全沟硬蜱体内伯氏疏螺旋体的分离及特征

本文报道从黑龙江省全沟硬蜱分离的伯氏疏螺旋体H7株的特征。H7株细胞长9．8—26．5μm,宽0．1 3—0．35μm,有l—11个波,波长1．2—3．Oμm,波幅0．59一1．13μm,两端尖乩每端有7根鞭毛,菌体左旋。体外培养最适温度为31℃,具有2lk、32k、34k主要结构和抗原蛋白,能与新疆及黑龙江莱姆病人血清反应。这些结果表明,该菌株具备伯氏疏螺旋体的特征,它是与其它地区或媒介分离株不同的“亚型”。     

伯氏疏螺旋体膜蛋白BmpA研究进展

莱姆病是一种人兽共患病,已严重威胁人类健康,成全球公共卫生问题,引起全球关注.伯氏疏螺旋体是莱姆病病原体,通过蜱叮咬传播而引起莱姆病,其表面存在的膜蛋白具有免疫性和致病性.BmpA(Borreliaburgdorferi membrance protein A)是伯氏疏螺旋体的主要抗原之一,为层粘连蛋白结合蛋白,是莱姆关节炎的重要致病因子,对蛋白功能、诊断应用和莱姆关节炎致病机理三方面的研究进展进行概述.     

莱姆病原——伯氏疏螺旋体的分子遗传学进展

本文对莱姆病的病原体－－伯氏疏螺旋体（Ｂｂ）的染色质ＤＮＡ结构、质粒的大小及性质、基因组的克隆和表达进行了综述,并肯定了多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术在Ｂｂ分子克隆和检测中的地位。     

伯氏螺旋体单克隆抗体的研制及应用

莱姆病是新近认识的一种自然疫源性疾病,其病原为伯氏螺旋体,主要通过蜱媒叮剌吸血而传播。本文介绍了伯氏螺旋体单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的研制现状及其在病原学,流行病学,发病机理研究与临床特异性病原学,血清学诊断等方面的应用。     

环介导恒温扩增对莱姆病病原伯氏疏螺旋体的分型鉴定

使用环介导恒温扩增技术,基于莱姆病病原伯氏疏螺旋体的外膜蛋白A(OspA)基因,针对伯氏疏螺旋体不同的基因型设计特异性引物,对国内主要的莱姆病病原伯氏疏螺旋体的3个基因型进行分型鉴定。研究结果表明,设计的引物具有良好的特异性,可以对狭义伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi sensu strict)、嘎氏疏螺旋体(B.afzelii)和伽氏疏螺旋体(B.garinii)进行分型鉴定。伯氏疏螺旋体的分型鉴定可以对不同临床症状莱姆病患者的治疗和莱姆病的控制提供一定的依据。     

鸡疏螺旋体某些生物学特性的研究

自1983年首次发现鸡巯螺旋体(Borrelia gallinarum)以来,在几次试验的基础上,又进行了鸡疏螺旋体对内地各种鸡的感染,免疫和毒株保存试验以及中草药对鸡疏螺旋体抑制动力试验等。结果证明:内地鸡(平顶山市)均易感染;鸡疏螺旋体保存以-186℃为宜。而鸡体内感染的鸡疏螺旋体从散在出现到凝集至最后溶解消失均与抗体有关。石榴皮、黄连、桉叶等中草药对鸡疏螺旋体动力有抑制作用。     

从莱姆病患者血液分离出螺旋体

从黑龙江省海林县林区的18例神经系统损害的菜姆病患者血液中分离出3株螺旋体。这3株螺旋体在形态学和免疫学上与伯氏包柔氏螺旋体(Borrelia burgdorferi)极相似。所分离的螺旋体实验感染金黄地鼠出现发病症状并死亡,从其肝、脾、肾和脑组织可找到大量螺旋体。将21例神经系统损害的蓑姆病患者血清或血浆,用间接荧光试验检测菜姆炳IgG抗体,8例阳性,阳性率为38％。因此认为所分离的螺旋体是莱姆病的病原体。     

莱姆病的实验室检验

对莱姆病的实验室检验有3种方法:组织中直接分离检测病原菌、免疫学检验、分子生物学检验。对于典型初期和二期EM(移行性红斑),并不需要实验室证实。从皮肤样本分离培养伯氏疏螺旋体可以在临床相应时间内完成。非疫源区非典型的EM和EM样皮损也应考虑作分离培养。高度怀疑患皮肤外莱姆病的病人可以用免疫学方法检验。CDC(美国疾病控制和预防中心)推荐用两步法进行免疫血清学检验。分子生物学的方法较快捷,RCR的结果可以区别持续性关节炎中活动期感染和非活动性感染。     

Dot-ELISA检测莱姆病血清抗体的实验研究

经实验研究,建立了检测莱姆病血清IgG的Dot-ELISA方法。阻断试验表明,本法具有特异性。经对10例伯氏疏螺旋体人工感染兔血清和24例正常兔血清标本的检测证实,该法与常规ELISA法检测的符合率为100％。重复性试验表明其重复性良好。     

Dot-ELISA检测莱姆病血清抗体的实验研究

经实验研究,建立了检测莱姆病血清IgG的Dot-ELISA方法。阻断试验表明,本法具有特异性。经对10例伯氏疏螺旋体人工感染兔血清和24例正常兔血清标本的检测证实,该法与常规ELISA法检测的符合率为100％。重复性试验表明其重复性良好。     

