mindestens beim Anflug auf Efeu und Pastinak eine olfaktorisch gesteuerte Orientierung vorzuliegen. Sie ist offenbar viel spezifischer als die vorwiegend optische Orientierung derselben Simuliidenarten nach ihren Blutwirten.Durchschnittlich sind etwa doppelt soviele wie auf Blüten anzutreffen. Abends und nachts sowie an kalten, regnerischen Tagen findet man mehr Simuliiden auf Pastinak als an sonnigen Tagen. Die auf Blüten angetroffenen der mammalophilen Simuliidenarten Wilhelmia salopiensis, W. equina, Boophthora erythrocephala und Odagmia ornata sind durchschnittlich zu 90% besamt, die der ornithophilen Art Eusimulium latipes nur zu 32%. Bei allen Arten fanden sich auf Blüten stets auch einige mit Blut im Mitteldarm oder legereifen Eiern im Abdomen. Der Blütenbesuch kann demnach vor und nach dem Blutsaugen stattfinden.Beim Anflug auf den Blutwirt sind die der genannten mammalophilen Arten ebenfalls zu rund 98% besamt, die von E. latipes wiederum nur zu 53%. Das Verhalten dieser Art, welche auch nachts Blut saugt, scheint von dem der mammalophilen Arten hinsichtlich der Geschlechterfindung erheblich abzuweichen.Das bekannte tagesperiodische Anflugsverhalten der auf ihren Säugetierblutwirt mit je einem Maximum nach Sonnenaufgang und vor Sonnenuntergang läßt sich auch bei den zugehörigen feststellen, wean man berücksichtigt, daß die den Blutwirt nicht direkt anfliegen, sondern ihn nur umschwärmen.Das Anflugsverhalten der und ist von der Änderung der Lichtintensität in der Zeiteinheit (Wolfe u. Peterson 1960), das Schwarmverhalten der allein von der absoluten Tageshelligkeit (Wenk 1965b) abhängig. Die Kopulation kann demnach einerseits morgens und abends in der Nähe des Blutwirtes und andererseits tagsüber beim Schwärmen der stafffinden. Wie wir später direkt zeigen konnten, sind beide Arten der Geschlechterfindung zur Kopulation bei drei von den vier genannten mammalophilen Simuliidenarten verwirklicht (Wenk 1965b). Die Kopulation von O. ornata und der ornithophilen Art E. latipes konnten wir dagegen selbst nie beobachten.

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Summary Simuliids of South-Western Germany show a marked preference for the white willow (Salix alba) in spring, the yellow blossoms of parsnip (Pastinaca sativa) in summer, and the green blossoms of ivy (Hedera helix) in autumn, whereas all the other Umbelliferae are disregarded, although they may be numerous and in close proximity. Ivy will be found by many simuliids even if growing in single plants at hidden places. All flowers for which a predelection by simuliids can be clearly established are inconspicuous under natural conditions — being of yellow, yellowish green or pure green colour — and their nectaries are of the open type. Therefore orientation of these simuliids to their nectar donors seems to rely on olfactoric senses and is apparantly much more specific than optical orientation to the blood hosts of the same species.On average, about twice as many are found on blossoms than During the evening and night; as well as on cold rainy days, more simuliids are encountered on parsnip than on sunny days. The of the mammalophilic species Wilhelmia salopiensis, W. equina, Boophthora erythrocephala and Odagmia ornata are inseminated at the rate of 90% , the of the ornithophilic species Eusimulium latipes at 32% only. In all species, some have been found with blood in the midgut or eggs in the abdomen, i. e. visiting of flowers may take place before or after bloodsucking.All of mammalophilic species attacking their blood hosts are inseminated at the rate of 98%, the of the ornithophilic species E. latipes at 53% only. The behaviour of the latter, which is bloodsucking also at nighttime, seems to differ considerably with regard to sexfinding orientation from the mammalophilic species.The diurnal periodicity of mammalophilic in attacking the host —with the well-known maxima at sunrise and sunset — is the same for the , bearing in mind that do not attack the hosts of their directly but are flying around them. Consequently, copulation may take place either in the morning and evening near the blood host, or during the day in the swarms of . It has been demonstrated for three of the four mammalophilic species mentioned (WENK, 1965b) that sex-finding and copulation occur at both occasions.

