薏苡胚发育及贮藏营养物质积累的研究

薏苡（Ｃｏｉｘ ｌａｃｒｙｍ ａ－ｊｏｂｉ）胚发育分下列各期：棒形胚前的原胚期、棒形胚期、胚芽鞘期、１叶期、２ 叶期、３叶期、４ 叶期、５ 叶期及６叶期成熟胚。３ 叶期胚具１ 条不定根（种子根）,４ 叶期具２ 条,５ 叶期及成熟胚期具３ 条。不定根与胚根排成１ 纵行。营养物质最先在盾片细胞中积累。开花后９ 天的１ 叶期胚,在盾片、胚芽鞘及胚轴细胞中积累了淀粉,以后遍及成熟胚的各部分。淀粉粒含量与器官发生及生长顺序成正相关,但发育后期,盾片细胞内的淀粉粒含量下降。开花后１０ 天,盾片细胞中形成含晶体的蛋白质体,晶体含蛋白质及植酸钙镁。以后,这种蛋白质体增多、增大。同时,又形成不含晶体的蛋白质体。一定时期,含晶体的蛋白质体消失,不含晶体的蛋白质体增多,直到胚成熟。开花后１３ 天,胚芽鞘上部细胞形成蛋白质体。以后遍及成熟胚的各部分,器官发生越早,所含蛋白质体越多、越大。开花后１０ 天,盾片细胞中产生了脂体,成熟胚的盾片细胞,含有大量的脂体。还观察了胚发育各期与颖果及盾片长度的对应关系     

种子贮藏蛋白的运输、积累和基因表达调控

种子中贮藏蛋白的运输和积累途径主要有：(1)蛋白质合成后经内膜系统转移到蛋白质贮藏液泡(PSV)中积累;(2)合成的蛋白质直接在粗糙内质网的膜囊中积累形成蛋白质体;(3)贮藏蛋白不经高尔基体的加工由粗糙内质网上合成后直接运输到PSV中积累。贮藏蛋白基因的表达受该基因的顺式作用元件和反式作用因子的共同调控,此外染色体的结构也影响贮藏蛋白基因的表达。     

高,低蛋白含量的大豆种子贮藏蛋白积累的比较研究

利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及电子显微镜等技术比较分析和观察了两个大豆品种（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍ ａｘ（Ｌ．） Ｍｅｒｒ．）种子贮藏蛋白积累的差异。结果表明,在子叶发育过程中,蛋白含量高（４５％ ）的“公交８０５９－３”比蛋白含量低（３５％ ）的“ＧＤ－１５１５”蛋白含量高,且增长速率较快;蛋白质及７Ｓ和１１Ｓ亚基积累的时期较早,尤其是７Ｓ的β亚基。电镜观察表明“公交８０５９－３”蛋白质在液泡中的积累,前期与“ＧＤ１５１５”相似,中期以后的液泡中,蛋白体占整个细胞的比例均高于“ＧＤ１５１５”。这表明：大豆蛋白含量的差异有其生化及结构上的基础     

荞麦糊粉层和子叶中贮藏蛋白质积累过程的超微结构

应用透射电镜技术对荞麦（Fagopyrum esculentum)子叶和糊粉层细胞中贮藏蛋白质的积累过程进行了研究。荞麦开花后15天,胚乳最外细胞的液泡中开始积累蛋白质。开花后25天,最外层胚乳细胞中积累较多的糊粉粒（直径1－2μm)形成糊粉层。开花后20天,子叶细胞中蛋白质开始在液泡和细胞质中积累,同时液泡通过膜的向内生长和缢裂两种方式形成体积较小的液泡。开花后25天,成熟的子叶细胞中含有丰富的蛋白质,贮藏蛋白质主要积累在液泡中形成体积较大的蛋白质贮藏液泡（PSVs,protein storage vacuoles,直径1－3μm）。在荞麦子叶积累蛋白质的各个阶段,细胞质中都有一些来源于高尔基体,含蛋白质的电子不透明小泡（直径0.1-0.7μm)存在,观察到有些小泡正进入液泡,推断这种来自高尔基体膜囊的小泡不仅将蛋白质运输到液泡形成PSVs的作用,也可能是荞麦成熟子叶积累贮藏蛋白质的一种结构。     

