玉米×二倍体多年生类玉米孤雌后代渗入片段的GISH定位分析

用来自玉米(Zea mays L.)与二倍体多年生类玉米(Z. diploperennis Iltis, Doebley and Guzmán)杂交的孤雌生殖后代同一抗病个体的4个株系进行了基因组原位杂交,用改进的杂交技术获得了近100%的检出率,每一检出片段在同源染色体两成员和每两个姊妹染色单体上均有清晰的信号.     

基因组原位杂交鉴定玉米的外源染色体片段

利用基因组原位杂交技术,在稳定遗传的纯系５４０及其与玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）自交系杂交后代Ｆ１即遗单６号中,成功地鉴定了渗入其中的二倍体多年生类玉米（ＺｅａｄｉｐｌｏｐｅｒｅｎｎｉｓＤｏｅｂｌｅｙ,ＤＰ）的染色体片段,采用ＤＡＢ（Ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）和荧光检出系统,二者获得了一致的结果,在纯系５４０的第１,２,５和８号两条同源染色体长臂上均检出杂     

玉米和类玉米种间杂交后代细胞学鉴定

利用组成玉米异染色质钮的180-bp重复序列和TR-1元件以及45S rDNA对玉米自交系F107、GB57、二倍体多年生类玉米及其远缘杂交后代的染色体进行荧光原位杂交,确定了3种重复序列在亲本染色体上的分布;同时对远缘杂交后代进行了细胞学鉴定,通过荧光信号在染色体上的位置,证实远缘杂交后代中异源种质的染色体来源;讨论了异染色质钮重复序列对玉米和其野生种杂交后代外源染色体整合和染色体行为等方面研究的应用。     

玉米与四倍体多年生玉米代换种质的选育及其基因组原位杂交鉴定

通过对玉米与四倍体多年生玉米杂种F1采用遮光调节开花时期、喷施低浓度赤霉素等提高可杂交性措施 ,选育出一个含有四倍体多年生玉米遗传物质的、在形态特性与普通玉米相似的种质 ,并对供试材料的表型性状进行了调查 ,对玉米及其与四倍体多年生杂交后代材料的体细胞染色体进行多色基因组原位杂交 (Multi colorGenomeinsituHybridization ,McGISH)检测。结果表明 :玉米与四倍体多年生玉米种杂交后代F2 ×P1的许多表型性状已经回复到玉米的特征 ;F2 ×P1自交一代 (BC1F3 )染色体数目为 2 0 ,在原位杂交检测的植株中有 17条与玉米亲本显色相同 ,另外 3条染色体区别于玉米基因组 ,检出为红色荧光且形态上小于玉米染色体 ,表明其来源于四倍体多年生玉米染色体。可见 ,BC1F3 是玉米 四倍体多年生玉米异源代换种质。     

二倍体大白菜与四倍体结球甘蓝杂种的获得及其SSR鉴定与GISH分析

为创制结球甘蓝-大白菜异附加系、异代换系、易位系,利用二倍体大白菜（AA,2n=20）为母本与四倍体结球甘蓝（CCCC,2n=36）杂交,通过胚挽救获得了异源三倍体杂交种（ACC,2n=28）;利用SSR对杂交种进行鉴定,6株F1均能扩增出父本的特征带,表明这6株是真杂交种。异源三倍体基因组原位杂交结果表明,未加封阻时,大白菜与结球甘蓝染色体均有较强的杂交信号;当加入适当比例的封阻时,来自大白菜和结球甘蓝染色体上的杂交信号强弱有明显差别;封阻过度时,大白菜与结球甘蓝染色体的杂交信号都十分微弱。说明大白菜与结球甘蓝基因组具有较高的同源性。     

基于玉米野生近缘种大刍草渗入系群体的出苗率QTL定位分析

玉米出苗率不仅受温度、水分等外部环境因素的影响,同时也受到内部遗传因素的控制,直接影响玉米产量,是玉米育种重要的目标性状之一.本研究利用一套以玉米野生近缘种大刍草(Zea mays ssp.Parviglumis Iltis&Doebley)为供体亲本,现代玉米自交系W22为受体亲本构建的包含866个家系的渗入系群体,...     

沙地云杉与其近缘种间的GISH分析

以沙地云杉(Picea mongolica(H.Q.Wu)W.D.Xu)、白杄(P.meyeri Rehd.et Wils.)、红皮云杉(P.koraiensis Nakai)3种云杉属植物为材料,利用基因组原位杂交技术(GISH),用白杄和红皮云杉基因组DNA分别作探针与沙地云杉中期染色体进行杂交,分析3种云杉的亲缘关系,旨在进一步探讨沙地云杉的起源。结果表明:(1)3种云杉的染色体数目均为2n=24,核型类型为1A,大部分染色体为亚中部着丝粒;白杄和红皮云杉核型不对称系数分别为57.78%、57.64%,小于沙地云杉(58.75%)。(2)以白杄基因组DNA为探针时,在沙地云杉14条染色体上有明显杂交信号,信号位点主要位于着丝粒区、次缢痕处和短臂部位;以红皮云杉DNA为探针时,12条染色体上有明显杂交信号,主要位于着丝粒区、次缢痕处和长臂上,杂交信号分布范围和强度明显弱于白杄。研究认为,沙地云杉与白杄的亲缘关系较近,而与红皮云杉较远,该研究首次阐明沙地云杉非起源于白杄和红皮云杉的种间杂交。     