     

Über das Verhalten von Champignonstämmen in Mischkultur

Zusammenfassung Mischungen aus dem Mycel sweier weißer oder zweier brauner Stämme des Kulturchampignons hatten keinen Einfluß auf den Fruchtkörperetrag.Bei Mischungen aus einem weißen und einem braunen Stamm was dagegen der Ertrag immer niedriger als erwartet und das Mycel verschwand verhältnismäßig schnell. Der Ertragsausfall beruht in der Regel auf einer Unterdrückung des braunen Stammes.Herrn Prof. von Sengbusch zum 65. Geburtstag in Dankbarkeit und Verehrung gewidment.     

Synthesis of deoxygalactose-containing sialyl LeX ganglioside analogues to elucidate the structure necessary for selectin recognition

Sialyl Lewis X ganglioside analogues containing 4-deoxy-, 6-deoxy-, and 4,6-dideoxy-d-galactopyranose in place ofd-galactopyranose have been synthesized. Glycosylations of 2-(trimethylsilyl)ethyl 2,6-di-O-benzyl--d-galactopyranoside and 2-(trimethylsilyl)ethyl -d-fucopyranoside with the phenyl 2-thioglycoside derivative of sialic acid, usingN-iodosuccinimide (NIS)-trifluoromethanesulfonic acid (TfOH) as the promoter in acetonitrile, gave the desired 2-(trimethylsilyl)ethyl sialyl--(23)--d-galactopyranoside and--d-fucopyranoside, respectively. The sialylgalactose derivative obtained was then modified to 4-deoxy and 4,6-dideoxy derivatives. These were converted, byO-benzoylation, transformation of the 2-(trimethylsilyl)ethyl group to trichloroacetimidates, and introduction of the methylthio group with methylthiomethysilane, into the corresponding glycosyl donors, which were then coupled with 2-(trimethylsilyl)ethylO-(2,3,4-tri-O-benzyl--l-fucopyranosyl)-(13)-O-(2-acetamido-6-O-benzyl-2-deoxy--d-glucopyranosyl)-(13)-2,4,6- tri-O-benzyl--d-galactopyranoside in the presence of dimethyl(methylthio)sulfonium triflate (DMTST). The resulting pentasaccharides were each converted to the corresponding -trichloroacetimidates, which, on coupling with (2S, 3R, 4E)-2-azido-3-O-benzoyl-4-octadecene-1,3-diol, gave the desired sphingosine derivatives. Selective reduction of the azide group,N-acylation with octadecanoic acid,O-deacylation, and saponification of the methyl ester afforded the target compounds.Synthetic Studies on Sialoglycoconjugates, Part 79.     

Struktur-Differenzierungen im Y-Chromosom von Drosophila hydei und ihre Beziehungen zu Gen-Aktivitäten

Summary During the growth stage of the primary spermatocytes of Drosophila hydei intranuclear structures can be seen, which are comparable to the loops of lampbrush chromosomes. These structures are formed by specific organizers. Sequence and loci of these organizers on the Y chromosome have been mapped by cytogenetic methods, using Y translocations and Y fragments. For the localization analysis the long arm of the Y chromosome is divided into ten equal segments which are designated 1–10 starting at the kinetochore. The organizer of the loop called threads is located in segment 10 or 9 at the distal tip of the long arm, the chromosome site which forms the pseudonucleolus is located in segment 9 or 8, the locus of the site for the tubular ribbons was determined in segment 2 or 3 and that for the clubs in segment 1. A new, fifth loop of the Y chromosome has been detected. It has been called noose and its organizer lies on the short arm of the Y chromosome. Large parts of the Y chromosome, including one segment which is more than one half of the long arm are not involved in loop-formation. If Y chromosome segments containing any one of the five loops are lacking, the males are always sterile. Furthermore, spermiogenesis is blocked at different stages depending upon which of the loops is absent. The possible role of the genetic information located within the loops is discussed.

