尼泊尔马桑根瘤内生菌纯培养物的质粒检测

采用胶内裂解法快速检测了21株马桑根瘤内生菌纯培养物和4株弗兰克氏菌参考菌株的质粒,其中有5株马桑分离菌株和1株参考菌株含有质粒。除马桑菌株和参考菌株各有1株携带2个质粒外,其它菌株均只含有1个质粒。这些质粒的分子量约为13～20kb。根据所含质粒的大小和数目,将21株马桑分离菌株划分成4个质粒类群。实验还对菌丝体生长,细胞酶解和裂解等条件对质粒检测效果的影响进行了探讨。     

尼泊尔马桑放线菌共生固氮根瘤的感染和发育

弗兰克氏放线菌通过感染尼泊尔马桑的根毛侵入根的皮层细胞。由于内生菌侵入的刺激,部分皮层细胞分裂和增大,产生前根瘤原基。根瘤原基分裂、分化,形成初生根瘤瘤片。瘤片顶端分生组织不断双叉分枝,发育,并伴随着内生菌感染的寄主细胞,产生多次双叉分枝的珊瑚状根瘤。观察瘤片的横切面,含菌组织是一个马蹄形的致密整体,不完全地包围着稍偏的中柱。观察瘤片的纵切面,可将其划分为6个区域,即顶端分生组织,未感染皮层细胞组织、新感染含菌组织、成熟含菌组织、衰老含菌组织和中柱及其外围数层富含淀粉粒的皮层细胞。     

欧洲赤杨根瘤及其内生菌的形态学研究

对在云南生长的欧洲赤杨自然发生的根瘤及其内生菌──Ｆｒａｎｋｉａ进行了光学显微镜和扫描电镜的观察,结果表明,这种根瘤与原产地生长的欧洲赤杨所结根瘤十分相似;与原产地在云南的蒙自桤木的根瘤结构也很相近。从这种根瘤中分离到的内生菌的纯培养具有典型的Ｆｒａｎｋｉａ的特征。     

一株弗兰克氏菌分类鉴定的研究

从中国沙棘(Nippophae rhamnoidel LI s叩．tinensis Roun)根瘤中分离出一株生孢囊的放线菌Fran&㈦P．HRl04。经回接试验证实,它可以侵染寄主植物,形成能够固氮的有效根瘤。通过形态和培养特征、生理生化特性、细胞壁组份及DNA中G+c含量等的研究,表明这株菌与已经研究和描述过的弗兰克氏菌有差别,特别是胞壁型不同,可能属于一个尚未研究过的新属。本文还对弗兰克氏菌的分类标准和鉴定方法进行了初步探讨。     

基于高通量测序分析西藏沙棘根瘤内生菌的多样性

根瘤是微生物侵染植物根部并与之形成的共生结构,这些微生物都可被称为植物内生菌。豆科植物根瘤中的内生菌常常又被称为根瘤菌,而侵染非豆科植物形成根瘤的主要是放线菌弗兰克氏菌,这些非豆科植物又被称为放线菌结瘤植物。西藏沙棘是一种典型的放线菌结瘤植物,由于其分布生境的特殊性,对其根瘤内生菌的研究具有重要的生态意义。对于西藏沙棘根瘤内生菌的研究,培养方法因难以模拟自然条件而不易获得纯培养,高通量测序技术对其多样性的研究提供了便利。因此,本研究以生长在甘肃省天祝县金强河河滩地的西藏沙棘根瘤为材料,采用16S rRNA基因扩增子高通量测序方法,结合OTU分析,对西藏沙棘根瘤内生菌的多样性进行探讨。实验结果表明,西藏沙棘根瘤内生菌具有丰富的多样性,根瘤内的优势属为共生固氮的弗兰克氏菌属（Frankia）,其相对丰度为47.63%,共检测到7个弗兰克氏菌属的OTUs;根瘤内除弗兰克氏菌外,还存在大量的非弗兰克氏菌,共检测到1523个OTUs,隶属于22个门、33个纲、69个目、113个科和202个属,相对丰度排名前9的属中有25个非弗兰克氏菌属的OTUs。该研究也表明,西藏沙棘根瘤内生菌具有丰富的多样性,西藏沙棘根瘤中不仅存在着可共生固氮的弗兰克氏菌,并且还分布着非弗兰克氏菌;在同一根瘤样品中,弗兰克氏菌属还具有不同的物种。本研究不仅拓展了西藏沙棘根瘤内生菌多样性的研究方法,还为同一寄主植物中弗兰克氏菌多样性的研究提供了分析思路。     

