三尖杉科植物RAPD分析及其系统学意义

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术分析了三尖杉科植物三尖杉Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ ｆｏｒｔｕｎｅｉ Ｈｏｏｋ．ｆ．、粗榧Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓＬｉ、海南粗榧Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ ｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓＬｉ和篦子三尖极Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ ｏｌｉｖｅｒｉＭａｓｔ。,经筛选Ｏｐｅｒｏｎ公司的４组８０个引物,其中１１４个引物的谱带清晰呈多态性。采用ＵＰＧＭＡ法对各样本     

红豆杉科植物RAPD分析及其系统学意义

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术分析了红豆杉科（Ｔａｘａｃｅａｅ）红豆杉属（Ｔａｘｕｓ）、白豆杉属（Ｐｓｅｕｄｏｔａｘｕｓ）、穗花杉属（Ａｍｅｎｔｏｔａｘｕｓ）和榧树属（Ｔｏｒｒｅｙａ）的６种植物：红豆杉（Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ （Ｐｉｌｇｅｒ）Ｒｅｈｄ）、南方红豆杉（Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｖａｒ．ｍａｉｒｅｉ（Ｌｅｍｅｅ ｅｔＬｅｖｌ．）Ｃｈｅｎｇ ｅｔＭａｉｒｅＹｅｗ     

黑龙江省蹄盖蕨科（Athyriaceae）植物的RAPD分析及其系统学意义

在形态分类研究的基础上,利用RAPD技术,对黑龙江省蹄盖蕨科植物6属9种共15个种群进行了遗传多样性分析,分析结果表明：（1）假冷蕨属应包括在蹄盖蕨属中（2）角蕨属与蹄盖蕨属,羽节蕨属与冷蕨属亲源关系较近（3）短肠蕨属为独立一属,与其它属亲源关系较远。根据黑龙江省蹄盖蕨科植物的DNA水平的研究结果,再结合其形态学特征,建议将黑龙江省蹄盖蕨科划分为3个亚科：冷蕨亚科（Cystopterioideae）包括2个属：冷蕨属（Cystopteris）和羽节蕨属（Cemnocarpium）。蹄盖蕨亚科（Athyrioideae）包括3个属：蹄盖蕨属（Athyrium）、假冷蕨属（Pseudocystopteris）和角蕨属（Cornopteris）。双盖蕨亚科（Diplazioideae）包括短肠蕨属（Alhntodia）。     

黑龙江省蹄盖蕨科(Athyriaceae)植物的RAPD分析及其系统学意义

在形态分类研究的基础上,利用RAPD技术,对黑龙江省蹄盖蕨科植物6属9种共15个种群进行了遗传多样性分析,分析结果表明：（1）假冷蕨属应包括在蹄盖蕨属中（2）角蕨属与蹄盖蕨属,羽节蕨属与冷蕨属亲源关系较近（3）短肠蕨属为独立一属,与其它属亲源关系较远。根据黑龙江省蹄盖蕨科植物的DNA水平的研究结果,再结合其形态学特征,建议将黑龙江省蹄盖蕨科划分为3个亚科：冷蕨亚科(Cystopterioideae)包括2个属：冷蕨属(Cystopteris)和羽节蕨属(Gymnocarpium)。蹄盖蕨亚科(Athyrioideae)包括3个属：蹄盖蕨属(Athyrium)、假冷蕨属(Pseudocystopteris)和角蕨属(Cornopteris)。双盖蕨亚科(Diplazioideae)包括短肠蕨属(Allantodia)。     

10种披碱草属植物的RAPD分析及其系统学意义

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了10种披碱草属植物,即：Elymus sibiricus L.,E． caninus(L．)L¨E．lanceolatus(Scribner et Smith)Gould,E．nutans Griseb,E．dahuricus Turcz,, E．tangutorum(Nevski)Hand．-Mazz., E．brachyaristatus ALöve,E.submuticus(Keng)Keng f.,E． cylidricus(Franch)Honda和E．excelsus Turcz. 。对34个OPRON公司十聚体随机引物进行多态性筛 选,25个(75．53％)能产生多态性。16个引物产生的136个DNA片断,用于计算种间Nei氏遗传相似 性系数分析,在NTSYS程序中利用UPGMA构建系统发育树状图。分析结果表明：(1)四倍体和六倍体 物种各自聚为一支,它们之间的亲缘关系较远;(2)E．sibiricus和E. caninus;亲缘关系较近,支持把 Roegneria caninus (L．)Nevski归入Elymus;(3)E．nutans和E．dahuricus亲缘关系密切;(4)形态相 似、地理分布一致的E．brachyaristatus和E．submuticus存在着一定程度的核苷酸序列的差异,它们与 E．nutans和E．dahuricus有一定的亲缘关系;(5)E．excelsus 与 E．cylindricus的亲缘关系较近,它们 又与E．tangutorum有亲缘关系;(6)RAPD结果与形态学和细胞学等分析结果基本一致,RAPD分析方法将为Elymus系统分类提供DNA水平上丰富的资料。     