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Herrn Prof. Dr. H. Bauer zum 60. Geburtstag

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Verf. dankt Herrn Prof. Dr. W. Beermann für häufige fruchtbare Diskussionen, Herrn Dr. G. F. Meyer für mehrjährige gute Zusammenarbeit, Herrn Prof. Dr. M. M. Green für manche wertvolle Anregung, Fräulein M. U. Hinrichs für umfangreiche technische Assistenz und Herrn E. Freiberg für die sorgfältige Ausführung der Abbildungsvorlagen.     

Ganglioside-cholera toxin interactions: a binding and lipid monolayer study

Summary On t.l.c. plates ¹²⁵I-cholera toxin binds to a disialoganglioside tentatively identified as GD_lb with about 10 times less capacity than to ganglioside GM₁. Binding of labeled toxin to both gangliosides was abolished in presence of excess amounts of unlabeled B subunit. Ganglioside extracts from human or pig intestinal mucosa showed toxin binding to gangliosides GM₁ and GD_1b. In ganglioside-containing lipid monolayers the penetration of the toxin was independent of the ganglioside binding capacity.Abbreviations GM₂ Gal-NAc14Gal(3-2NeuAc)14G1c1Cer - GM₁ Gal3Ga1-NAc14Gal(32NeuAc)14G1c11Cer - GD_1a NeuAc23Ga113Gal-NAc14Gal(32NeuAc)14G1c11Cer - GD1b Gall3Gal-NAcl4Gal(32NeuAc82NeuAc)14Glc11Cer - GT_1b NeuAc23Ga113Ga1-NAcal4Gal(3-2NeuAc82NeuAc)14G1c11Cer - dpPC 1,2-hexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine - dpPE 1,2-hexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine     

Micropropagation of flowering dogwood (Cornus florida) from seedlings

A method for regenerating whole plants from nodal (axillary bud) cultures of seedlings was developed for flowering dogwood (Cornus florida L.). The seed source significantly influenced the rate of proliferation, although cultures initiated from each of the seven mother trees produced some shoots. Woody plant medium (WPM) was superior to either Murashige and Skoog or Schenk and Hildebrandt basal medium. 6-Benzyladenine (BA) at 2.2 or 4.4 m stimulated the generation of significantly more useable shoots (1 cm) compared to all other concentrations (0.5–22.5 m tested. Thidiazuron (TDZ) at 0.6 and 1.1 m supported proliferation, but strongly inhibited shoot elongation. TDZ initiated cultures transferred to medium containing 4.4 m BA produced usable shoots after five additional subcultures. Shoots generated adventitious roots when exposed to either a 12-h pulse of relatively high concentrations (246–1230 m or continuous lower concentrations (0.5–49.0 m of indolebutyric acid (IBA) for longer periods. Microshoots produced the significantly greatest number of roots when subjected to 4.9 m IBA in WPM over a 4-week period. Whole plants were acclimatized to the laboratory conditions and subsequently to the greenhouse. The methodology described here should be useful in a breeding program by supplying multiple copies of unique, recombinant genotypes.     

Das Sphaeridion,eine weit verbreitete Differenzierung des Karyoplasma

Zusammenfassung In vielen Arten normaler Zellen wurden regelmäßig kugelige Karyoplasmadifferenzierungen, die Sphaeridien, gefunden. Diese zwischen 0,3 und 1,5 dicken definierten Kernstrukturen kommen in verschiedenen Typen vor: filamentöser, granulärer, globulärer und membranöser Typ. Die Verbreitung der Sphaeridien wird hinsichtlich der Gewebsarten und der Säugetierspezies dargestellt (s. Tabelle). Beim Menschen sind sie vom Feten bis ins Greisenalter nachgewiesen. Die Sphaeridien ließen sich bei allen untersuchten Arten aus 6 Ordnungen der Säugetiere finden. Die mitgeteilten Beobachtungen legen nahe, eine Entwicklungsreihe vom filamentösen Typ über den granulären und globulären zum membranösen Typ anzunehmen. Auf die gelegentlichen Beobachtungen in pathologisch veränderten und virusinfizierten Zellen wird eingegangen. In den nachgeprüften Fällen kommen die Sphaeridien auch ohne pathologische Veränderung (Hepatom, Goldhamster) bzw. ohne Virusinfektion (SV 40-Virus der Affenniere) in den Zellen vor. Wir betrachten die Sphaeridien als funktionelle Karyoplasmadifferenzierungen normaler Zellen.

