发现神经病靶酯酶的自噬溶酶体降解途径

神经病靶酯酶（neuropathy target esterase,NTE）是在研究有机磷引起的迟发性神经病（organophosphateinduced delayed neuropathy,OPIDN）的机理的过程中被发现的。NTE被认为是诱导OPIDN发生的起始靶标。研究证明,NTE是一种内质网上的跨膜蛋白,属于一种新的磷脂酶B。     

神经病靶标酯酶的调节与功能

神经病靶标酯酶(NTE)是一种只催化经CDP-胆碱途径合成的卵磷脂的磷脂酶B,其表达可能受着卵磷脂、环腺苷酸和泛素-蛋白酶体途径的调节。NTE不仅对于胚胎发育和神经系统中非常重要,还在细胞增殖和细胞分化中起着一定的作用。有机磷酸酯可能通过抑制NTE,破坏膜脂稳态,阻碍神经细胞内的物质运输引发轴突损伤的迟发性神经病。     

神经病靶标酯酶调控结构域结合蛋白筛选及其在COS-7细胞中的表达

本研究采用酵母双杂交系统探寻与神经病靶标酯酶（NTE）调控结构域相互作用的蛋白因子,揭示与NTE信号转导相关的可能机制。通过构建含有NTE调控结构域的诱饵蛋白载体筛选胎脑文库,并将筛选得到的阳性克隆在酵母中进行了验证,随后在哺乳动物细胞中表达了该蛋白。生物信息学分析显示：该阳性克隆为前列腺素受体结合蛋白54（ARA54）,具有泛素连接酶活性,提示细胞可能存在依赖于细胞周期的NTE活性调节机制,为阐明NTE生理功能创造了条件[动物学报51（5）：840—844,2005]。     

有机磷化合物诱导的迟发性神经毒性的研究

很多有机磷化合物了易使人和动物产生急性事毒性,还能引发一种迟发性毒性,即“有机磷化合物诱导的迟发性多发性神经病”。本文综述了有关ＯＰＩＤＰ的症状学,病理学和生物化学的研究及其进展。     

溶血卵磷脂对小鼠及鸡脑突触体内钙离子浓度的升高作用

鸡是有机磷引起的迟发性神经病(OPIDN)的最常用的动物模型,OPIDN的发生被认为与神经病靶酯酶(NTE)的抑制有关。本研究比较了NTE的生理性底物溶血卵磷脂(LPC)对鸡和小鼠脑突触体内钙离子浓度的影响。LPC能够浓度依赖性地引起小鼠和鸡脑突触体内游离钙浓度升高,且在两种动物来源的突触体上的反应趋势和幅度基本相同。去掉突触体悬液中Ca2 后,同样在LPC的作用下,突触体内钙浓度不但没有升高反而明显下降,这在两种来源的突触体上的结果相同。L型钙通道阻断剂维尔帕米和非特异性钙通道阻断剂氯化镉均对LPC引起的小鼠和鸡脑突触体内钙升高都没有阻断作用。这些结果表明,LPC主要通过其对膜的破坏作用引起小鼠和鸡脑突触体内的游离钙浓度升高,且在小鼠和鸡脑突触体内钙离子浓度升高的幅度和机制方面没有种属差异。本研究的结果表明:鸡和小鼠在OPIDN中的症状差异并非由于LPC介导突触体内钙超载的强度不同所导致。     

神经病靶标酯酶

某些有机磷酸酯 (ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｅｓｔｅｒｓ ,ＯＰｓ)可使人及其他敏感动物患一种迟发性神经病 ,即有机磷诱导的迟发性多神经病(ｏｒｇａｎｏｐｈｏｐｈｏｒｕｓｅｓｔｅｒ ｉｎｄｕｃｅｄｄｅｌａｙｅｄｐｏｌｙｎｅｕ ｒｏｐａｔｈｙ,ＯＰＩＤＰ) ,这种病以步态失调、下肢麻痹以及脊髓与外周神经轴突变性为基本特征 ,症状出现前一般有 1～ 3周的潜伏期。一般认为 ,ＯＰＩＤＰ是由于神经毒性ＯＰｓ共价修饰神经病靶标酯酶 (ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙｔａｒｇｅｔｅｓｔｅｒａｓｅ ,ＮＴＥ)引起 ,ＮＴＥ的催化活性被抑制和…     

松墨天牛幼虫体内神经毒性酯酶和乙酰胆碱酯酶对甲胺磷敏感性的比较

松墨天牛Monochamus alternatus Hope是传播松材线虫Bursaphelenchus xylophilus Nickle的主要媒介昆虫,在其化学防治中经常使用有机磷杀虫剂,而这类杀虫剂有些可通过作用于神经毒性酯酶（neurotoxic esterase, NTE）使敏感的脊椎动物产生迟发性神经毒性。为了深入理解有机磷杀虫剂对害虫毒杀作用机理,增强对昆虫体内NTE活性的了解,我们在松墨天牛中开展了相关的研究。通过差异测定法和经典的乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase, AChE）活性测定方法,分别测定了松墨天牛幼虫体内NTE和AChE的活性。结果发现,在松墨天牛体内存在NTE活性,其头部的NTE活力为2.80±0.30 nmol·min^-1·mg^-1,比脂肪体高出了近10倍,但仍较鸟类等脊椎动物为低。体内实验显示,松墨天牛体内NTE可被甲胺磷所抑制; 但在体外实验条件下,甲胺磷对来自松墨天牛头部的NTE活性并没有产生明显抑制作用,而此浓度下的甲胺磷对AChE表现出较高水平的抑制作用。表明松墨天牛体内NTE和AChE对甲胺磷的敏感性完全不同。     

三甲基苯基磷酸酯对神经毒性酯酶的抑制及其酶促动力学分析

以可使人和敏感动物产生迟发性神经毒性的有机磷化合物三甲基苯基磷酸酯（TOCP）为测试药物,研究其在体外对成年产卵来航母鸡不同神经组织神经毒性酯酶（NTE）活性抑制的敏感性及其抑制的动力学．结果表明,外周神经NTE对于TOCP的抑制比中枢神经NTE敏感得多．TOCP对鸡脑、脊髓和坐骨神经中NTE抑制的I50值．分别为：1．9323、2．3950和0．0035mmol／L．NTE酶促动力学研究显示,鸡脑NTE催化分解底物戊酸苯酯（PV）的Vmax为62．10nmol·min-1·mg-1,Km为0．92mmol／L．TOCP对鸡脑NTE的抑制属竞争性抑制类型,并有"底物抑制"现象．     

电压门控钠通道在神经病理性痛中的作用

电压门控钠通道(VGSC)在神经病理性痛的发生和维持中起重要作用。非特异性的通道阻断剂是神经病理性痛的一种治疗手段,但由于可能产生严重的副作用而限制了其使用。最近研究揭示了几种主要在外周感觉神经系统中表达的VGSC的亚型与神经病理性痛密切相关,发展特异性的通道亚型阻断剂将成为治疗神经病理性痛的重要研究方向。     

神经病理性疼痛研究进展

神经病理胜疼痛是指神经系统的损伤或功能障碍引起的疼痛,占到了各类慢性疼痛的30%以上。第四军医大学完成的—项研究成果成功揭示了神经病理性痛的发生机制,创建两种能够分别模拟神经病理性痛不同临床表现的动物模型为研究神经病理性痛和制定治疗策略奠定了基础。