由小麦×玉米获得的普通小麦加倍单倍体后代的RFLP变异

用小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）的ｒＤＮＡ克隆ｐＴａ７１和与小麦基因组有部分同源性的玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）ＤＮＡ克隆作探针,对由小麦ｘ玉米获得的普通小麦加倍单倍体（ＤＨ）后代群体进行ＲＦＬＰ分析。结果发现,不但用ｐＴａ７１在这些ＤＨ后代中检测到ｒＤＮＡ所发生的明显的减少和扩增及非转录间隔区的限制性片段长度的变化,而且用与小麦基因组部分同源的玉米克隆ＭＲ１３和ＭＲ５０在一些ＤＨ后代中检测到缺失变异,特别是用ＭＲ１３在普通小麦ＤＨ系的１８号株的基因组中检测到大幅度的限制性片段长度的变化,即原来的４．３ｋｂ的强信号带消失,取而代之的是４０．０ｋｂ、２．５ｋｂ和２．０ｋｂ三条杂交带。这可能与小麦基因组ＤＮＡ较大的重排事件有关,也可能是由外源的玉米ＤＮＡ插入造成的。     

玉米(Zea may)×四倍体多年生玉米(Zea perennis)可育三倍体形态学和细胞遗传学研究

通过将普通玉米与四倍体多年生玉米大量杂交,获得一株部分可育三倍体植株MT-71,为外源遗传物质在普通玉米的导入创造新种质。MT-71杂交结实率分别为3X/2X=7.84%,2X/3X=0.56%,3X/4X=0.52%,开放授粉结实率为1.18%;其花粉母细胞(PMC)染色体平均构型为2.30Ⅰ+3.72Ⅱ+6.49Ⅲ+0.23Ⅳ;3X/2X后代植株染色体几乎包括所有2n=20~30染色体数目,2X/3X和开放授粉后代中染色体数目仅有2n=20,21。结果表明,MT-71可产生有功能的雌雄配子,其中n=10,11的配子更易遗传;雌配子体对额外染色体的传递能力显著高于雄配子体,异源三倍体最有效的遗传方式为3X/2X。     

小麦×玉米杂交后代的蛋白质及酯酶同工酶分析

以８ 个普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）品种为母本,２ 个栽培玉米（Ｚｅａ ｍ ａｙｓ Ｌ．）品种为父本杂交所获得的Ｆ２ 代在形态上出现了明显变异。对其籽粒进行蛋白质电泳分析,得到了如下主要结果：杂交后代的蛋白质谱带较母本有了很大的变异,主要集中在高分子量麦谷蛋白（ＨＭＷ－Ｇｌｕ）区域。杂交后代的蛋白质谱带由５ 种类型构成：１．母本型,占全部测试籽粒的２２．６％ ;２．附加型,占１４．３％ ;３．互补型,占１５．５％ ;４．杂种型,占３０．９％ ;５．缺失型,占１６．７％ 。对“矮杆早”ד紫粘”的Ｆ２ 代籽粒进行酯酶同工酶电泳分析发现,变异主要发生在ＥＳＴ－１ 区。由此看来,小麦×玉米的杂合子中玉米染色体在被排除前后,可以诱发小麦染色体组发生遗传变异     

麦类作物体细胞基因组原位杂交(GISH)效果影响因素的分析

以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦-中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明:细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想实验效果的基础;探针DNA浓度与封阻DNA浓度的比例及杂交后洗脱条件的控制是取得理想实验效果的关键。此外,还对麦类作物体细胞基因组原位杂交实验中出现的染色体丢失、外源染色体无杂交信号、杂交信号的强弱、杂交信号过多(杂交背景重)或过少、噪音信号及杂交污点产生的原因进行了分析,并提出了相应的解决方法或注意事项。     

四环素对多年生草本植物类菌原体病害的施用时间与效果

影响四环素对多年生草本植物的类菌原体病害处理效果的限制因素是蒸腾作用,其中尤以适量的叶片和发达的根系(抗生素营养液处理)是必不可少的。渗透吸收是不能把药液输送到感病植物组织的全部维管束组织中。     

