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【背景】由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病,是造成世界稻区水稻减产、品质下降的主要病害之一。【目的】筛选具有抗稻瘟病活性的生防菌株,明确其防病促生效果并探究其抑菌机理,为其开发应用提供实践基础。【方法】利用平板对峙法筛选拮抗稻瘟病的菌株,采用形态学、生理生化特性和分子生物学对筛选的生防菌株进行鉴定,通过盆栽试验验证其室内防效和促生作用,并通过扫描电镜和LC-MS非靶向代谢组学探究该菌株对稻瘟病的抑菌机制。【结果】通过对‘黄壳糯’间栽‘汕优63’系统水稻根系内生菌进行分离纯化,共获得69个内生菌株,经平板对峙试验初筛、形态学鉴定以及16S rRNA与rpoB基因构建系统发育树,鉴定出菌株YNDS1为高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis),抑菌率为63.30%。促生效果盆栽试验表明,B. altitudinis YNDS1对‘丽江新团黑谷’‘黄壳糯’‘合系39’的生长性状均有不同程度的促进作用,其对黄壳糯的促生作用最明显。稻瘟病防治效果盆栽试验表明,菌株YNDS1对稻瘟病有较好的防治效果,其中感病品种‘丽江新团黑谷’在接种稻瘟病菌前后24 h时,其病情指数均显著低于未接种YNDS1,相对防效均为68.75%。扫描电镜观察表明菌株YNDS1能使稻瘟病菌菌丝出现畸形膨大、缠绕粘连现象。进一步对菌株YNDS1进行LC-MS非靶向代谢组分析,结果表明该菌株能够合成嘌呤霉素、链佐霉素、达地米星、表面活性素、土霉素、茴香霉素、表面活性素B等多种抑菌功能物质。【结论】B. altitudinis YNDS1不仅具有较好的稻瘟病防治效果,还可有效促进水稻生长,表明生防菌株YNDS1具有开发为稻瘟病生防制剂的应用潜力。 相似文献
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【目的】从菌核病抗性桑树品种中筛选具有生防潜力的内生拮抗菌,为绿色防控桑椹菌核病提供优质菌种及有效策略。【方法】通过植物组织培养法及平板对峙培养法分离、筛选桑椹菌核病拮抗菌,根据形态学特征、生理生化特征和基于16S rRNA基因序列的系统发育分析对其进行菌种鉴定;分析拮抗菌抑菌谱及离体防效,评估其应用潜力;通过观察拮抗菌发酵上清液对病原菌菌丝生长的影响,检测拮抗菌作用后病原菌糖原和活性氧积累量变化,并测定病原菌基因表达变化,初步探究拮抗菌的抑菌机理。【结果】从健康桑枝中分离筛选出一株对桑椹菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum) PZ-2抑制作用强且稳定的内生细菌C1R32,其形态学和生理生化特征与芽孢杆菌一致,基于16S rRNA基因序列的系统发育分析显示该菌株与枯草芽孢杆菌聚在同一最小分支,将其鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。B. subtilis C1R32对核盘菌在内的多种植物病原菌具有抑制作用;桑椹菌核病离体防效实验结果表明,B. subtilis C1R32菌悬液和发酵上清液处理组的防效分别为52.94%和46.43%;抑菌机理初探结果显示,B. subtilis C1R32发酵上清液能使S. sclerotiorum PZ-2菌丝膨大畸变,细胞壁破裂,胞质流出;该菌可通过减少S. sclerotiorum PZ-2糖原积累、促进活性氧迸发,影响其抗氧化相关基因的表达抑制病原菌。【结论】本研究从桑椹菌核病抗性品种中分离获得一株内生枯草芽孢杆菌,并初步探究其拮抗机理,为桑椹菌核病生物防治提供了潜在菌种资源。 相似文献