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Summary In healthy animals of 6 different species cells of various organs have been investigated by means of electron microscopy. In all species the caryoplasm of normal cells was found to contain sphaeroid structures with a diameter of between 0,3 and 1,5 . The structures are termed sphaeridies and their occurence in the various organs is shown in table 1. Four types of sphaeridies can be distinguished, i.e. a filamentous, a granular, a globular, and a membranous type. The findings suggest that is a developmental sequence from the filamentous type via the granular and globular to the membranous type. Occasional observations of similar structures in pathological or virus infected cells are discussed. In those cases which could be re-examined, sphaeridies were shown also to occur in controls without pathological changes (hepatoma in the golden hamster) or virus infection (SV 40 virus in the kidney of the monkey). The occurence of sphaeridies is considered to be a functional differentiation in the caryoplasm of normal cells.

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Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.     

Der Einfluss von Phytochrom auf die Stationären Konzentrationen von Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure beim Senfkeimling (Sinapis alba L.)

Zusammenfassung Der Senfkeimling (Sinapis alba L.) synthetisiert auch im Dunkeln beträchtliche Mengen an Ascorbinsäure. Durch Licht kann der Ascorbinsäure-Gehalt der Keimlinge stark erhöht werden. Dieser Lichteinfluß ist auf die Funktion von Phytochrom zurückzuführen. Die Photosynthese hat keinen wesentlichen Anteil an der Lichtwirkung. Die Konzentration an Dehydroascorbinsäure ist im Verhältnis zur Ascorbinsäurekonzentration stets sehr gering (5–8% der Konzentration an Totalascorbat) und wird vom Phytochrom nicht beeinflußt.Wenn die Funktion von Phytochrom bei den positiven Photomorphosen unter dem Aspekt der differentiellen Genaktivierung (vgl. Mohr, 1966) betrachtet wird, kann die folgende Arbeitshypothese aufgestellt werden: Die durch Phytochrom 730 induzierte Ascorbinsäureakkumulation führt im Bereich von potentiell aktiven Genen zu einer Spaltung gewisser DNS-Histon-Komplexe. Dadurch wird die Synthese von m-RNS an diesen Genen ermöglicht, was schließlich zur Ausbildung der positiven Photomorphosen führt. Die Argumente, welche zur Zeit für eine Funktion der Ascorbinsäure bei der Regulation der Genaktivität sprechen, werden kurz diskutiert.

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The control by phytochrome of the contents of ascorbic acid and dehydroascorbic acid in the mustard seedling (Sinapis alba L.)

Summary A dark grown seedling of white seeded mustard (Sinapis alba L.) contains an appreciable amount of ascorbic acid. The content of ascorbic acid, however, will strongly increase under the influence of light. This effect is due to phytochrome. Photosynthesis is not involved under our experimental conditions.The content of dehydroascorbic acid is always very low compared to ascorbic acid (5–8% of total ascorbate). Phytochrome does not influence this relation.The lag-phase of the phytochrome induced increase in ascorbic acid accumulation is remarkably short, about 1 hour after the onset of light compared to about 4 hours for phytochrome induced anthocyanin synthesis under our conditions.This is the shortest lag-phase we have observed hitherto in the case of positive photoresponses (Mohr, 1966).If we assume that the function of phytochrome in the case of positive photoresponses involves a differential gene activation of potentially active genes (Mohr, 1966) the following working hypothesis can be advanced: phytochrome induced accumulation of ascorbic acid will lead to a separation of DNA-histone complexes in the range of potentially active genes. This makes possible the DNA-dependent synthesis of m-RNAs at those sites which are lastly responsible for the initiation of positive photoresponses. — Arguments are briefly considered which support the view that ascorbic acid exerts a function in connection with the regulation of gene activity.

