甜菜叶柄高效直接再生体系的建立

通过预试验,从4中不同基因型甜菜中选取KWS-9103作为试验材料,建立其叶柄高效直接再生体系。通过种植无菌苗、预培养、诱导分化培养,获得了再生植株,建立了甜菜快速繁殖体系。结果表明,甜菜种子经过消毒处理后培养,取幼苗在MS附加6-BA 0.5 mg/L和NAA 0.05 mg/L的培养基中预培养,再取叶柄作为外植体转入诱导培养基MS附加6-BA0.5 mg/L和NAA0.05 mg/L中诱导不定芽,不定芽诱导率为50%以上。在MS附加IBA2.0 mg/L生根培养基中生根,诱导生根率在90?以上,移栽成活率高达95%。     

李叶绣线菊叶片和叶柄再生体系的建立

1植物名称李叶绣线菊（Spiraea prunifolia Sieb．et Zucc．）。 2材料类别带叶柄的幼嫩叶片。     

圆叶葡萄'Alachua'叶柄再生体系的建立

以圆叶葡萄'Alachua'的叶柄为外植体,通过对基本培养基、激素种类及浓度组合的筛选,研究圆叶葡萄Alachua再生体系的建立.结果表明:以B5 2.0 mg/L BA 0.5 mg/L 2,4-D诱导叶柄形成愈伤组织效果较好,叶柄诱导率达86%;再分化培养基以B5 4.0 mg/L TDZ效果较好,达到19.32%;诱导生根以培养基WPM 0.1mg/L IBA的效果较好,生根率达90%.移栽至珍珠岩与营养土(3∶1)的混合基质中,成活率达93%.     

甘蓝型油菜叶柄原生质体培养再生植株

Two cultivars of Brassica napus,Altex and Canadian twins,were used as materials.Protoplasts isolated from petioles of plants grown in vitro were cultured in Nitsch mediumsupplemented with 0.5mg/L BA,0.5mg/L NAA,1mg/L 2,4-D,100mg/L serine,800mg/Lglutamine,4% sucrose and 0.4mol/L mannitol.After 2 days of culture,the first division wasobserved.The division frequency estimated after 10 days of culture was 30—60%.One weekafter transferring onto MS medium containing 6mg/L GA_3 and 3mg/L BA,protoplast-derivedcalli regenerated into shoots.The regeneration frequency of the two cultivars was 24% and31% respectively.It was found that the protoplasts isolated from petioles could float on thesurface of the 3% sucrose contained solution which was very favourable both to purificationand culture of the protoplasts.     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT2.0 mg/L+ IAA0.5mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化.结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4％.分化后得到的不定芽在含NAA0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基上生根率达90％,移栽存活率为95％.     

诸葛菜叶柄原生质体培养再生植株

本文首次报道用诸葛菜(Orychophragmus violaceus)试管苗叶牺为材料分离原生质体,经培养再生了植株。用于原生质体培养的基本培养基为Nitsch培养基,附加1OOmg／L丝氨酸,800mg／L谷氨酰胺和13％的蔗糖,激素成分为0.5mg／L BA,0．5mg／L NAA和lmg／L2,4一D(或0．5mg／L BA和2mg／L 2,4-D)。原生质体的培养密度为2×10⁵／ml。培葬7天的原生质体分裂频率约为40％。在附加O．05mg／L NAA和3mg／L BA的MS分化培养基上,愈伤组织可分化出大量的芽和苗,分化频率为100％。     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件。以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的激素组合对不定芽分化最有利。在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化。结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15 d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4%。分化后得到的不定芽在含NAA 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的 1/2MS培养基上生根率达90%,移栽存活率为95%。     

中林美荷杨叶柄的组织培养及植株再生

1植物名称中林美荷杨(Popuuls sp.). 2材料类别当年生嫩枝叶柄. 3培养条件分化培养基:(1)MS 6-BA 0.4 mg·L-1(单位下同);(2)MS 6-BA 0.4 NAA 0.05.壮苗培养基:(3)MS 6-BA 0.2 NAA 0.1 GA 0.2.生根培养基:(4)1/2MS IBA 0.2;(5)1/2MS IAA1.0.以上除生根培养基外均加入蔗糖3.0%,生根培养基加蔗糖1.5%和琼脂0.7%,pH 5.8～6.0.培养温度26～28℃,光照时间16 h·d-1,光照度1 600lx.     