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【目的】对一株从连云港海域海藻样品中获得的拮抗细菌Y3F进行鉴定并且研究菌株Y3F对黄瓜土传枯萎病害的控制效果。【方法】对Y3F进行形态、生理生化特征和16S r RNA基因序列分析,采用平板对峙法测定菌株Y3F的活菌液和无菌滤液的抑菌活性,利用盆栽试验测定Y3F对黄瓜枯萎病害的防治效果。【结果】初步鉴定该菌属于蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),用2216E培养基振荡培养24 h的Y3F的无菌滤液对黄瓜尖孢镰刀菌有较强的抑菌活性,表明菌株能分泌抑制病原菌生长的活性物质。盆栽试验表明,种植30 d后,浸种和灌根同时处理(JG)的防治效果达到50.46%,对黄瓜枯萎病害有明显的控制效果,显著提高黄瓜植株生物量,显著降低黄瓜根际土的真菌和尖孢镰刀菌数量,增加根际的细菌和放线菌数量。【结论】菌株Y3F能有效防治黄瓜枯萎病害,改善根际微生物结构,具有进一步开发应用的前景。 相似文献
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【背景】常见作物连续种植后会导致根系分泌酚酸类自毒物质,该类物质是引起土传病害和连作障碍频发的主要因素。【目的】探讨利用有益微生物降解作物根系分泌物苯甲酸,缓解作物土传病害发生,并储备有益菌种资源。【方法】通过以苯甲酸为唯一碳源的无机盐培养基筛选无量山菌株资源,结合高效液相色谱仪测定酚酸降解菌株对苯甲酸的降解率;利用平板对峙试验,并基于缓解苯甲酸抑制番茄种子萌发试验及番茄幼苗促生长和对番茄枯萎病防效试验验证菌株的生物活性;结合形态学、生理生化和16S rRNA基因序列对菌株进行分类学鉴定。【结果】从无量山筛选得到4株放线菌和3株细菌具有酚酸降解能力,酚酸降解菌株在摇瓶培养72 h时对苯甲酸降解率分别为100%、99.83%、99.89%、99.87%、64.91%、56.92%和49.33%;其中2株放线菌YNK-FS0018、YNK-FS0019和一株细菌YNK-FB0022能较好地利用苯甲酸。番茄种子萌发试验结果表明菌株YNK-FS0018、YNK-FS0019和YNK-FB0022均可以缓解苯甲酸对种子萌发的抑制,促进种子萌发,萌发率分别为73%、73%和97%,并促进种子根生长,平均根长为13.31、13.04和14.56 cm;平板对峙试验结果表明菌株YNK-FS0018、YNK-FS0019和YNK-FB0022均对病原菌有广谱抗性;抗生素基因检测结果为菌株YNK-FS0018、YNK-FS0019具有PKSII、NRPS基因,菌株YNK-FB0022具有fenD、bioA、yndJ、ysnE、ituC、sboA和srfAB基因;盆栽试验结果显示菌株YNK-FS0018对番茄株高、地上鲜重、地上干重、根重、根长和茎粗有促生作用,各项分别增加53.40%、67.50%、57.50%、73.50%、77.28%和9.40%;菌株YNK-FS0019处理的株高、地上鲜重、地上干重、根重、根长和茎粗分别增加23%、40.90%、14.00%、57.00%、26.30%和16.80%;菌株YNK-FB0022处理的株高、地上鲜重、地上干重、根重、根长和茎粗分别增加24.50%、44.70%、26.40%、75.10%、98.00%和9.00%;3株菌对番茄枯萎病的防效分别为87.10%、74.18%和80.65%;结合形态学和分子生物学鉴定,菌株YNK-FS0018为稻瘟霉素链霉菌(Streptomyces blastmyceticus,Genbank登录号为OR523286),YNK-FS0019为白黄链霉菌(Streptomyces alboflavus,Genbank登录号为OR523289),YNK-FB0022为耐盐芽孢杆菌(Bacillus halotolerans,Genbank登录号为OR523290);此外,菌株均有解有机磷、溶锌、分泌铁载体、水解淀粉酶和水解蛋白酶的能力。【结论】三株酚酸降解菌具有解有机磷、溶锌、分泌铁载体、水解淀粉酶和水解蛋白酶的能力,对番茄幼苗株高、茎粗、根长、根重、地上部分鲜重和干重等农艺性状具有显著促进作用,对番茄枯萎病防效较好,可为土传病害的生物防治上提供微生物资源。 相似文献