     

Rabbit heavy chain haplotypes — Allotypic determinants expressed byVH-CH recombinants

This report summarizes our current understanding of the heavy chain haplotypes found in our laboratories' rabbits. Independently derived data from several laboratories have been synthesized into a consistent picture of the linked inheritance of allotypic markers found on the different heavy chain classes and subclasses of rabbit immunoglobulins in pedigreed rabbits, including the families of three apparentVH-CH recombinants. In one recombinant, the entire group ofCH markers (C, C, and C) recombined with the set ofVH. Although in the other two recombinants all CH markers may also have recombined as a group, in one of these only IgG and IgACH genes were informative; in the other recombinant, only the IgG allotypes were informative. Some allotypic determinants found on IgM molecules (conformational) appear only when a specific variable region allotype (VHa) is combined with a specific constant region allotype (C). New combinations ofVHa and C allotypes were generated in two of the genetic recombinants and led to new conformational determinants. The gains and losses observed lend support to the hypothesis that the determinants result from conformations generated by the combination of allotype-specificVH and C protein sequences. Conceivably, DNA events that joinVH to diversity (D)- and joining (J)-coding sequences or mRNA processing events that splice J to C could be involved in generating the sequences that form allotype-specific determinants.     

Zur Frage des Zeipunktes einer Pr?gung auf die Heimatregion beim Halsbandschn?pper(Ficedula albicollis)

Zusammenfassung Junge Halsbandschnäpper wurden handaufgezogen, flogen im Flugkäfig aus und wurden dort selbständig. Darauf wurden sie 90 km nach Süden verfrachtet und in einem von dieser Art unbewohnten Gebiet freigelassen. Im nächsten Frühjahr siedelten sich mindestens 9 dort an, was 19% Rückkehrern entspricht, wenn die Hälfte der Vögel waren. kehrten in geringerer Zahl zurück und wurden nicht restlos erfaßt.Eine weitere Gruppe wurde erst vor Ende der Jugendmauser verfrachtet. Auch davon kehrten 18-19% der zurück. Ein Zeitraum von rund 2 Wochen vor dem Wegzug reichte also zur Prägung auf ein Gebiet als Heimat aus.Von einer dritten Gruppe von insgesamt 68 Schnäppern (= ca. 34 ), die erst nach Ende der Jugendmauser zur Wegzugzeit aufgelassen wurde, konnte später keiner nachgewiesen werden, auch nicht am Aufzuchtsort. Letzteres könnte an der Ungunst der örtlichen Verhältnisse liegen.Mit Unterstützung der Deutschen Forschungsgemeinschaft.     

Die Biologische Anstalt Helgoland Gegenwart und Zukunft

Ohne ZusammenfassungIn der Septemberausgabe des Der Helgoländer (offizielles Veröffentlichungsorgan des Vereins Helgoland e. V. — Geschichte und Kultur der Deutschen Bucht und zugleich Sonderausgabe der Cuxhavener Allgemeinen für die Insel Helgoland) erschienen anläßlich des 75 jährigen Bestehens der Biologischen Anstalt Helgoland insgesamt 19 Beiträge über unsere Anstalt. In etwas veränderter Form wird hier der Einleitungsaufsatz — mit freundlicher Genehmigung der Cuxhavener Allgemeine — abgedruckt.     

Trypsin-catalyzed synthesis of the arginyl-arginine dipeptide froml-arginine ethyl ester

Summary Trypsin has been found to catalyze oligomerization ofl-arginine ethyl ester in aqueous reaction media. More than 40% of the substrate has been converted mostly to arginyl-arginine under the optimized reaction conditions (pH 10; [trypsin]10M; [substrate]0.5M).     