中国东北15种藓类植物RAPD分析及其分类学意义

本研究选用15 种东北藓类植物, 其中塔藓、赤茎藓、垂枝藓、拟垂枝藓、羽平藓、木藓、万年藓等为北半球广泛分布的大型藓类, 而褶叶藓、粗枝藓、球蒴金发藓等则是东亚特有种。在野外调查和采集的基础上, 进行RAPD 分析, 旨在从DNA 水平上对它们的亲缘关系和分类问题加以研究, 为它们的分类问题和亲缘关系提供分子证据。结果:从分子水平上进一步验证了15 种东北藓类植物形态分类的正确性。不同种类分别聚在金发藓目(Polytrichinales), 变齿藓目(Isobryales)和灰藓目(Hypnobryales)中, 与现采用分类系统一致。东北特产属褶叶藓属(Okamuraea)和粗枝藓属(Gollania)与垂枝藓科(Hyitidiaceae)植物关系较近, 而赤茎藓(Pleurozium)与绢藓(Entodon)有一定亲缘关系。因此, 将赤茎藓置于塔藓科(Hylocomiaceae)是合适的。     

葱属12种植物的RAPD分析

采用随机引物扩增多态DNA技术对葱属部分植物进行了种间亲缘关系的研究。结果说明12种材料之间存在丰富的多态性,遗传距离变幅在0.2500-0.7887之间,聚类分析说明蒙古韭,山韭,野韭,韭菜（栽培韭）,野生韭菜,矮韭亲缘关系较近,聚为一支,其中韭菜与野生韭菜亲缘关系最近。天蒜,薤白,蒜聚为一支,葱,洋葱,红葱聚为一支,其中葱与洋葱,红葱的遗传分化较大。     

7种金花茶组植物叶片营养成分分析

为选育金花茶优良品种,以7种金花茶组(Camellia sect.Chrysantha)植物成熟叶片为试材,对其总黄酮、茶多酚、总多糖、总皂苷、总氨基酸及维生素E等6种营养物质及K、Ca、Na、Fe、Mn、Zn、Se等7种矿质元素含量进行测定比较,通过聚类分析,考查不同金花茶组植物叶片间存在的药用价值差异。结果表明,7种金花茶组植物叶片的营养成分含量丰富且存在显著差异:凹脉金花茶(Camellia impressinervis)的茶多酚含量最高,达7.13%;东兴金花茶(C.tunghinensis)的总皂苷含量最高,达0.41 g·100 g^(-1);柠檬金花茶(C.limonia)的总黄酮含量最高,达671.67 mg·100 g^(-1)。矿质元素方面各种类均呈现高钾低钠的特征,凹脉金花茶、柠檬金花茶和小果金花茶(C.nitidissima var.microcarpa)K含量高于Ca,且各品种中均检测出Se元素。综合结果表明,凹脉金花茶叶片中茶多酚、总多糖、总氨基酸等各类营养成分含量相对较高,具有潜在的研究与开发价值。     

部分小檗科植物的RAPD 分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了部分小檗科(Berberidaceae)5 个属6 种植物:猫儿刺(Berberis julianae Schneid.), 日本绿叶小檗(Berberis thunbergii DC.), 阔叶十大功劳(Mahonia bealei (Fo rt.)Carr.), 南天竹(Nandina domestica Thunb.), 淫羊藿(Epimedium sagittatum(S.et Z.)Maxim.)和八角莲(Dysosma versipellis (Hance)M.Cheng.)。经筛选Sangon 公司的60 个引物, 其中29 个引物的谱带清晰并呈多态性。采用UPGMA 法对求出的遗传距离进行聚类分析, 结果显示:在小檗科内建立十大功劳属(Mahonia)和南天竹属(Nandina)是合理的。     

澳大利亚三种Callitris植物的核型及其系统学意义

对澳大利亚特产的Ｃａｌｌｉｔｒｉｓ属植物Ｃ．ｐｒｅｉｓｓｉｉ,Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｏｓａ,Ｃ．ｅｎｄｌｉｃｈｅｒｉ（柏科）的核型进行了分析,后２种的为首次报道。它们的核型公式分别为Ｋ（２ｎ）＝２２＝２２ｍ（２ＳＡＴ）,２２ｍ（２ＳＡＴ）和２２ｍ（６ＳＡＴ）,均属１Ａ核型类型。染色体相对长度组成同是２ｎ＝２２＝１０Ｍ＿２＋１２Ｍ＿１该３种及其他８种Ｃａｌｌｔｒｉｓ属植物一致的核型Ｋ（２ｎ）＝２２ｍ和１Ａ类型的通常被认为是最对称和原始的。因此该属在柏科的系统发育上也许处于相当原始的地位。     

用RAPD标记研究对虾属六个种间的亲缘关系

用ＲＡＰＤ技术对对虾属中六种对虾基因组ＤＮＡ的多态性进行研究。在事先优化的反应条件下用２０个随机引物扩增,共得到３６４条清晰稳定的多态性片段,片段长度在２３０￣２８００ｂｐ之间。统计这些片段,根据扩增片段的共享度计算出相对遗传距离指数,然后用ＵＰＧＭＡ和ＮＪ等聚类方法对其进行分析,构建系统树,确定了它们相互间的亲缘关系。从聚类分析的结果可以看到,外部形态比较相似的种类在基因组ＤＮＡ上表现出较大的相     

