虫生真菌分子致病机理及基因工程改造研究进展

虫生真菌侵染寄主昆虫的复杂过程可分为体表附着、体壁穿透及体内定殖和致死等不同阶段。近年来, 以金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)和球孢白僵菌(Beauveria bassiana)为代表的基因功能研究取得了长足的进展, 从不同角度阐明了虫生真菌的分子致病机理; 同时, 基因工程技术的应用为昆虫病原真菌的遗传改良和选育高毒力杀虫菌株开辟了新的途径。对近年来昆虫病原真菌侵染寄主的分子对策及基因工程改造的研究进展进行了综述, 并就进一步研究虫生真菌的毒力基因及功能进行了探讨。     

虫生真菌分子致病机理及基因工程改造研究进展

虫生真菌侵染寄主昆虫的复杂过程可分为体表附着、体壁穿透及体内定殖和致死等不同阶段.近年来,以金龟子绿僵茵(Metarhizium anisopliae)和球孢白僵菌(Beauveria bassiana)为代表的基因功能研究取得了长足的进展,从不同角度阐明了虫生真菌的分子致病机理;同时,基因工程技术的应用为昆虫病原真菌的遗传改良和选育高毒力杀虫菌株开辟了新的途径.对近年来昆虫病原真菌侵染寄主的分子对策及基因工程改造的研究进展进行了综述,并就进一步研究虫生真菌的毒力基因及功能进行了探讨.     

虫生真菌研究与应用的发展与机遇 ——2012年虫生真菌专刊序言

我国从事虫生真菌基础及应用研究的人员众多,各方面均取得了重要的研究成果。2012年“虫生真菌专刊”收集了国内关于虫生真菌资源、基因克隆及活性成分代谢等方面的最新研究进展。进一步的基础研究,应加强致病基因功能和真菌-昆虫分子相互作用等研究,以提高真菌杀虫剂或药用虫生真菌的应用效率。     

滇西太保山森林公园子囊菌门虫生真菌物种多样性及其消长动态

云南及青藏高原存在着丰富的虫生真菌资源。本文选择云南省保山市省级城市森林公园太保山森林公园为研究区域, 对子囊菌门虫生真菌物种多样性及其季节消长动态开展了系统研究。在2016年每月采集土样和罹病昆虫, 分离虫生真菌菌株, 采用多基因(nrSSU, nrLSU, EF-1α, RPB1和RPB2)系统发育分析进行物种鉴定, 通过α多样性分析来研究虫生真菌的数量特征和种群消长动态。太保山森林公园子囊菌门虫生真菌全年均有分布, 共获得395个菌株, 包括3科9属24种; 优势属为虫草属(Cordyceps) (6个种199个菌株), 白僵菌属(Beauveria) (5个种80个菌株), 优势种依次为Akanthomyces sp.、Cordyceps tenuipes、C. cicadae、C. fumosorosea和Beauveria bassiana。7月菌株检出率最高(85株, 占总数的21.4%), 8月物种丰富度(15种)和多样性指数(2.35)最高。在5个优势种中, 只有Cordyceps cicadae受季节变化影响较大, 集中分布于5-9月, 7月分布最丰富(35株, 占该月菌株总数的41.2%); 其他4个种一年大部分时间(11或12个月)都能检测到。结果表明, 太保山森林公园子囊菌门虫生真菌资源丰富, 多数优势种对季节变化适应能力较强。     

生防真菌耐旱特性的生理生化基础及其利用

丝孢类生防真菌常需满足高湿度条件才能萌发和侵染害虫,已成为广泛应用真菌杀虫剂控制害虫的重要限制因素,适当的剂型化技术在一定程度上能够降低菌剂对环境湿度的依赖性,但生防真菌侵染体本身的耐旱性对菌剂的环境适应性起决定性作用,文中回顾和评述了近20多年来国际上生防真菌耐旱性研究与利用的主要进展,分析和总结了生防真菌耐旱性的生理生化基础及其水活度调控原理,讨论了提高低分子多元醇及海藻糖等生物学相容溶质在侵染体内积聚而增强菌剂耐旱性的可能途径．认为认识决定耐旱性的胞内相容溶质积累的分子生物学基础及其调控机理,探索建立从生理生化水平上最大限度地增强生防菌剂耐旱性的新工艺,是今后生防真菌基础与应用研究的重要方向。     

虫生真菌育种工作研究进展

虫生真菌在害虫的生物防治中有着极其重要的作用,在植物病害和杂草的生物防治、保健品、医药和化妆品等领域的开发应用上也具有很大的潜力.目前虫生真菌的育种工作主要采用自然选育、人工诱变、准性生殖、原生质体技术、基因工程技术等方法获得优良菌株.对虫生真菌的育种方法及其应用进展进行了综述,同时评述了各种育种方法的优缺点,分析了今后虫生真菌的育种方向.     

