高等植物叶片中的硝酸还原酶活性稳定因子

从小麦、油菜、浮萍、番茄、烟草的叶片中分离得到NR-SF。不同植物材料中NR及NR-SF能起交叉反应;不同NR-SF影响NR酶动力学性质相同;不同NR-SF的凝胶电泳谱带显示蛋白和糖蛋白性质。NR-SF广泛存在于植物细胞中。     

番茄叶片中硝酸还原酶活性的“稳定因素”

硝酸还原酶(NR)是一种不稳定的酶,离体的NR在0℃下保藏几小时后,它的活性会显著丧失,有时甚至测不出它的活性。这一情况一直是进一步研究NR的生理生化的主要障碍。1979年,Sharrad首先发现小麦叶片中有二种因素能增进 NR活性,他认为这二种因素可能是蛋白类物质。我们(1980)证实番茄叶片中也有蛋白类物质能活化脱辅基NR酶蛋白。Purvis(1980)发现棉花种子及子叶中有一类热稳定的蛋白类物质,能稳定NR活性。现在对这类物质的认识刚刚开始,对它的性质和在植物之间的分布有待进一步研究。     

某些环境条件对硝酸还原酶活性稳定因子的影响

小麦 Triticum aestivum L.苗在 NO_3~--N 完全营养液中培养比在 NH_4~ -N 完全营养液中培养,它们叶细胞内的硝酸还原酶(NR)即 NO_3-NR 比 NH_4-NR 活性增高了15倍,而它们叶片中的稳定因子(NR_(SF)),即 NO_3-NR_(SF)比 NH_4-NR_(SF)活化 NO_3-NR 的能力仅增加0.2倍,表明 NR 与 NR_(SF)不是依存关系;另外在 NO_3~--N 培养的黄化小麦叶片,及黄化缺氮、缺铝,加(?)的叶片中,所有的 NR_(SF)都十分稳定,并且保持较高活性,但这些叶片中没有测出NR 活性,因而认为,在植物叶细胞中,NR_(SF)不是调节 NR 活性的主要条件。     

钼和6-BA对缺钼番茄叶片中硝酸还原酶活性恢复的影响

硝酸还原酶(NR)在植物的氮素营养上是一个关键酶,NO_3~-进入植物体内,首先须经过NR的催化作用才能被还原为NO_2~-,然后再经过其他种酶的作用被同化到蛋白质上。所以对NR的研究一直受到重视。 Nicholas和Nason证明NR中含有金属钼(Mo),以后又有不少工作者研究了Mo与NR的关系。肯定指出Mo构成NR的辅基,处于该酶的活性中心。但是NR又     

春化对油菜叶片硝酸还原酶活性的影响

油莱种子经春化后,其子叶NR活性提高了1.5～4.9倍,真叶展开、雌雄分化及开花期的NR活性也高于对照。去顶芽、高温中断及抑制剂处理证实春化是导致NR活性变化的原因。春化期间幼苗根部对NO_3~-吸收及叶片ATP含量的增加可能是NR活性升高的部分生理机制。     

硝酸还原酶的研究——Ⅰ.小麦叶片硝酸还原酶—钝化蛋白的分离和特性

从小麦叶片得到的硝酸还原酶(NR)-钝化蛋白用作钝化小麦叶片NR。通过硫酸铵分级分离和Sephadex G-100柱纯化的小麦蛋白分为两个部分,对NR都有明显的钝化活力,但又有着不同的性质。在Tris-甘氨酸缓冲液系统中进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时,钝化蛋白部分Ⅰ的蛋白下移缓慢,保持在起端,而钝化蛋白部分Ⅱ的蛋白则下移迅速,接近底端。对NR的钝化作用,钝化蛋白部分Ⅱ明显高于同样量的部分Ⅰ。钝化蛋白部分Ⅰ的最适pH为7.5,部分Ⅱ的最适pH为6.5。钝化蛋白部分Ⅰ和部分Ⅱ对NR的作用方式也不同。前者对NR无明显水解作用,后者对NR有较强水解作用且与NR-起预保温后在Sephadex G-75柱上移动性无明显变化。小麦叶片NR-钝化蛋白部分Ⅱ可能是个特异的水解蛋白,而钝化蛋白部分Ⅰ可能不是个水解蛋白。     