Evidence of β-carotene 7,8(7′,8′) oxygenase (β-cyclocitral,crocetindial generating) in Microcystis

A -carotene oxygenase is described which occurs in the Cyanobacterium Microcystis. It cleaves -carotene and zeaxanthin specifically at the positions 7,8 and 7,8, while echinenone and myxoxanthophyll are not affected. The oxidative cleavage of -carotene leads to the formation of -cyclocitral and crocetindial and that of zeaxanthin to hydroxy--cyclocitral and crocetindial in nearly stoichiometric amounts. Oxidant is dioxygen as has been demonstrated by high incroporation (86%) of ¹⁸O₂ into -cyclocitral. -Carotene oxygenase is membrane bound, sensitive to sulfhydryl reagents, antioxidants and chelating agents. Iron seems to be an essential part of the enzyme activity. Cofactors necessary for the reaction could not be detected.Abbreviations TLC thin layer-chromatography - PIPES piperazine-N,N-bis-(2-ethanesulfonate) Na - TES 2{[tris-(hydroxymethyl)-methyl]-amino} ethanesulfonic acid Dedicated to Professor G. Drews on occasion of his 60th birthday     

The beta1 integrin subunit is not a specific component of the costamere domain in human myocardial cells

Studies on altered integrin receptor expression during cardiac hypertrophy and heart failure requires accurate knowledge of the distributional pattern of integrins in myocardial cells. At present the general consensus is that in cardiac muscle the ₁ integrin receptor is mainly localized to the same sarcolemmal domain as vinculin at Z-band levels (costamere). Since most previous studies have been focusing on myocardial integrin distribution in lower mammals, the myocardial localization of the ₁ integrin subunit was investigated in biopsies collected from the auricle of patients undergoing a coronary bypass operation. Non-invasive serial optical sectioning was carried out by immuno-laser scanning confocal microscopy. Double-labelling for vinculin/-actinin, and the cytoplasmic domain for the ₁ integrin subunit, showed that ₁ integrin is deposited throughout both the vinculin/-actinin domains and the non-vinculin/-actinin domains. These results were supported by a semi-quantitative analysis in extended focus images of the latter preparations. Higher magnification views at the electron microscopical levels of the large, extracellular domain of the ₁ integrin subunit disclosed a pronounced labelling in the form of a dense, irregular punctuate pattern that was distributed at Z-disc domains as well as along the entire sarcolemmal area between Z-discs. Our findings show that in human, myocardial cells, the ₁ integrin receptor does not only localize to the surface membrane at the Z-disc level (costamere in cardiac muscle), but has a widespread distribution along the sarcolemma.     

Pädogame Automixis und Auxosporenbildung beiNitzschia frustulum var.perpusilla

Zusammenfassung BeiNitzschia frustulum var.perpusilla unterbleibt die Paarung, es werden bei normalem Ablauf der Gametogenese unter Klaffen der Theken ungepaarter Zellen zwei Gameten je Mutterzelle gebildet, die sich in einer nicht über die Thekenränder hervortretenden Gallerte umlagern, sich abkugeln und dann miteinander kopulieren. Es handelt sich um den ersten sicher nachgewiesenen Fall von Automixis innerhalb der GattungNitzschia.Die sich ebenfalls abkugelnde Zygote bildet eine dünne unverkieselte Wand, die beim folgenden Streckungswachstum in zwei Stücke zerreißt, welche als Kappen an den Polen der reifen Auxospore hängen.Das verkieselte Perizonium ist, wie auch beiNitzschia amphibia, geringelt, außerdem ist eine als Naht erscheinende Längsstruktur wohl das Längsperizonium im Sinnevon Stoschs, vorhanden.Vor der Bildung der Schalen der Erstlingszelle erfolgt eine starke Kontraktion (Spontanplasmolyse) des Protoplasten der Auxospore innerhalb des Perizoniums, wodurch sofort die definitive Zellform hergestellt wird. Der kontrahierte Protoplast umgibt sich mit einer dünnen, unverkieselten Wand, innerhalb welcher dann die beiden ersten Schalen mit normaler Streifen- und Raphestruktur entstehen. Es wird so außer der eigentlichen Auxospore mit ihrem Perizonium noch eine sekundäre Auxospore gebildet.Die Gameten- und Auxosporenbildung läßt sich leicht durch Übertragung auf frisches Kulturmedium (Agar mit verdünntem Meerwasser) auslösen. Sehr häufig treten eben entstandene Tochterzellen, die noch mit den Hypotheken aneinander haften, in die Auxosporenbildung ein, was zeigt, daß sich vegetatives Wachstum und Auxosporenbildung nicht wesentlich ausschließen.     