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由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的番茄青枯病,严重影响番茄的产量和品质,给番茄种植业带来了巨大的经济损失和挑战。【目的】实现链霉菌对番茄青枯病的高效生物防治,为生防链霉菌菌剂的开发提供理论基础。【方法】从土样中筛选出6株对青枯劳尔氏菌具有良好抑菌效果的放线菌(AB_1-AB_6)。分别对菌株进行形态、生理生化和分类鉴定,分析菌株的多种胞外酶活性及根际定殖能力,并进一步通过温室盆栽试验评估菌株对番茄青枯病的生防效果。【结果】六株放线菌对青枯劳尔氏菌的抑菌圈范围为1.76-6.76 cm。经16S rRNA基因序列比对发现,6株放线菌均属于链霉菌属,其中菌株AB_1与Streptomyces gardneri相似度为98.67%,AB_2与S. pratensis相似度为97.59%,AB_3与S. diastatochromogenes相似度为97.33%,AB_4与S. canus相似度为96.54%,AB_5与S. albiflavescens相似度为96.94%,AB_6与S. gramineus相似度为97.34%。盆栽试验结果显示6株链霉菌对番茄青枯病的防效达到69.23%-100.00%。6株链霉菌均能良好地定殖于番茄根际,且具有多种胞外酶活性,如酯酶、淀粉酶、脲酶等,同时也具有广泛的碳氮源利用能力,较强的pH和盐耐受能力等。【结论】六株链霉菌具有良好的环境适应性及番茄根际定殖能力,且对番茄青枯病均展现出良好的盆栽防控效果。本研究结果符合农业绿色发展理念并为链霉菌在番茄青枯病的防治和管理过程中提供了实验基础与理论依据。 相似文献
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两株芽孢杆菌对黄瓜和番茄根际土壤微生物群落结构影响 总被引:10,自引:0,他引:10
采用聚合酶链式反应/变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE),研究了盆栽条件下,接种多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对不同时期黄瓜和番茄根际土壤微生物群落结构的影响.通过DGGE图谱的主成分分析表明,这2株生防菌对根际微生物的影响因作物的种类不同而不同:对黄瓜根际细菌和真菌群落结构均无显著影响,真菌群落随着取样时期而发生明显变化;对番茄根际细菌群落结构无明显影响,但不同采样时期细菌群落结构发生明显变化,而2株生防菌对其真菌群落结构的变化有显著影响.蔬菜种类是决定根际微生物群落结构的主要因素,接种生防细菌对根际细菌群落结构影响不显著,而对根际真菌群落结构的影响因蔬菜种类的不同而有差异. 相似文献
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【目的】为了分离鉴定对花生侵脉新赤壳菌果腐病病原菌Neocosmospora vasinfecta具有抑制作用的根际芽孢杆菌。【方法】利用平板稀释法从花生的根际土壤分离芽孢杆菌,再采用平板对峙法筛选出对N.vasinfecta具有抑制作用的根际芽孢杆菌,通过形态观察、生理生化特性和分子生物学相结合的多相分类方法对生防根际芽孢杆菌进行分类鉴定,检测脂肽类抗生素合成基因类型,并进行花生侵脉新赤壳菌果腐病的田间防治试验。【结果】从花生根际土壤中分离到28株芽孢杆菌,其中对花生果腐病病原菌具有明显抑制作用有8株。多相分类法结果显示2株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),6株为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)。脂肽类抗生素合成基因检测显示,8株生防芽孢杆菌含有至少1种脂肽类抗生素,其中所有生防菌均含有丰原素B合成基因,推测这些芽孢杆菌对N.vasinfecta的抑制机制可能与脂肽类抗生素的合成相关。田间防病实验结果显示,B.amyloliquefaciens GF-3和GF-22制备的生物有机肥均能有效降低NPRP的发病指数,其防治效率分别为32.35%和79.41%,增产率分别为19.12%和25.85%。【结论】分离鉴定了2株对花生侵脉新赤壳菌果腐病具有明显防治效果的根际芽孢杆菌,这不仅为花生侵脉新赤壳菌果腐病的生防制剂研制提供了菌株,还为研究防治机理奠定了基础。 相似文献