大豆叶片硝酸还原酶活力的研究

硝酸还原酶(NR)是植物体内硝酸盐同化过程中的限速酶,在植物氮代谢中处于关键位置。它对植物生长发育、产量形成和蛋白质含量都有重要影响,很早就引起植物生理学和农学工作者的极大重视。近几年来在水稻、小麦、玉米等农作物中都有较多的研究,但在大豆中的研究却不多。本文     

教学实验中硝酸还原酶活性测定方法的改进

测定硝酸还原酶（nitrate reductase，NR）活性在植物生理教学实验中一般是必做的。但其中α-萘胺的配制是用盐酸做溶剂，加入蒸馏水后，会沉淀出一部分，因而溶液有效成分降低，致使显色反应中的颜色很浅，酶活性小的几乎看不到颜色。对此，我们做了一些摸索，现概述如下。     

钙对黄瓜子叶愈伤组织中硝酸还原酶(NR)活性的影响

本文采用黄瓜子叶愈伤组织,研究了不同钙培养下,对愈伤组织生长、硝酸盐吸收,NR活性以及组织中钙、镁含量的影响。结果表明,缺钙后,愈伤组织生长、硝酸盐吸收、NR活性等都比正常钙培养下的愈伤组织降低。这与用整株植物所得结果基本一致,对此结果进行了讨论。     

不同供氮水平下冬小麦叶片中RuBP羧化酶和硝酸还原酶的活性变化

氮素营养与小麦的生长发育、光合作用以及产量之间有密切的关系。Seeni和Gnanam认为增施氮肥能提高CO_2固定速率。Evans也指出:随着小麦叶片含氮量的增加,净光合速率上升,但并不呈线性关系,而是呈二次形曲线关系;即达到一定含氮量后,光合速率不再继续上升,且有下降趋势。很多学者指出,在一般田间饱和光强度     

硝酸还原酶的研究——Ⅵ.水稻硝酸还原酶的纯化和特性

水稻叶片NR在Blue Dextran-Sepharose 4 B亲和层析法的纯化过程中,继100μMNADH洗脱出现一个酶活峰后,再用0.25MKNO_3洗脱又出现一个更高的酶活峰。酶与BlueDextran-Sepharose 4B有两个结合位点,它们可能就是酶与底物NADH和NO_3的结合位点。NADH能和Blue Dextran竞争与酶结合而把NR从亲和柱上洗脱下来。硝酸盐除了具一般盐类的离子强度外,还有明显的底物效应。如果将KNO_3-洗脱的NR再反复进行亲和层析,又可得到NADH-洗脱和KNO_3-洗脱的两部分NR。这两部分NR在聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上都呈现一条相同的蛋白带。 水稻NR的全酶分子量约330Kd,亚基分子量约57Kd,故全酶可能由6个相同亚基组成,酶活的pH范围为6.5～8.5,最适pH为7.5;酶对底物NO_3-和NADH的K_m值分别为3.3×10~(-4)M和2.9×10~(-5)M。     

低pH对水稻黄化叶片硝酸还原酶活性暗诱导的调节

在低pH条件下,水稻离体黄化叶片的硝酸还原酶(NR)活性能在暗中诱导产生,其诱导过程约有2h的滞后期,亚胺环已酮(CHI,5ppm)和Na_2WO_4(25 mmol/L)能完全抑制这种诱导作用。在最适pH 3.0时,H~3标记氨基酸掺入NR的量比pH 7.0时约高2倍,表明酶活性的产生与酶蛋白的重新合成有关。 当低pH暗诱导时,BA(5ppm)和ABA(15ppm)能使酶活性分别提高约30％和80％,但它们都不能取代低pH在NR活性暗诱导中的作用。当存在1ppm CHI的时候,BA仍促进NR活性,而ABA则加强CHI对酶活性的抑制作用,这提示BA与ABA在低pH暗诱导条件下促进NR活性的机制是不同的。在pH 7.0的光诱导条件下,ABA对NR活性起抑制作用。     