基于GISH的甘蔗与斑茅F1染色体遗传与核型分析

斑茅在甘蔗育种的利用是现代甘蔗育种种质创新的热点,育种者期望把斑茅中优异的特性通过杂交渗透到甘蔗中。甘蔗与斑茅的F1是斑茅利用研究的难点也是基础。本研究利用基因组原位杂交技术(GISH)分析甘蔗与斑茅的F1染色体构成和核型,探讨甘蔗与斑茅F1染色体的遗传行为。GISH结果表明,甘蔗与斑茅杂交F1的染色体众数68~69条,其中40条来自甘蔗热带种Badila,28~29条来自海南斑茅,未发现有染色体的交换或易位现象。参试材料大部分染色体都属于中部着丝点(m)的染色体,少数为近中部着丝点(sm),YCE95-41核型属2B型,其余的核型都为1B型。甘蔗与斑茅的染色体按n+n的方式传递给F1,本研究结果为斑茅种质在甘蔗育种中的利用及其杂交后代染色体细胞遗传研究提供参考依据。     

玉米线立体类质粒的克隆和鉴定

S型细胞质雄性不育玉米的线粒体类质粒S-1为一个长6.4kb的双链线状DNA分子。本文对基本上全长的S-1（只用限制内切酶PstI在两端各切掉128bp）在pUC18和pBR322两种质粒中进行了克隆得到4种杂合的质粒。限制性酶切图谱证明它们分别是S-1以不同方向克隆在两种质粒中的结果;Southern印迹杂交也证明S-1克隆在pBR322中.     

斑茅割手密复合体（GXAS07-6-1)及其与甘蔗F1 的GISH 分析

斑茅割手密复合体(GXAS07-6-1)是广西蔗茅属斑茅和广西甘蔗属割手密的属间杂种,聚集了双亲的优点。本研究利用基于Alu-like的PCR鉴定方法对GXAS07-6-1及甘蔗与GXAS07-6-1的3份F_1材料进行真实性鉴定,基于基因组原位杂交技术(GISH)对父本GXAS07-6-1及其3份F_1染色体组成及核型进行分析。研究结果表明:3份F_1材料为GXAS07-6-1的真杂种;父本GXAS07-6-1的染色体众数为62条,其中30条来自蔗茅属斑茅,32条来自甘蔗属割手密,核型分类属于1B,其染色体按\"n+n\"方式传递;GXASF_108-2-17、GXASF_108-2-22、GXASF_108-2-32的染色体数目为78~80条,其中69~71条来自甘蔗属,9~11条来自蔗茅属斑茅,3份F_1的核型分类分别属于2B、1B、1B,染色体传递方式均为\"n+n\"。父本GXAS07-6-1及3份F_1材料中均未发现有染色体的交换或易位现象。甘蔗与斑割复合体杂交,蔗茅属斑茅染色体在亲子间传递过程存在丢失现象。     

三倍体观赏百合与二倍体食用龙牙百合的杂交分析

为探讨异源三倍体百合与龙牙百合(BB)的杂交亲和性,实现观赏百合与食用百合的种质融合与创新,该研究以三倍体百合Triumphator(LLO)作母本,龙牙百合为父本,采用常规授粉与切柱头授粉,利用基因组荧光原位杂交(GISH)技术分析母本及子代的基因组成.结果 显示:(1)通过常规授粉和切柱头授粉共获得17个发育良好的...     

玉米特异DNA通过有性杂交导入小麦DH后代的分子证据

构建了玉米的随机基因组文库,筛选了近100个玉米基因组特异的重复DNA克隆,用它们作探针分别对2个来自小麦×玉米的小麦DH群体进行RFLP分析.结果发现,玉米的MR64克隆导入到2个小麦群体的各1株后代中,即在普通小麦DH系的18号株和波斯小麦DH系的15号株中检测到强杂交信号,这个结果首次从DNA水平上证明某些玉米特异的DNA序列,可通过受精作用以很低的频率转移到小麦DH后代的基因组中.测序分析证实,克隆MR64的插入片段长度为695Pb,A+T含量为58%,用多种酶切玉米基因组进行RFLP分析表明它是一个带1～3个主串联重复单位的散布重复序列.同时还对它的序列结构、甲基化图谱、拷贝数和在玉米染色体上的分布以及在其它小麦品种和禾本科种基因组中的序列同源性情况进行了详细的研究.     

玉米B染色体特异RAPD分子标记的染色体定位

玉米B染色体特异RAPD分子标记的染色体定位     

现代玉米起源新见解——两类大刍草的混血

农作物驯化推动了农业文明的出现和繁荣,是人类历史上的重大事件。玉米(Zea mays)作为全球范围内的重要粮食作物,其驯化起源一直备受生物学和历史学界的关注。之前,现代玉米起源自小颖大刍草亚种(Z. mays subsp. parviglumis)的观点一直占主流地位。近期,严建兵与其合作团队系统收集并梳理了玉米各种类型野生种和栽培种资源,综合运用基因组学、群体遗传学和数量遗传学方法及考古学成果,发现现代玉米也存在墨西哥高原亚种(Z. mays subsp. mexicana)的杂交渐渗,并影响了诸多农艺性状,进而提出现代玉米起源的新模型。