大麦胚和胚乳发育的相关性及贮藏营养物质的积累

大麦(Hordeum vulgare L.)开花后1d,见合子及退化助细胞,游离核胚乳尚未形成;开花后2～3d,胚为5及10个细胞,胚乳为游离核期;开花后4及5、6d,胚为梨形及长梨形,胚乳达细胞化期;开花后8d,胚为胚芽鞘期,糊粉层原始细胞产生;开花后10d,胚具1叶,糊粉层1～2层;开花后13d胚为2叶胚,亚糊粉层发生;开花后17d,3叶胚形成,糊粉层多为3层并停止分裂,菱柱形及不规则胚乳细胞分化;开花后21～29d,胚为4叶胚,胚乳进一步分化;开花后33d,胚为5叶成熟胚,胚乳亦成熟。淀粉、蛋白质在胚中积累始于开花后13d。在盾片中由基向顶发生,在胚芽鞘及叶原基中,首先在顶端出现。成熟盾片顶端的淀粉消失。开花后6d,胚乳开始积累淀粉;开花后10d,糊粉层及胚乳细胞积累蛋白质。开花17d后胚乳的蛋白质体多聚集,29d后蛋白质体显著减少。开花后17d,在盾片及糊粉层细胞中检测到油脂。果长或果长与稃片长之比和盾片长可作为不同发育期胚和胚乳的形态指标。     

花生种子发育和萌发过程中贮藏蛋白的合成和降解

以花生品种汕油5 2 3种子为材料,分离纯化花生球蛋白的41 kD和38.5 kD两种主要亚基及伴花生球蛋白的6 0.5 KD亚基并制备抗体.We stern blot分析表明,3种亚基在花生胚组织分化期的胚轴和子叶中就开始合成,其中60.5 kD亚基是最先在胚轴和子叶中大量合成和积累的贮藏蛋白,41 kD和38.5 kD亚基在随后的发育中积累量不断增加;种子萌发时这3种亚基的降解进程不一样,胚轴和子叶中41 kD和38.5kD亚基的降解均先于60.5 kD亚基.     

蚕豆种子贮藏蛋白质组分的比较研究

以10份蚕豆品种为材料,利用SDS-PAGE方法,对其种子贮藏蛋白亚基组成进行了分析,结果表明:不同品种间的种子贮藏蛋白具有一定的差异,表现出一定的多态性;共分离出23条迁移率不同的亚基条带,13条具有多态性;利用贮藏蛋白亚基条带的信息,分析了品种间的蛋白相似度,相似度指数0.619～0.947,平均0.744;并通过聚类分析,在遗传相似系数0.8260水平上,将供试材料分为了3类,其中第2类具有较丰富的多样性,多样性指数达3.9296;共筛选出7对亲缘关系较远的杂交组合,可为蚕豆品种选育提供一定的科学依据。     

莲子贮存蛋白的主要亚基及积累模式

红莲(Nelumbo nucifera Gaertn)成熟子叶总蛋白含量达24.35 g/100 g干样品,其贮存蛋白(SP) 的积累模式与豆科种子相似,即随成熟度的提高,SP猛增至占总蛋白含量的86%以上。对莲子不同发育阶段子叶蛋白SDS-PAGE图谱的光密度测定表明莲子叶蛋白有12个主要SP亚基(SP 1～12)。按分子量(MW)大小和积累顺序可分3组A组是98 kD和93 kD的2个亚基,MW最大,积累最晚,但量最多;B组是3个亚基,MW为55～50 kD,大小居中,积累最早,量最少;C组的7个亚基MW最小,在27～14 kD之间,积累较早,量较多。对莲的不同品种、不同器官进行分析后发现,它们都有1个主峰为68 kD的多连峰的代谢蛋白亚基,可能是莲共有的蛋白亚基。     

萌发绿豆子叶衰老期间蛋白质代谢的变化

萌发绿豆子叶自然衰老过程中可溶性蛋白质含量一直下降;从衰老开始到衰老前期,总游离氨基酸含量明显上升;但游离氨基酸各组分在子叶衰老期间的变化趋势并不相同。~3H-亮氨酸掺入蛋白质试验和多聚核糖体的相对量及其与总核糖体的比值(P/T)测定都证明在子叶衰老前期有蛋白质的新合成。子叶衰老期间。氨肽酶活性明显降低;而以酪蛋白为底物的蛋白水解酶活性却急剧上升,承担着催化蛋白质降解的主要功能。     

用显微分光光度术测定不同发育时期蚕豆子叶淀粉质体DNA含量

叙述了用显微光度术在亚细胞水平上测量蚕豆子叶细胞中淀粉质体Ｆｅｕｌｇｅｎ－ＤＮＡ含量,显示了在不同发育时期蚕豆子叶细胞中的淀粉体ＤＮＡ含量的动态变化。随着发育时期的递增,淀粉体ＤＮＡ拷贝数不断地增长。生长中期的淀粉体ＤＮＡ含量平均数为２．１４（任意单位）,到了成熟期淀粉体ＤＮＡ平均含量增长到１０．１２（任意单位）。在成熟期,子叶细胞中的淀粉体ＤＮＡ含量比生长中期增长了９．６倍。通过生物统计分析,在     