小麦叶片中硝酸还原酶活性、游离氨基酸和粗蛋白含量与籽粒蛋白质含量关系研究

试验以５个八倍体小偃麦、野生二粒小麦、硬粒小麦和１３个普通小麦品种（系）为材料,研究了叶片中硝酸还原酶活性（ＮＲＡ）、氨基酸和粗蛋白含量与籽粒蛋白质含量之间的关系。结果表明,叶片中ＮＲＡ在拔节、抽穗、开花三个生育时期与籽粒蛋白质含量存在显著的正相关系;叶片中氨基酸总量与籽粒蛋白质含量在拔节和抽穗期显著相关,在开花期相关不显著;抽穗期旗叶中粗蛋白含量与籽粒蛋白质含量相关显著。籽粒蛋白质含量高的基因型材料其叶片中ＮＲＡ、氨基酸和粗蛋白含量一般高于低蛋白基因型材料,三者的变化趋势一致,这反映了不同基因型Ｎ素代谢的特点。因此适宜生育时期叶片中ＮＲＡ、氨基酸和粗蛋白含量可作为品质育种选择过程中的参考生理指标。     

硝酸还原酶的研究——Ⅲ.硝酸还原酶钝化蛋白的专一性及其对硝酸还原酶的水解作用

以同样的提取方法,分别从小麦叶片、曼陀罗愈伤组织中提取的硝酸还原酶(NR)钝化蛋白均可明显钝化小麦、水稻、玉米等叶片的NR,而从水稻、豌豆叶片中提取的NR钝化蛋白也均可明显钝化小麦叶片NR的事实显示出植物体内NR钝化蛋白存在的普遍性及不同植物种间这种钝化蛋白作用的共同性。水稻叶片及曼陀罗愈伤组织NR钝化蛋白只能钝化NR,而不能钝化与NR同为植物氮素同化关键酶的亚硝酸还原酶(NiR),小麦叶片NR钝化蛋白只能钝化NR而不能钝化与NR同为诱导酶的α-淀粉酶又表明NR钝化蛋白对NR的钝化作用具有一定的专一性。在小麦叶片NR钝化蛋白(部分Ⅰ)与NR一起保温时,同时加入作为水解酶抑制剂的大豆胰蛋白酶抑制物或丝氨酸酶抑制物PMSF,均可部分解除钝化蛋白的钝化效力,可作为此种钝化蛋白是个水解酶的进一步证明。     

不同光照下几种结瘤突变大豆叶片中硝酸还原酶活性（简报）

大豆及其结瘤突变体超结瘤nts382和不结病Nod49经接种根瘤菌（R.japonicumStrainUSDA110）并于300μEm-2s-1光照下培养，它们的叶细胞中形成高活性的抑制iNll、C1NR和C2NR活性的因子，而在nts382叶细胞中的活性很低。在150μEM-2S-1红光下培养的3种大豆叶细胞中几乎不含NR活性的抑制因子，显示光照和接种是诱导形成该因子的两种条件。     

若干种豆苗的硝酸还原酶的活性研究

一.绪言已经肯定证明,NO_3~-—N与NH_4~ —N同是植物的有效氮源。可是由于土壤内的有机氮化物通过自溶及硝化作用常产生大量的NO_3~-,所以除了少数嗜NH_4~ 植物外,无疑的,NO_3~-在高等植物的氮素营养中具有特别重大意义。大家知道,氮在氨基酸与蛋白质内是处于还原状态,因此,植物所吸收的NO_3~-在参与代谢之前,首要阶段必须进行还原,所以NO_3~-还原是决定植物氮素代谢的重要关键。