一种虫生真菌——棒束孢菌的初步研究

棒束孢属(Isaria)中的很多种,都是具有应用价值的虫生真菌。象小金棒束孢(Isaria kogane)日本长谷川等成功地将它用于田间金龟子幼虫的防治。近年来,我们从云尺蛾(Buzura thibetaria)等多种茶树害虫上分离到几株产生典型孢梗束的虫生真菌,经培养观察,鉴定为     

冬凌草内生细菌的分离鉴定及其对植物病害的生防作用

从冬凌草(Rabdosia rubescens (Hemsl.) H.Hara)中分离筛选出1株对多种作物真菌病害具有显著拮抗作用的细菌,命名为KD3.通过其形态特征和生理生化特性以及16S rRNA序列的同源性分析,鉴定该菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis).试验表明,KD3菌株能够显著抑制多种病原真菌的侵染,具有良好的应用开发潜力.     

广义虫草属二新记录种

【背景】广义虫草属是一类重要的虫生真菌资源。【目的】对我国西南地区虫生真菌及其相关真菌资源进行调查。【方法】在贵州省习水县和花溪区进行标本采集,采用含双抗的PDA培养基分离目的菌株;基于形态学特征和ITS rDNA序列系统发育分析相结合的方法进行菌株鉴定。【结果】从采集到的标本中分离获得5个菌株,菌株GY1113、GY90809和GY90810在形态特征上与马拉维白僵菌模式菌株非常相近;系统发育树中二者以高持率(ML/BI为99/1)聚成一个分支。菌株A1997在形态特征上与鳞翅目虫草模式菌株非常吻合;系统发育树中二者以较高支持率(ML/BI为78/0.95)聚成一个分支。菌株A1972在形态上与苏格兰白僵菌模式菌株的形态特征非常相近;系统发育树中二者以高支持率(ML/BI为99/1)聚成一个分支。因此分别鉴定为马拉维白僵菌、鳞翅目虫草及苏格兰白僵菌。【结论】马拉维白僵菌和鳞翅目虫草为中国新记录种。     

山西省虫生真菌生态多样性研究

为探讨山西省主要植被区的虫生真菌资源区系分布特点 ,于 1996～ 2 0 0 1年连续对山西省境内芦芽山、庞泉沟、蟒河 3个国家级保护区的虫生真菌进行了生态多样性研究。采集的 4 6 9份昆虫标本中有 2 76份分离出真菌 ,总检出率为 5 8.8%。根据菌落形态、营养体、孢子等特征将 12 4株虫生真菌初步鉴定到属 ,其中 110株已鉴定到种和专化型 ,共计 10属 2 5种。对各地区和各生境中真菌类群进行统计比较的结果表明 ,各保护区内虫生真菌物种资源都很丰富 ,广泛分布在不同的生境中 ,但具有明显的地域性分布特点。从菌株数量来看 ,从大到小依次为蟒河(45株 ) >庞泉沟 (40株 ) >芦芽山 (39株 ) ;从属的种类来看 ,蟒河地区 (10属 )标本中的类群略多于其他 2个自然保护区 ;但从属内种类多样性来看 ,蟒河 (18种 )明显比其他 2个自然保护区丰富。白僵菌 (Beauveriaspp .)、绿僵菌 (Metarhiziumspp .)等优势类群具有明显的垂直分布带谱和小生境分布特点 ,中等海拔区域 (10 0 0～ 2 0 0 0m)分离菌株数最多 ,占到 6 6 %以上 ,包含种类最丰富 ,几乎囊括了所有种类 ,混交林、阔叶林和溪边灌林中 ,虫生真菌种类丰富 ,分布均匀 ,尤以混交林中菌株最多 ,共 2 3株 ,占到 37% ,种类也最丰富 ,包含 8种     

壳聚糖酶的克隆表达与壳寡糖的制备分析

目的:克隆壳聚糖酶基因于大肠杆菌中实现高表达,制备壳寡糖。方法:以枯草芽孢杆菌总DNA为模板扩增壳聚糖酶基因(CSN),克隆至载体pET23a(+)上,转化菌株BL21(DE3)。重组子经0.5 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和质谱检测与鉴定重组酶。酶纯化后水解壳聚糖,薄层色谱分析其水解产物。结果:质谱证明壳聚糖酶(31.5kDa)成功表达,表达量占菌体总蛋白的45%左右。纯化后重组酶浓度为900 mg/L,纯度95%、回收率85%,酶活力为10 000 U/mg。壳聚糖降解产物为壳二糖至壳四糖。结论:原核表达载体pET23a(+)-CSN构建正确,壳聚糖酶表达量与活性高,适用于水解壳聚糖制备壳寡糖。     

国内外蝗害治理技术现状与展望

本文首先概述了国内外蝗虫发生与为害的态势,总结了现阶段我国蝗虫发生与为害的主要特点:即农田飞蝗暴发频繁而且严重,草原土蝗的发生时常造成严重的经济损失,而且侵入城市干扰市民生活,我国与周边国家之间蝗虫过境迁移频繁,使用化学农药污染环境和农产品;分析了国内外蝗虫防治对策与技术的发展现状,重点介绍了应急防治和可持续治理对策、...     