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镰刀菌(Fusarium spp.)和根结线虫(Meloidogyne spp.)都是植物的重要病原物,这两种病原物在寄主植物中存在着非常复杂的互作关系,可导致严重的植物土传病害。为探寻对番茄根结线虫病害具有高效防治作用的优良菌株,本研究以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为靶标病菌,采用平板稀释涂布法从多年种植番茄的设施大棚土壤中分离和筛选到一株抑菌效果较好的生防细菌菌株TMQ-KSL-1,根据形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因测序对该菌株进行鉴定;测定不同浓度的发酵液及发酵上清液对根结线虫卵孵化率以及根结线虫二龄幼虫死亡率的影响,通过盆栽实验分析其发酵液对根结线虫病害的防治效果。结果表明,菌株TMQ-KSL-1具有较强的杀线虫活性,其发酵液和发酵上清液处理48 h线虫卵孵化抑制率分别为94.76%和90.72%;处理24 h番茄根结线虫二龄幼虫的校正死亡率分别为100%和97.37%;菌株TMQ-KSL-1发酵液100倍稀释液、200倍稀释液对番茄根结线虫病害防治效果分别为59.54%和12.14%,且100倍液处理防效与阿维菌素500倍液处理防效(6... 相似文献
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西花蓟马是一种外来入侵的世界性害虫,对农林业危害巨大。查阅国内外相关文献,综述了当前防治西花蓟马的虫生真菌的种类、高毒力菌株的筛选及防治现状。现已知西花蓟马的寄生病原真菌有5种,包括蜡蚧轮枝菌(半知菌:丝孢目)、球孢白僵菌(半知菌:丝孢目)、金龟子绿僵菌(半知菌:丝孢目)、玫烟色棒束孢(半知菌:束梗孢目)和小孢新接霉。其中,球孢白僵菌、金龟子绿僵菌在西花蓟马的生物防治中应用最广,具有良好的开发应用潜力,部分防效好的虫生真菌已申请专利及实现工厂化生产。 相似文献
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【目的】以番茄为供试作物,研究枯草芽孢杆菌262XY2''菌剂对番茄枯萎病的预防效果及其对番茄植株和根际土壤生化指标的影响,以期为菌剂在农业生产制备和生物安全应用中提供理论依据。【方法】设置不同固态菌剂添加量(分别占育苗基质质量的0.5%、1.0%、2.0%、3.0%和4.0%)的试验处理组与不添加固态菌剂的对照组(CK)进行番茄育苗,番茄四叶一心后移栽至花盆进行盆栽试验,定植6周后按照病情程度分级法测定供试菌剂对盆栽番茄枯萎病的预防效果;并测定番茄植株过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性、几丁质酶活性和总巯基含量以及番茄根际土壤游离氨基酸含量、过氧化氢酶活性、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性和脲酶活性等生化指标。【结果】0.5%菌剂处理的番茄根际土壤中游离氨基酸含量比CK高44.325%,N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性比CK高108.848%,过氧化氢酶活性比CK高16.472%,均为最高值;1.0%菌剂处理对番茄枯萎病的预防效果最佳,为73.485%,1.0%菌剂处理的番茄植株过氧化氢酶活性比CK高55.742%,过氧化物酶活性比CK高47.404%,超氧化物歧化酶活性比CK高39.433%,几丁质酶活性比CK高209.989%、番茄根际土壤脲酶活性比CK高12.063%,均为最高值;总巯基含量则以2.0%菌剂处理最高,比CK高191.304%。【结论】总体上,0.5%、1.0%和2.0%菌剂处理均不同程度提高了番茄防御酶活性,改善了番茄根际土壤的生化性质,3.0%和4.0%菌剂处理对番茄及其根际土壤各项生化指标影响效果不明显,甚至产生抑制作用。 相似文献