从豆制品废水厌氧发酵液分离的一个螺旋体新种

用Hungate厌氧技术,从豆制品废水厌氧发酵液分离到一株厌氧生长、细胞柔软、活跃运动、产红色素的螺状细菌。能发酵多种碳水化合物,主要产物是乙酸盐、乙醇、Ht和CO2。生长要求酵母膏,可利用Nll6Cl和蛋白胨为氯源生长。不要求NaCl。最适生长温度为30—35℃。DNA的G+C含量为49mol％。按照《伯杰氏细菌学手册》(1984年版),此菌属于螺旋体属中的一个新种,命名为产红螺旋体 (Spirochaeta shodogenes n. sp.)。     

临床标本钩端螺旋体L型的分离与形态学鉴定

应用钩体Ｌ型培养基成功地从钩体病神经系统后发症患者的血液和／或脑脊液标本中分离到钩体Ｌ型。将Ｌ型阳性培养物转种于钩体Ｌ型固体平板培养,发现基落形态呈丝状（Ｆ）型。对所分离到的Ｌ型进行形态学鉴定表明：Ｌ型呈球状体、螺旋状的丝状体等多形性改变,电镜下见Ｌ型推动部分或全部细胞壁,Ｌ型经免疫标记技术鉴定证实为钩体的Ｌ型。     

全沟硬蜱防御素IpDf3的制备与抗菌活性

蜱通过吸血传播多种病原体,对全球公共卫生和人类健康构成严重威胁。然而,蜱在接触大量病原体的过程中自身却能免受感染,暗示其体内可能富含防御病原体的特殊活性物质。通过生物信息学分析,本文从全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)基因组数据库中注释到1个新型防御素基因IpDf3,并借助大肠杆菌重组融合蛋白质表达、亲和层析、小肠激酶酶切、RP-HPLC高效液相色谱等方法成功制备该多肽,用以后续验证其功能。抗菌实验表明,重组全沟硬蜱防御素Ox-IpDf3(氧化型IpDf3)对4种革兰氏阳性菌和2种革兰氏阴性菌均具有不同程度的抗菌活性,特别是对金黄色葡萄球菌(S. aureus AB94004)和表皮葡萄球菌(S. epidermidis AB208188)的抗菌作用尤为明显。同时,DTT处理和点突变半胱氨酸残基显著降低Ox-IpDf3抗菌活性,说明Ox-IpDf3多肽中分子内二硫键对其抗菌活性的发挥十分关键。杀菌动力学和扫描电镜结果表明,Ox-IpDf3能导致细菌表面出现不规则凸起或凹陷,甚至细胞膜的破裂,说明其抗菌机制可能与细胞膜的直接损伤密切相关。综上,这些研究有助于理解全沟硬蜱防御素的抗菌特性及其生理功能。     

硬蜱盾窝与盾窝腺的细微结构

用扫描及透射电镜研究硬蜱盾窝与盾窝腺的结构.幼蜱只有横缝状盾窝原基,盾窝腺尚未发育;若蜱盾窝增大,其孔数相应增加;到成蜱阶段,不仅盾窝增大,而且盾窝腺完成发育.对9种雌蜱盾窝进行比较,在其大小和孔数方面有一定差别.亚洲璃眼蜱雄蜱盾窝腺不发达,几个叶瓣贴在一起,组成1—2个腺体组.雌蜱吸血前,叶瓣相互贴在一起.吸血后,球状叶瓣散开,连接叶瓣的导管清楚可见,分泌细胞中颗粒增多,这与其分泌性信息素有关.     

中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱经期传播莱姆病螺旋体的实验研究

以实验室培育的非感染中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱刺叮人工感染21天的阳性KM鼠,利用分离培养和PCR方法检测蜱对莱姆病螺旋体Borrelia garinii的保持能力以及体内螺旋体对敏感动物的感染能力。中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱非感染幼蜱均可以通过吸血获得莱姆病螺旋体, 然而,它们在饱血、消化、蜕皮和再次吸血过程中对莱姆病螺旋体的保持能力差异很大。只有中华硬蜱可以保持活的莱姆病螺旋体直至蜕化为下一发育阶段,蜕化后仍携带莱姆病螺旋体并对敏感KM鼠有感染能力。而越原血蜱和青海血蜱对莱姆病螺旋体的保持能力不能跨越消化、蜕皮阶段,蜕化后这两种血蜱不再携带莱姆病螺旋体,因此,这两种血蜱不具备经期传播能力,作为莱姆病媒介的可能性不大。中华硬蜱于幼蜱到若蜱以及若蜱到成蜱两个阶段均具备经期传播莱姆病螺旋体的能力,提示了中华硬蜱作为南方莱姆病的潜在媒介是可能的。     

人肠道螺旋体分离株对肠上皮细胞吸附特性的研究

肠道螺旋体 (Brachyspirapilosicoli)是一新发现的引起肠道螺旋体病 (intestinalspirochetosis)的病原菌。利用猪等动物模型的感染实验已经证明人的肠道螺旋体可以导致肠螺旋体病。肠道螺旋体既可以感染人 ,也可以感染动物 (如猪、狗、鸡等 )。该螺旋体在世界许多地方都有发现 ,包括北美洲、南美洲、欧洲和亚洲的国家。在美国、澳大利亚以及西欧的一些国家 ,肠道螺旋体在人群中的感染率比较低 ,平均在 1.5 % ,但在HIV阳性病人其感染率超过 30 %。在发展中国家如巴布亚新几内亚和阿曼 ,人群的感染率高达 30 %。在我国尚未见到肠道螺旋体的…