绿巨人叶柄离体培养及植株再生

在MS基本培养基中添加不同植物生长调节剂(mg/L)对绿巨人无菌苗的叶柄进行离体培养,结果表明,MS+6-BA 1.0+NAA 2.0+2,4-D 1.0诱导效果最好,产生愈伤组织并分化出丛芽;MS+6-BA 2.0~3.0+NAA 0.2+0.2% PVP对芽的增殖效果好;附加0.2%PVP对防止褐变有一定效果;生根培养基选用1/2MS+NAA 0.1~0.5+IBA 1.0的组合。     

樱桃砧木叶片和叶柄再生体系的构建

以樱桃的两个砧木品种大青叶和大叶的组培苗为试材,通过5个激素因子的正交试验设计,建立了叶圆盘和叶柄片段的再生体系,研究出最佳愈伤组织形成和根苗分化的培养基,以提高组培快繁系数,并为基础转化提供技术保证。     

南瓜高效再生体系的建立

南瓜(Cucurbita moschata)再生率较低, 为建立高效的南瓜再生体系, 以南瓜子叶为外植体, 进行35组不同激素浓度的不定芽诱导研究。结果表明, 南瓜再生受培养基中激素浓度和配比的影响, 适宜浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)能有效促进不定芽形成; 单独使用脱落酸(ABA)诱导使南瓜子叶发黄, 但与6-BA组合使用可显著提高外植体的再生能力, 1.0 mg?L ^-16-BA与0.5 mg?L ^-1ABA组合南瓜芽再生率高达90.26%。将不定芽置于MS培养基中进行生根培养, 再生苗移栽易成活。从子叶接种到苗再生约需70天。     

油桐叶片愈伤组织诱导及植株再生

以油桐无菌苗叶片为试材,研究不同种类及浓度的植物生长调节剂对愈伤组织诱导、分化、增殖及生根的影响。结果表明：叶片愈伤组织的最佳诱导培养基为1／2MS＋2．omg·L-16-BA＋1．0mg·L～2,4-D,诱导率达100％;最佳分化培养基为1／2MS＋3．0mg·L～6-BA＋0．1mg·L-1。IBA＋0．05mg·L—IAA,分化率为86．36％;最佳继代增殖培养基MS＋3．0mg·L～6-BA＋0．05mg·L。IBA;最佳生根培养基为1／2MS＋O．1mg·L-1。IBA,生根率93．83％。炼苗后移栽到泥炭土：珍珠岩：蛭石=2：1：1的基质中,成活率达92％以上。     

南瓜高效再生体系的建立

南瓜(Cucurbita moschata)再生率较低, 为建立高效的南瓜再生体系, 以南瓜子叶为外植体, 进行35组不同激素浓度的不定芽诱导研究。结果表明, 南瓜再生受培养基中激素浓度和配比的影响, 适宜浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)能有效促进不定芽形成; 单独使用脱落酸(ABA)诱导使南瓜子叶发黄, 但与6-BA组合使用可显著提高外植体的再生能力, 1.0 mg∙L ^-16-BA与0.5 mg∙L ^-1ABA组合南瓜芽再生率高达90.26%。将不定芽置于MS培养基中进行生根培养, 再生苗移栽易成活。从子叶接种到苗再生约需70天。     

梨叶柄再生不定芽的研究

研究获得了梨品种八月红和水晶的叶柄再生不定芽,不定芽由愈伤组织分化形成。诱导叶柄再生不定芽的适宜培养基为NN69＋IBA0.5mg/L（八月红）或IAA0.5mg/L(水晶）＋TDZ1.0mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂6.0g.。AgNO3浓度在0.1-1.5mg/L范围对八月红梨叶柄再生有促进作用,培养基中附加AgNO30.5mg/L八月红梨叶柄再生效率最高。     

马铃薯叶片高效再生体系的建立

以4个马铃薯栽培品种为试材,进行了叶片离体再生研究,结果表明:东农303、鄂1号叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA2.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1;费乌瑞它为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1;夏波帝为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,愈伤组织的诱导率均可达100%.诱导不定芽分化的最佳培养基分别是:费乌瑞它、鄂1号为MS+6-BA2.5mg·L-1+GA35.0mg·L-1;东农303为MS+6-BA1.0mg·L-1+IAA0.1mg·L-1+GA32.5mg·L-1;夏波帝为MS+6-BA2.5mg·L-1+IAA0.5mg·L-1+GA32.5mg·L-1,其不定芽分化率分别达94.3%、100%、100%和90%.     