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贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)是生防芽孢杆菌中的重要代表;作为微生物农药的核心菌种;已被广泛应用于作物病害生物防治。贝莱斯芽孢杆菌具有植物内生性;其生防作用机制主要包括产生次级代谢产物对抗植物病原物;改善宿主植物根际微生物群落;促进宿主营养和生长;激发宿主植物产生防御反应;诱导植物获得系统抗性。其中;产生次级代谢产物是其最重要的生防作用机制。贝莱斯芽孢杆菌含有多个编码生物合成次级代谢产物的基因簇;其中包括编码聚酮化合物合酶(PKS)和非核糖体肽合成酶(NRPS)的基因簇;同时存在核糖体途径合成次级代谢产物基因簇。通过非核糖体途径可产生脂肽类化合物、聚酮类化合物、二肽和铁载体;通过核糖体途径产生小菌素、细菌素、羊毛硫抗生素。这些具有生物活性的次级代谢产物成为了天然新药和候选抗生素的储存库;对于解析生防菌作用机制具有重要意义。本文综述了贝莱斯芽孢杆菌的命名与更迭;产生次级代谢产物的类型、合成与调控基因以及靶标病原菌;以期为生防菌株的改良和生物农药的研发提供参考。 相似文献
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目前仓库贮烟中烟草甲对烟叶危害较为严重,本研究试图通过筛选对烟草甲幼虫具有较高杀灭活性的苏云金芽孢杆菌菌株,以有效控制贮烟仓库中烟草甲虫害。我们收集了广西贮烟仓库中贮存的广西百色和贵州兴义生产的50份烟叶样品,利用醋酸钠筛选法共分离到芽孢杆菌137株,其中4株可能是苏云金芽孢杆菌,其菌株分离率和出菌率分别为2.91%和8.00%。扫描电镜显示GXZY032菌株能产生大量球形伴孢晶体蛋白,进一步的生理生化测定结果显示,菌株GXZY032与模式菌株Btt之间的生理生化反应特性表现基本相同,但在蔗糖发酵、淀粉水解、脲酶水解和卵磷脂酶4个项目反应上差异较大。对GXZY032菌株进行了生物毒力测定,发现该菌株对烟草甲幼虫的校正死亡率为72.5%,比模式菌株Btt的杀虫活性(86.25%)略微偏低。本研究结果将为后续发掘有效控制烟草甲幼虫的Bt菌株提供实验材料,为挖掘新型杀虫蛋白基因提供研究基础。 相似文献
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【目的】为了控制烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)引起的烟草黑胫病对烟草生产造成的危害。【方法】采用稀释平板法从贵州省毕节地区烟草根际土壤中分离筛选拮抗烟草疫霉的细菌菌株,然后经形态观察、Biolog鉴定及16S rRNA基因序列分析,对分离菌株进行鉴定,同时测定抗菌谱,单因子变量分析、优化生长条件。【结果】共分离得到44株拮抗烟草疫霉的细菌菌株,其中菌株21b对烟草黑胫病菌菌丝生长的抑制率达78.33%,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株对烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)、烟草灰霉病菌(Botrytis cinerea)、烟草赤星病菌(Alternaria alternate)和烟草炭疽病菌(Colletotrichum destructivum)均具有拮抗作用,抑菌圈大小分别为19.5、18.2、14.6和13.4 mm,最佳的发酵条件为:温度30°C、p H 7.0–8.0、装液量12%、盐浓度0.5%。【结论】分离筛选到一株对烟草寄生疫霉有较强拮抗活性的细菌菌株,为进一步开发烟草黑胫病的生防菌剂提供了菌种资源。 相似文献
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【目的】从土壤中分离、筛选和鉴定具有抑制病原真菌活性等生防效果的菌株,为进一步开发利用具有良好定殖能力的生防菌株奠定基础。【方法】利用对峙试验筛选拮抗菌并评价其拮抗性能,根据其形态特征、生理生化特性、16S r RNA基因序列测定及Gen Bank序列相似性分析进行分离菌株的分类鉴定,并通过福林酚法测定该菌株的蛋白酶活力。【结果】从山东泰安各种类型土壤中分离得到侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus),保藏编号为AMCC100017。平板对峙试验结果表明该菌株对多种植物病原真菌均有较强的拮抗作用,尤其是对镰刀菌属致病菌拮抗效果明显。另外,本试验还初步验证该菌能产生较高活性的胞外蛋白酶。【结论】侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017在作物真菌病害生物防治方面,有较好的开发和利用潜力,并可望应用于线虫生物防治。 相似文献