Synthesis and turnover of cerebrosides and phosphatidylserine of myelin and microsomal fractions of adult and developing rat brain.

The synthesis and turnover of cerebrosides and phospholipids was followed in microsomal and myelin fractions of developing and adult rat brains after an intracerebral injection of [U-14C]serine. The kinetics of incorporation of radioactivity into microsomal and myelin cerebrosides indicate the possibility of a precursor-product relationship between cerebrosides of these membranes. The specific radioactivity of myelin cerebrosides was corrected for the deposition of newly formed cerebrosides in myelin. Multiphasic curves were obtained for the decline in specific radioactivity of myelin and microsomal cerebrosides, suggesting different cerebroside pools in these membranes. The half-life of the fast turning-over pool of cerebrosides of myelin was 7 and 22 days for the developing and adult rat brain respectively. The half-life of the slowly turning-over pool of myelin cerebrosides was about 145 days for both groups of animals. The half-life of the rapidly turning-over microsomal cerebrosides was calculated to be 20 and 40 h for the developing and adult animals respectively. The half-life of the intermediate and slowly turning-over microsomal cerebrosides was 11 and 60 days respectively, for both groups of animals. The amount of incorporation of radioactivity into microsomal cerebrosides from L-serine was greatly decreased in the adult animals, and greater amounts of the precursor were directed towards the synthesis of phosphatidylserine. In the developing animals, considerable amounts of cerebrosides were synthesized from L-serine, besides phosphatidylserine. The time-course of incorporation indicated that a precursor-product relationship exists between microsomal and myelin phosphatidylserine. The half-life of microsomal phosphatidylserine was calculated to be about 8 h for the fast turning-over pool in both groups of animals.     

Identification and composition of the tonsillar and anal enterococcal and streptococcal flora of dogs and cats

Enterococcus faecalis was the most frequently isolated enterococcal species from anal swabs and tonsils of dogs and cats, although in the anal samples from dogs Ent. hirae was found almost as often as Ent. faecalis. Most Ent.faecium strains from dog tonsils differed from those associated with humans and other animals in that they fermented sorbitol. Typical Ent. avium as well as atypical Ent. avium -like strains were seen in dogs, while the related species Ent. raffinosus was associated with cat tonsils. Enterococcus cecorum also occurred mainly in cats. Certain atypical strains, presumptively identified as Ent. cecorum , shared characteristics with Ent. columbae.
The most frequent streptococcal species in tonsils of cats and dogs were Streptococcus suis and Strep. canis. Streptococcus canis and Strep. bovis predominated in anal swabs. The canine Strep. suis differed from the common porcine strains in fermenting mannitol.
Forty-seven of the 288 isolates examined could not be identified or related to known species. The characteristics of two groups of these bacteria, provisionally called 'Ton 31 group' and 'O7 group' are described.     

Molecular characterisation of species and genotypes of Cryptosporidium and Giardia and assessment of zoonotic transmission

The molecular characterisation of species and genotypes of Cryptosporidium and Giardia is essential for accurately identifying organisms and assessing zoonotic transmission. Results of recent molecular epidemiological studies strongly suggest that zoonotic transmission plays an important role in cryptosporidiosis epidemiology. In such cases the most prevalent zoonotic species is Cryptosporidium parvum. Genotyping and subtyping data suggest that zoonotic transmission is not as prevalent in the epidemiology of giardiasis. Molecular characterisation of Cryptosporidium and Giardia is a relatively recent application that is evolving as new genes are found that increase the accuracy of identification while discovering a greater diversity of species and yet unnamed taxa within these two important genera. As molecular data accumulate, our understanding of the role of zoonotic transmission in epidemiology and clinical manifestations is becoming clearer.     

白术同源四倍体的诱导和鉴定及其与二倍体过氧化物酶的比较

以白术（Atractylodes macrooephala Koidz.）二倍体组培苗为材料,对其四倍体诱导方法进行研究,共获得45个白术同源四倍体株系,为优良株系的选育提供了材料。此外,还分析比较了其中8个白术四倍体株系与二倍体的过氧化物酶同工酶（POD）的酶谱差异,发现四倍体各株系过氧化物酶同工酶谱比二倍体的均多了Rf0.310的谱带,且总过氧化物酶比活力也发生了很大改变,对探讨白术四倍体优良株系的生理生化机理具有一定的参考价值。