木麻黄根瘤内生弗兰克氏菌的反硝化作用

为了解非豆科植物共生固氮菌弗兰克氏菌的反硝化作用特点以及作为N₂O源汇的能力,采用切片法分离并纯培养木麻黄根瘤内生弗兰克氏菌,探究NO₃^-添加下弗兰克氏菌的反硝化作用过程。结果表明：在厌氧培养条件下添加NO₃^-后,NO₃^-浓度随时间的增加而降低,26 h后趋于平稳;而NO₂^-和N₂O的浓度随着时间的增加先升高后降低。在培养第26、54和98小时均检测到关键反硝化基因和固氮酶基因。基因之间的丰度差异显著,且随时间的变化不同步。冗余分析表明,以NO₃^-、NO₂^-和N₂O浓度为解释变量,前2个排序轴总共解释了反硝化及固氮酶基因丰度总变异的81.9%。弗兰克氏菌在厌氧条件下具有反硝化作用,检测到系列反硝化基因,包括N₂O还原酶基因(nosZ),表明...     

弗兰克氏菌的分类研究进展

弗兰克氏菌是非豆科植物共生固氮菌。到目前为止,已发现它们可以分别与8个科、25个属的200多种非豆科植物共生[1],其中包括赤杨、杨梅、沙棘、胡颓子、马桑、木麻黄、悬钩子、仙女木等。这些植物对于荒地的开垦和防止水土流失具有重要意义。而弗兰克氏菌与这些植物共生形成可     

马桑共生固氮根瘤及其内生放线菌

马桑型非豆科内生放线菌的共生固氮根瘤的含菌组织与桤木型不同。前者为一马蹄形整体,围绕着中柱维管束;后者完全包围中柱,其中含菌细胞和不含菌细胞交错存在或形成分散的含菌细胞组织团。尼泊尔马桑(Coriaria nepalensis Wall.)根瘤的内生放线菌菌丝形态与桤木根瘤的内生菌形态相同,具有一层电子密度很高的单层壁和具有单层壁的横隔膜。菌丝分枝,具有中间体。成熟的含菌细胞内有一围绕着中央液泡的栅栏排列的柱形泡囊,它们是菌丝的顶端细胞,其电子密度比菌丝高。含菌组织的衰老部分有颗粒体,颗粒体有双层壁,内层壁与菌丝的相同,外层壁比内层壁厚数倍,电子密度低。     

蒙自桤木根瘤内生菌的分离培养

从蒙自桤木（Ａｌｎｕｓｎｏｐａｌｅｎｓｉｓ）根瘤中分离得到４株Ｆｒａｎｋｉａ,对其进行了形态学研究,并对Ａｎ１２菌株进行了生长曲线测定,结果表明从蒙自桤木根瘤中分离Ｆｒａｎｋｉａ,除所采用的培养基和方法外,宿主植物所处的生长状态也可能是一个影响分离成败的重要因素;“Ｓ”培养基是一种较为理想的分离培养基;在离体条件下,Ｆｒａｎｋｉａ生长缓慢,约１０ｄ左右达到其生长的稳定期。     

The nodular endophytes of Coriaria spp. form a distinct lineage within the genus Frankia

Repeated attempts at isolating the Frankia endophyte of Coriaria spp. have not yielded infective microbial cultures that could fulfil Koch's postulates. In order to circumvent the critical isolation step, nodule endophytes of Coriaria were characterized directly by means of specific amplification of nodule DNA (PCR) followed by sequencing of part of the 16S rDNA gene. Three closely related sequences were obtained from nodules originating from France, Mexico and New Zealand, containing unique sequences different from all other Frankia strains characterized so far. The sequences obtained were closest (with 5 or 6 substitutions) to those of Frankia alni and those of Casuarina-infective Frankia strains, respectively. Two nucleotides unique to the Coriaria endophyte sequences were used to define specific primers, resulting in a hybridization test that could discriminate between Frankia DNAs originating from Coriaria nodules and those recovered from all cultured Frankia strains tested. The endophytes of Coriaria thus appear to form a distinct Frankia lineage.     

11株不同生态条件下的根瘤放线菌的形态特征

1 引言 自1978年由美国的Callaham等首次成功地从香蕨木根瘤中分离出Frankia的离体培养以来,使放线菌结瘤植物的研究领域有了突破性的进展,据报道,近10年国内外的研究者已从10个属植物根瘤中获得Frankia菌株的离体纯培养。我们于1981年由四川     

马桑菌株的生物学特性

对从湖北、四川、云南等地采集的尼泊尔马桑(Coriaria nepalensis Wall.)根瘤中分离的20株内生菌纯培养物所进行的研究表明,其形态均具有弗兰克氏菌属的特征。在粗细不一的分枝菌丝体上有泡囊和孢囊,有的还有串珠状结构的菌丝体。不同菌株在液体培养基上生长速度很不一致;菌丝体多呈絮状或颗粒状沉淀,个别还呈薄膜状沉淀;绝大多数菌株的菌丝体具有不同色调的色素;在S培养基中大多数都能产生可溶性色素。上述这些培养特征常因培养基成分和培养方式的不同而有差异。大多数菌株的胞壁组分属Ⅱ型,少数菌株为Ⅲ型;全细胞糖型变化很大,20个菌株可划分为6个糖型,而且绝大多数糖型与已知弗兰克氏菌有所不同。此外,有65％的菌株还具有明显的抗菌活性。     