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孙亚楠;王春雪;王欣;杜秉海;刘凯;汪城墙 《生物技术通报》2024,(5):248-260
【目的】从黄河三角洲盐碱地中筛选到具有抗盐促生作用的一株根际菌,制成菌剂用于缓解玉米植株的高盐胁迫。【方法】通过功能培养基、16S rDNA序列和全基因组分析,确定菌株种属以及对玉米植株的抗盐促生效果。【结果】从黄河三角洲盐碱地中筛选到一株可在0-16%的NaCl和pH 5-8的条件下正常生长的萎缩芽孢杆菌CNY01,该菌株可促进玉米在高盐条件下生长,具有降蛋白和解钾的能力,还可抑制青枯雷尔氏菌、串珠镰刀菌等病原菌的生长。玉米植株在含100 mmol/L NaCl的营养液中生长8 d时,施加菌株CNY01可使植株的生理株高、根长和鲜重分别提高38.80%(P<0.01)、23.73%和28.19%(P<0.01)。玉米植株在加100 mmol/L NaCl的高盐盆栽条件下生长28 d时,菌株CNY01可使植株的株高、地上鲜重和地下鲜重分别提高10.84%、41.87%(P<0.01)和23.29%。全基因组序列分析也预测出该菌株基因组中含有维持细胞渗透压、合成应激蛋白等缓解高盐胁迫的基因。【结论】从黄河三角洲盐碱地中筛选到一株具有防病促生功能的萎缩芽孢杆菌CNY01,对玉米植株有显著的抗盐促生作用,结合基因组结果预测到该菌株含有与抗盐促生相关基因,是重要的菌种资源。 相似文献
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【目的】从在干旱、高盐碱生境下生长的盐生杂类草根际土壤中分离具有耐盐和促生性能的根际微生物,并研究其促生特性,为改良旱区土壤盐碱化提供优质菌种资源和理论基础。【方法】通过选择培养基筛选具有耐盐、解磷和解钾能力的菌株,再检测菌株产生长激素(indole-3-acetic acid,IAA)、产1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylate,ACC)脱氨酶、产铁载体以及产胞外多糖的能力,选择性状优良者通过拮抗实验组建复合菌剂。并采用菌液侵染萝卜和玉米种子验证菌株对在盐胁迫下种子发芽率和植株在干旱与盐双重胁迫下生长的影响。最后通过16S rRNA基因测序进行分子生物学鉴定。【结果】得到3株具有良好耐盐促生能力的根际微生物yl923、hs032和hy127,菌株yl923兼具解磷(46.29 mg/L)、解钾(58.07 mg/L)、产IAA(29.23 mg/L)、产ACC脱氨酶(13.83 U/mg)和产铁载体(SU=0.43)能力,菌株hs032具有最强产IAA(61.18mg/L)和产铁载体(SU=0.23)能力,菌株hy127具有最强产ACC脱氨酶(15.29U/mg)能力。经16SrRNA基因序列分析后分别将yl923和hs032鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),hy127鉴定为巨大普里斯特氏菌(Priestia megaterium)。3株菌互不拮抗可组建复合菌剂,2%混合菌液可提高种子在盐胁迫下种子发芽率(77%),对干旱和盐胁迫下玉米的根长、株高、干重和叶绿素也都有显著的提高(P<0.05),并且可以显著地降低玉米体内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量(60%)。【结论】菌株yl923、hs032和hy127具有优秀的耐盐促生性能,组合成的混合菌剂能在干旱和盐胁迫下促进植物的生长,具有改良旱区盐渍化土壤的潜力。 相似文献