10个品系小鼠的RAPD 分析

小鼠是应用最为广泛的实验动物,预先了解品系或近交系的遗传纯度或系间遗传距离,对于试验材料的选取和实验结果分析都有很大帮助.传统的实验动物遗传监测多限于基因表型的检测,检测位点在整个基因组中所占比例小,分布不均.由于RAPD方法的优势,用一系列引物可检测出覆盖整个基因组的遗传改变,在动、植物品系鉴定和遗传监测方面已取得大量成果(陈洪等,1994;沈曦等,1999),但对多品系小鼠的研究报道较少.因此,本研究选用10个常用小鼠品系,筛选较好的多态标记,建立各品系的RAPD图谱,以区分不同品系的小鼠,为今后的质量监测工作提供参照标准;同时根据RAPD扩增结果计算出各品系间的相对遗传距离,在DNA水平探讨不同品系小鼠间的亲缘关系.     

二十八份玉米自交系的RAPD亲缘关系分析

采用RAPD技术,对28份玉米自交系的亲缘关系进行分析。旨在DNA水平上揭示玉米自交系之间的亲缘关系,为进一步提高玉米杂种优势利用水平提供有益的信息从100个10bp随机引物中筛选出24个多态性较好的引物,对28份玉米自交系DNA进行扩增,扩增出24张DNA指纹图谱,其中多态性DNA谱带106条,占总扩增带数的64％。利用DNA扩增结果进行聚类分析,建立了28个玉米自交系的亲缘天系树状图,将供试材料划分为五个类群,RAPD分析结果与已知系谱的亲缘关系基本一致。     

利用RAPD标记研究几种淡水腹足类的亲缘关系

以软体动物腹足纲、中腹足目的光滑狭口螺、长角涵螺、纹沼螺、赤豆螺、大沼螺几个形态分类的近缘种及梨形环棱螺(对照)作为研究对象,用随机扩增多态DNA技术对上述动物进行了20个引物的扩增,共获得117条扩增谱带,单个引物扩增的RAPD标记在3-12个之间,片段长度在30—3000bp之间。试验结果显示：淡水螺类的RAPD标记具有明显的多态性,而且种间的扩增标记及差异程度可以反映出物种间系统演化过程的亲缘关系。通过数值聚类制图后得到：长角涵螺、纹沼螺、大沼螺、赤豆螺之间的亲缘关系较近,而光滑狭口螺、梨形环棱螺与上述4个种的亲缘关系较远,其结果与新修订的淡水中腹足目科级分类方案相当吻合。     

用RAPD标记探讨金色果蝇复合种内的遗传分化

以随机扩增多态性DNA（RAPD）技术分析了金以果蝇复合种的5个姊妹种（Drosophile auraria、D．biauraria、D.triauraria、D．quadraria和D．subauraria）共12个地理种群的遗传变异。在40种10碱基随机引物中有30种引物对每个种群都可获得令人满意的扩增结果。在161个RAPD标记中有129个呈多态性。以遗传距离为尺度用UPGMA法构建了该复合种的聚类关系图。聚类分析结果结果表明：D.subauraria处于聚类关系图的基部,为该复合种中最早分化的种类;其后才是D.biauraria的分化,而D.auraria和D.quadraria的分化相对较晚。此结果不支持以往认为D.quadraria为金色果蝇复合种祖先种的观点。RAPD分子标记为金色果蝇复合种的系统演化的研究提供了新的、更有价值的信息。     

红麻及其近缘种的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术分析了木槿属（Hibiscus)Furcaria组中纤维作物红麻（H.cannabinus)及其6个近缘种植物的25份材料,用筛选出的16个引物扩增出192个RAPD条带,它们表现出丰富的多态性。根据得到的RAPD指纹图谱,计算其Nei氏相似系数和遗传距离。并构建了它们的系统树。结果表明,25份材料可划分为7个组。H.penduriformis和H.calyphyllus两个种为一组;红麻种分为两个组,一组为栽培品种,另1组为野生型材料;其余4个种各成为1组。玫瑰麻（H.sabdariffa)和金线吊芙蓉（H.radiatus)的关系较近,而且两者与红麻的亲缘关系也较近,而其它四个种与红麻的关系较远。H.trionum与其它六个种的关系较远。     

茶树RAPD分析体系的优化

以福鼎大白茶为材料,采用美国的PTC-100^Tm热循环仪,对茶树RAPD分析中影响PCR扩增结果的主要因素进行了研究。确定了茶树RAPD的最适反应体系和扩增程序,即在30μl反应体系中,含40ng模板,2mmol/LMgCl2,各0.2mmol/LdNTPs,0.15μmol/L引物和1.5UTaqDNA聚合酶;扩增程序为;第1步预变性94℃,180s,第2步变性92℃,50s;第3步退火35℃,50s;第4步链延伸72℃,100s;循环41次,后延伸72℃,300s。