A Pepsin-Resistant 20 kDa Protein Found in Red Kidney Bean (Phaseolus vulgaris L.) Identified as Basic Subunit of Legumin

The digestibility of proteins in red kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) was examined by in vitro pepsin assay. A 20-kDa polypeptide that remained highly stable after heat processing was identified as a basic subunit of legumin. The results of a monobromobimane (mBBr) labeling test implied that this protein contained rigid intramolecular disulfide bonds, which might contribute to pepsin resistance.     

切除上胚轴对绿豆子叶衰老逆转及其核酸和蛋白质代谢的效应

在绿豆子叶衰老达到不归点(萌发后5～6d)前切除上胚轴可使开始衰老的子叶中核酸和蛋白质含量回升,衰老短期逆转。衰老不归点后的子叶中核酸和蛋白质变化的主要特征是:丧失了较多的核主带DNA、25S、18S rRNA以及大部分可溶性蛋白质组分,一种小分子DNA 组分完全消失。不归点前切除上胚轴可使上述核酸和蛋白质组分明显增加,表明子叶衰老的逆转可能与这些重要功能物质的回升有关。在切除上胚轴的茎顶涂抹IAA,能阻止子叶核酸和蛋白质回升,也消除了切除上胚轴对子叶裹老的逆转作用。     

Somatic embryogenesis from leaf and zygotic embryo explants of Blighia sapida ‘Cheese’ ackee

Summary This study investigated factors affecting the production of somatic embryos in Blighia sapida (ackee). Explants obtained from fully expanded leaves or cotyledons of immature zygotic embryos excised from brown (BSCZE) or green seeds (GSCZE) were cultured on Murashige and Skoog medium supplemented with 9, 18 and 36μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 4.4 or 22.1 μM benzylaminopurine (BAP) or 0.2–19.9 μM thidiazuron (TDZ). Leaf explants grown on media supplemented with the different combinations of 2,4-D and BAP formed callus, but they were non-embryogenic, while explants were not responsive on TDZ-supplemented media. GSCZE explants grown in the presence of 2,4-D/BAP combinations of 9/4.4, 18/4.4 or 36/4.4 μM formed non-embryogenic callus profusely, but explants gave rise to organized globular protuberances (GPs) and non-embryogenic callus on media containing TDZ, with the best concentration at 0.4 μM. BSCZE explants grown on TDZ-supplemented media also formed callus, but no GPs were detected. When GPs were cultured on media containing TDZ and abscisic acid they (ABA), gave rise to the highest number of somatic embryos. The medium was also beneficial for the development of somatic embryos from the globular to cotyledonary stage.     

去胚轴对花生子叶肽链内切酶和贮藏蛋白质降解的影响

从离体子叶与连体子叶在水中培养一段时间后的比较,看到它们之间在肽链内切酶活性和盐溶蛋白及花生球蛋白降解上的差异并不大,这表明去除胚轴对子叶肽链内切酶活性和贮藏蛋白降解的影响很轻微。亚胺环己酮(蛋白质合成抑制剂)不能完全抑制离体子叶肽链内切酶活性的提高,子叶的大部分大分子贮藏蛋白同样被降解。这表明,在花生种子萌发过程中降解大部分贮藏蛋白的子叶肽链内切酶并非全部是在种子萌发时新合成的,子叶贮藏蛋白降解和肽链内切酶活性基本不受胚轴调控,子叶与胚轴之间在调控关系上可能是一种新的调节类型。     

Purification and partial characterization of an aminopeptidase from mung bean cotyledons

An aminopeptidase (EC 3.4.11.-) was purified to homogeneity, as judged by SDS-PAGE. from mung bean ( Vigna radiata ) cotyledons. The molecular mass of this peptidase was estimated as 75 kDa by gel filtration. When an oligopeptide consisting of 5 amino acid residues was used as substrate, amino acids were released in the order of the N-terminal sequence of the oligopeptide chain. This enzyme apparently requires free sulfhydryl for its activity, as judged by the effects of various proteinase inhibitors. Among aminoacyl- p -nitroanilides examined for the availability as substrates of the enzyme, p -nitroanilides with hydrophobic amino acids were preferred substrates. According to western immunoblot profiles, the enzyme level in cotyledons was high at the early stage of imbibition and declined rapidly after germination.