Über den histochemischen und mikrochemischen Nachweis der β-Galactosidase mit 1-Naphthyl-β-galactopyranosid

Zusammenfassung Es wird ein simultanes Azokupplungsverfahren zur intrazellulären Darstellung der sauren (Hetero-) und neutralen -Galactosidase (Lactase) in verschiedenen Organen von Ratte, Maus und Meerschweinchen beschrieben.Das Inkubationsmedium enthält 4,5–9mg 1-Naphthyl--galactopyranosid (gelöst in 0,4ml NN-Dimethylformamid) und 0,5–0,8ml 2% Hexazonium-p-rosanilin in 9 ml 0,1 M Citrat-Puffer, pH 5 (Hetero--galactosidase) oder 5,5 (Lactase).Unter allen Organen reagiert die saure -Galactosidase am kräftigsten in den Lysosomen von Nebenhoden, Niere, Nebenniere, Schilddrüse, Glandula präputialis und inguinalis, Milz, Colon und Plexus chorioideus; die neutrale -Galactosidase kommt in mittlerer Aktivität nur im intestinalen Stäbchensaum vor.Die intralysosomale Darstellung der löslichen Hetero--galactosidase erfordert Blockfixation in Glutaraldehyd; die Lactase kann an frischen oder gefriergetrockneten Schnitten untersucht werden. Im proximalen Tubulus der Rattenniere wird die saure -Galactosidase durch Formol unabhängig von der Konzentration des Fixans verglichen mit Glutaraldehyd stärker gehemmt. Spätestens 10 min nach Beginn der Fixation hat das Enzym seine Basisaktivität erreicht. Spülen in hypertoner Zuckerlösung macht die Inhibition der Hetero--galactosidase teilweise rückgängig.Die mit dem Azokupplungs- und Indigogen-Verfahren gewonnenen Befunde sind weitgehend identisch.

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On the histochemical and microchemical demonstration of -galactosidase by means of 1-naphthyl--galactopyranoside

Summary A simultaneous azo coupling method for the intracellular demonstration of acid (hetero-) and neutral -galactosidase (lactase) in various organs of rats, mice and guinea-pigs is described.The recommended incubation medium consists of 4.5–9 mg 1-naphthyl--galactopyranoside (dissolved in 0.4 ml NN-dimethylformamide) and 0.5–0.8 ml 2% hexazonium-p-rosaniline in 9 ml 0.1 M citrate buffer, pH 5.0 (hetero--galactosidase) or 5.5 (lactase).Among all organs investigated the strongest acid -galactosidase reaction regularly occurs in the lysosomes of the epididymis, kidney, adrenal, thyroid, preputial and inguinal gland, spleen, colon and chorioid plexus; the neutral -galactosidase can only be detected in the intestinal brush border exhibiting a moderate activity.Because hetero--galactosidase is a highly soluble enzyme bloc-fixation using glutaraldehyde becomes necessary to achieve a precise intralysosomal localization; for the demonstration of lactase fresh or freeze-dried cryostat sections are suitable. —In the proximal tubule of the rat kidney independent of their concentration the inhibition of acid -galactosidase following treatment with formol surpasses that of glutaraldehyde. Within the first ten minutes of fixation the enzyme reaches its basis activity. The recovery rate of renal hetero--galactosidase considerably increases in the course of washing in hypertonic sugar solution.In comparison with the indigogenic technique nearly identical results can be obtained with the azo coupling procedure.