液体石蜡发酵生产反丁烯二酸I．菌种的筛选和鉴定

经过筛选,从3,149株菌株中得到8株能利用液体石蜡产生反丁烯二酸的菌株,其中产酸最高的菌株是C90,经鉴定是皱褶假丝酵母(Candida rugosa)。其发酵产物经分离提纯,得到白色结晶;经纸上层析、元素分析、红外光谱分析和熔点测定,证明是反丁烯二酸。C90能利用C8-C20。的直链烷烃,利用长链烃比短链烃为好,尤其对C16和C17,的烷烃利用最好,产酸最高。用C13—C18的混合正烷烃做碳潦能得到较好的结果,菌体生长较快,产酸量较高;C90能利用葡萄糖,菌体生长旺盛,但不产酸;能利用三羧酸循环中的琥珀酸、反丁烯二酸和苹果酸,并使部分反丁烯二酸转变成苹果酸和琥珀酸,也能把部分苹果酸转变成反丁烯二酸。     

提高液体石蜡发酵生产反丁烯二酸产率的试验

液体石蜡发酵反丁烯二酸中间试验完成后,为进一步降低生产成本,提高经济效果,我们又做了菌种诱变和原料代用试验。用亚硝胍和钴交替处理原生产菌种,获得一株代号为CNO_(20)的优良产酸菌。使用该菌进行发酵,并以石灰石粉代替培养基中添加的工业碳酸钙,取得了良好结果,产酸水平提高一倍,产酸率达6%以上,对液体石蜡的转化率最高为116%。     

液体石蜡发酵生产琥珀酸的研究Ⅱ．摇瓶发酵条件的研究

对产琥珀酸较优良菌株Cundida rugosa SB-7进行了摇瓶发酵条件的研究,产生琥珀酸的最适氮源是尿素,用量以0．1％为宜。在发酵过程中必须加入足够量的CaCO35以控制发酵液的pH,玉米浆也是影响发酵的重要因素。SB-7在适宜的条件下,琥珀酸的最高产量可达4.45％,对液蜡的转化率为74％,在发酵过程中还可积累少量的延胡素酸和a一酮戊二酸。     

L-山梨糖发酵产生维生素C前体——2-酮基-L-古龙酸的研究II．发酵条件的研究

对产生维生素C前体2-酮基-L-古龙酸的优良菌株N1197 A,进行了一系列摇并条件试验。掭加玉米浆及尿素是提高产酸的有效手段,尿素浓度以0.5—0.8％为好,确定了培养基组成(％)为：K2HP4．0.07、KH2PO4 0．03,甘油 0.2,MgSO4．·7H2O 0.01, 轻体CaCO3 0.5,玉米浆0.5,尿素(0.5,自来水配制,自然pH。在碳酸钙添加试验中,当培养基中有尿素时,不加碳酸钙与加碳酸钙产酸量相同。 分批补加尿素或(NH4)2HPO4．使发酵液pH保持在6—6.5,产酸量随着补加次数加多而增加。在发酵过程中,补加尿素调节发酵液pH是本发酵的特点。     

液体石蜡发酵生产琥珀酸的研究I．菌种的筛选和诱变

通过对703株酵母菌的筛选,得到了三株产琥珀酸在1％以上的菌株,对其中的S15,进行了诱变处理,从而得到了产琥珀酸最高的sB一7,该菌发酵液中琥珀酸含量达4．43％。发酵产物经分离提纯,得到无色结晶物质,经纸层析,熔点测定和‘H 250 MHz核磁共振分析,证明是琥珀酸。     

弹性蛋白酶产生菌发酵条件的研究

针对不同碳氮源及无机盐对芽胞杆菌EA915产弹性蛋白酶的影响进行了研究,结果表明,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母膏,无机盐硫酸镁,硫酸亚铁对弹性蛋白酶的产生有促进作用.初步研究了产酶条件,在初始pH为7.0、摇瓶装液量20mL/250mL ,37℃下发酵52h,酶活最高,达到160 U/mL.     

海洋Cellulophagasp．QY201产生ι-卡拉胶酶的发酵条件优化

目的：通过发酵条件优化,提高海洋Cellulophagasp．QY201的l-卡拉胶酶产量。方法：采用正交试验分别对发酵条件、培养基配方进行优化。结果：该菌株最适培养基配方为（w／v）：3％NaCl、0．5％MgSO4·7H2O、0．02％CaCl2、0．01％KCl、0．002％FeSO4、0．25％CaSein、0．15％Na2HPO4、0．2％NaNO3、0．25％L-卡拉胶。最佳培养条件为：培养基体积为70ml／250ml三角瓶,接种量为1％,25℃,90r／min培养36h。优化后酶活最高可达2．64U／ml,较优化前提高了22倍。结论：QY201最佳发酵条件的建立,为ι-卡拉胶酶的大规模生产创造了条件。     

赤霉酸产生菌UF456发酵条件的研究

筛选出赤霉酸产生菌UF456的发酵培养基配方,研究了各种碳源、氮源、碳氮比和不同微量元素对赤霉酸发酵的影响.结果表明:最佳碳源为玉米淀粉,含量为12.5%;最佳氮源为黄豆饼粉和花生饼粉,含量分别为0.3%和1.2%;微量元素Fe^(2+)、Cu^(2+)和Zn^(2+)对赤霉酸发酵具有促进作用,其中Fe^(2+)尤为重要,三种元素不同的组合对赤霉酸发酵的促进作用都具有累加效应.