西藏黑斑原繁殖群体两性异形研究

两性异形是指在同一种群内, 雌雄间的形态特征产生分化, 如在个体大小、局部形态构造、体色等方面呈现出差异的现象。为了解西藏黑斑原 (Glyptosternum maculatum) 雌雄间是否也存在两性异形, 在其繁殖期对性成熟个体进行了形态学测量及相关分析。结果表明: 西藏黑斑原繁殖群体间存在显著的雌雄异形, 一是雄性个体的体长、体重及特定体长下的尾长显著大于雌性个体; 二是在特定体长下, 雌性个体眼径、体高、躯干长以及背鳍、胸鳍、腹鳍、臀鳍、尾鳍长度均显著大于雄性。16个形态参数的主成分分析表明, 雌雄间的差异主要是由体型特征(包括身体各部分长度、各鳍长度等)及头部形态特征引起的, 贡献率达76.7%。对全长-体重方程中异速生长指数b的t检验表明, 繁殖期黑斑原雌性个体呈等速生长而雄性个体呈异速生长。     

The correlation among molecular phylogenetics, morphological data, and growth temperature of the genus Emericella, and a new species

The species of the genus Emericella have been classified and identified on the basis of morphological features. However, the phylogenetic relationships in this genus have not been investigated. To clarify the relationships according to molecular phylogenetics, morphological characteristics, and growth temperature regimens in Emericella, multilocus sequencing analysis based on recent Aspergillus taxonomy was carried out. Various characteristic species formed individual clades, and maximum growth temperature reflected the phylogenetics. Emericella species exhibit various ascospore characteristics, although some species do not have distinct ascospore ornamentation. Species that have smooth-walled ascospores with two equatorial crests are polyphyletic. Here, Emericella pachycristata is described and illustrated as a new species. Its ascospores are similar to those of E. nidulans. These species produce smooth-walled ascospores, but the equatorial crests of E. pachycristata are thicker than those of E. nidulans. On the phylogenetic trees, E. pachycristata is closely related to E. rugulosa, which produces ascospores with ribbed convex surfaces. Thus, E. pachycristata is considered to be a new species both morphologically and phylogenetically.     

中国沙棘(Hippophae rhamnoides ssp. Sinensis)根瘤内Frankia菌的遗传多样性

为了研究中国沙棘亚种共生菌Frankia的遗传多样性,利用PCR-RFLP分子标记方法,对从青海西宁到内蒙古库伦17个地点采集的106个中国沙棘根瘤样品进行遗传多样性分析.供试样品nifD-nifK基因间隔区(IGS)扩增产物分别用3种内切酶(HinfⅠ、HaeⅢ和MboⅠ)酶切,共产生21条酶切谱带,其中17条为多态性条带,多态位点百分比(PPL)为80.99%,所有样品可被划分为9个基因型.结果表明中国沙棘根瘤内的Frankia菌有丰富的遗传多样性,土壤质量较好地点的丰富度高于土壤质量较差地点,海拔较高地区的丰富度高于海拔较低地区,多数地点至少有2种不同基因型的Frankia 菌.聚类分析显示Frankia 菌不同基因型间的遗传距离在4.88%～55.96%之间,它们在不同地点的分布是不均匀的,没有发现不同基因型菌间的亲缘关系与地点有相关性.中国沙棘根瘤中Frankia菌可分为两个基因型组,组内基因型分布比较一致,而组间有明显差异.     

Influence de quelques herbicides à large spectre sur la croissance et l'infectivité de cultures pures de Frankia

Resumé L'influence de 4 herbicides couramment utilisés en agriculture sur la croissance, la morphologie et l'infectivité de cultures pures de Frankia a été étudiée. Aux doses prescrites par le fabricant, la croissance des cultures et la morphologie de Frankia ne sont pratiquement pas affectées par le Légurame, le Dévrinol ou le Fulton. A fortes concentrations le Comodor inhibe totalement la croissance de certaines souches. La formation de nodules est fortement affectée par tous les herbicides utilisés.

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Effects of some herbicides on the growth and infectivity ofFrankia strians

Summary Effects of four herbicides, widely used against weeds, on Frankia strains grownin vitro were studied. At the recommended rate, Legurame, Devrinol and Fulton had significant effect on growth and morphology of Frankia strains. At a high concentration Comodor inhibited growth of 6 strains. Infectivity was affected by al herbicides; 6 weeks after inoculation nodules were not yet formed.