猕猴桃高频直接再生体系的建立

为了建立猕猴桃高频再生体系,以MS为基本培养基,猕猴桃(Actinidia deliciosaQinmei)茎及叶片为外植体,研究了2,4-D、6-BA和NAA在美味猕猴桃愈伤组织形成及分化过程中的作用。方差分析结果表明,6-BA能够显著促进愈伤组织形成,6-BA和NAA可以显著促进愈伤组织形成和分化,而2,4-D抑制愈伤组织形成。附加2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L NAA和600 mg/L水解酪蛋白的MS培养基是茎段培养的最佳培养基,在该培养基上,以再生的无菌苗为起始材料,一个月时叶圆盘的直接再生频率达到100%,平均每个叶圆盘产生9.33个芽,其中23.21%芽高度超过0.5 cm。     

高效诱导甜菜再生植株的研究

研究了栽培甜菜(Beta vulgaris L.)4倍体品系405叶柄外植体的离体培养。成功地建立了一套高频率诱导再生芽的程序。外植体取自生长在改良MS(MSB)附加BA和NAA或者单加BA的培养基中。经过30d以上预培养后的幼苗叶柄,在MS附加BA 1．0mg／L或NAA0．3mg／L,Bal．0mg／L培养基上直接诱导再生芽,并发育成苗．诱导频率最高可达51．3％。在1／2MS(MS培养基大量元素减半)附加NAA0．5～1．0mg／L的培养基上诱导生根．这一程序为甜菜扩大繁殖和遗传转化提供了一个良好的试验系统。     

‘贵长’猕猴桃叶片高效直接再生体系的建立 *

以‘贵长’猕猴桃叶片为外植体,直接脱分化产生不定芽,并对不定芽增殖以及生根体系进行优化,建立了其高效直接再生体系。结果表明,叶片在MS+4. 0mg/L 6-BA+0. 4mg/L NAA培养基中,不定芽诱导率达95. 8%,平均出芽数达15. 7个/叶片;不定芽在MS+3. 0mg/L 6-BA+0. 3mg/L NAA+0. 2mg/L GA3培养基中,增殖率达100%,且1～6代平均繁殖系数达8. 15;不定芽先在添加1. 0mg/L IBA的1/2 MS固体培养基中诱导7d,然后再先后在1/2 MS固体培养基和充分吸附1/2 MS培养液的珍珠岩中各培养14d,生根率达98. 61%,且根系发育良好; 50株试管苗移栽到以珍珠岩和田间土壤(其体积比为1∶4)为基质的营养钵中,2周后成活49株,成活率达98%。该研究成功建立了‘贵长’猕猴桃叶片高效再生体系,该方法不定芽诱导周期短,出芽率高且数目多,不定芽增殖系数大,生根率高且试管苗根系发达,为‘贵长’猕猴桃离体快速繁殖和遗传转化奠定了基础。     

玉米幼胚高效再生系统的建立

建立了玉米幼胚高效再生系统。经研究发现,苏玉1号、农大3138、农大108的幼胚培养在含有2,4－D（2.5mg/L）的IM培养基上后,大多数幼胚能愈伤化并增大,形成基部相连、上部分开的微芽结构;微芽结构在转移到BM培养基上后,形成小植株;进一步转移到RM培养基上,它们长根并形成完整杆株。玉米幼胚高效再生植株与下列因素有关：玉米基因型、幼胚大小、幼胚长芽至分化时间、6－BA、IBA、Gelrite。不同品种玉米再生能力有显著差异,幼胚大小在1－2mm之间再生能力强,幼胚长芽至分化时间4－6d最好。激素6－BA浓度在0.5-0.6mg/L之间有利于微芽形成小植株,IBA浓度在0.6-1.0mg/L促进生根。Gelirte可代替琼脂粉用于玉米生根。     

陆地棉子叶节高效再生体系的建立

对3个陆地棉材料子叶节进行离体培养,建立了高效的再生体系.其中,启动培养基为MSB+2.5 mg/L 6-BA +2.5 mg/LKT,芽分化培养基为MSB+0.3 mg/L 6-BA +0.3 mg/LKT,通过器官发生途径诱导形成丛生芽,芽伸长培养基MSB.以上培养基均含葡萄糖糖30 mg/L.此再生体系每个外植体可获得2.75个以上不定芽,嫁接移栽驯化后,成活率接近95%.