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免疫组织化学中抗原修复的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
组织中抗原性的妥善保存和抗原修复技术与免疫组织化学染色的成败有着十分密切的关系 ,因此如何妥善保存抗原以达到最大限度保留组织的抗原性及如何对抗原加以修复成为做好免疫组化染色的重要步骤。免疫组织化学 (immuno histochemistry) ,简称免疫组化 ,是免疫学与分子生物学技术和形态学相结合的一门学科 ,是用已知抗体 (或抗原 )检测组织细胞中的未知抗原 (或抗体 )的技术 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等优点 ,已广泛用于病理诊断、鉴别诊断及胚胎发育、神经解剖等相关学科的研究。大量实践证明组织中抗原性的… 相似文献
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抗原修复技术在免疫组织化学中的作用 总被引:11,自引:1,他引:10
免疫组织化学是一门免疫学与病理形态学相结合的新兴学科 ,是现代生物医学的一项重要方法学 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等特点 ,已经广泛应用于临床病理及其相关学科的研究之中 [1,2 ] 。目前采用甲醛为常规标本固定剂 ,醛基与组织蛋白质中的氨基形成交联使抗原决定簇被遮蔽 ,从而影响免疫组织化学结果 ,而且这种作用随着固定时间增长而加重 [3 ]。抗原修复技术的出现 ,使得原来许多只能在冰冻切片作免疫组织化学得以在石蜡切片上实现 ,抗原修复技术在免疫组织化学中的作用愈加明显 ,并且对免疫组织化学方法的敏感性起着决定性作用[… 相似文献
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目的 采用3种不同的抗原修复条件对肠癌错配修复(mismatch repair MMR)蛋白进行免疫组织化学染色,从而找到适合本科室的最佳修复条件.方法 回顾性分析近两年工作中遇到的肠癌病例,从中抽取50例,分别进行柠檬酸缓冲液高温高压修复、EDTA缓冲液高温高压修复和CC1缓冲液BenchMark XT机器修复后染色... 相似文献
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不同的抗原修复方法和染色条件对P53蛋白免疫组织化学方法结果的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中P53 基因蛋白产物的表达 ,是探讨P53 基因与多种肿瘤的相关性研究的主要手段之一。在免疫组织化学检测中 ,不同的抗原修复方法对P53 蛋白检测结果的阳性率和染色强度有不同的影响。本文在免疫组织化学检测P53 蛋白时对不同的抗原修复方法和染色条件进行了探讨 ,摸索出能较佳地显示P53 蛋白的免疫组织化学方法条件。介绍如下 :1.材料和方法1 1材料 :经临床病理诊断为恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和大肠癌等福尔马林固定、石蜡包埋的组织 ;单克隆抗体P53 DO - 7和LSAB试剂盒为DAK… 相似文献
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微波处理修复抗原后免疫组织化学方法效果的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
冰冻切片经微波处理进行抗原修复后,免疫组织化学方法的敏感性明显提高,显色效果明显增强。提出了冰冻切片在免疫组织化学显色前进行抗原修复的必要性 相似文献
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各种癌基因蛋白微波抗原修复免疫组织化学检测的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究对1555例各种肿瘤组织标本进行微波辐射(MWI)抗原修复免疫组织化学染色,检测了14种癌基因蛋白产物.并同时选择部分标本分别作冰冻切片,常规石蜡切片进行抗原修复与不修复的对比研究.结果,经MWI抗原修复后p53(PAb1801,PAb-240,PAb-420,DO-7),p185,Rb,C-fos,C-myc,Ki-67(R),EGF,EGFr,TGFβ和Bcl-2阳性检测率明显提高(P≤0 05),而p53(CM-1),PcNA p21和nm23/NDPK经MWI抗原修复与不修复结果一致,说明有部分抗原不用修复和其他处理.另一部分抗原仅表达在冰冻切片上,如Ki-67和Ki-1单克隆抗体,经修复也无阳性表达.本文中对消化、消化与抗原修复相结合及高压处理切片的IH染色也进行了对比研究,对他们处理切片存在的优缺点也一一作了详说. 相似文献
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许多研究已证实 ,人类乳头状病毒 (HPV)与宫颈癌及癌前病变有关。通过DNA序列分析鉴定 ,感染人子宫颈的HPV亚型有 6、 11、 16、 18、 31、 33、 35、 39和 42 ,其中 6和 11亚型与宫颈尖锐湿疣发病有关 ,16和 18亚型与宫颈癌关系最密切。通常检查的方法是免疫组化法、聚合酶链反应(PCR)和HPV -DNA原位杂交法。由于免疫组化方法较其他两种方法简单易行 ,因此在日常工作中得到广泛应用 ,但常规石蜡切片法抗原易受固定液的影响 ,用免疫组化法检查时必须通过抗原修复技术方能达到满意的结果。为了提高HPV免疫组化法的诊断… 相似文献
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有关抗原修复若干问题的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
在免疫组织化学反应过程中 ,组织由于固定等方面的问题常导致表达不佳 ,或者假性。为了解决这些问题 ,需要做抗原修复。目前抗原修复的方法较多 ,有真空负压抗原修复法 ,微波辐射抗原修复法 ,高压抗原修复法 ,隔水热抗原修复法和电炉加热抗原修复法。本文根据上述各种方法 ,在实际操作中常可发生的一些问题如 p H的应用范围的选择 ;抗原修复最佳温度的选择 ;有效温度所需要持续的时间 ;抗原修复液必须遵循自然降温的规律 ,否则将达不到抗原修复的目的 ;尽量使用足量的抗原修复液 ;切片必须附贴牢固等。并详细介绍了各种方法的使用过程。在… 相似文献
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DNA染色与免疫组织化学双重染色技术 总被引:1,自引:0,他引:1
随着计算机技术的普及和图象定量分析方法的发展 ,病理学已经开始应用计算机图象分析技术来定量研究有关病变形态结构特点 ,探讨其在诊断、分型、分类、预后判断中的应用等问题。我们采用Feulgen Rossenbeck改良DNA染色法[1] 和免疫组织化学EnVision法结合的双重染色方法 ,在石蜡切片中同时显示乳腺癌细胞DNA和癌基因CerbB 2的蛋白表达产物 ,该法对应用病理学图象分析技术研究肿瘤细胞DNA及癌基因蛋白的表达及其两者关系提供了一种简便、准确的方法。1 材料和方法1 1 材料 :取自本科室乳腺癌标本 ,标本经10 %中性福尔马林固定 ,常规… 相似文献
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免疫组织化学染色定量方法研究(Ⅲ) 总被引:205,自引:2,他引:205
申洪 《中国组织化学与细胞化学杂志》1995,(1)
本文对免疫组织化学染色反应的定量方法进行了研究,导出阳性单位(PU)测算新公式。根据测试区域A的灰度级GA和面积(m+n)及阳性反应产物α相的灰度级Gα和面积n(或背景面积m)即可求得PU。公式如下:PU=100×|Gα-GA|/(AAβ·Gmax)=100×|Gα-GA|/[(1-AAα)·max]。式中AAα=n/(m+n),AAβ=m/(m+n),Gmax为测试仪器的最大灰度分级。本法灰度测试无需考虑灰度设定方法,只需在同一灰度设定条件下测试即可。本法还可用于其它组织化学、细胞化学和原位分子杂交反应显色程度定量。 相似文献
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为了进一步提高免疫组织化学技术在检测结核杆菌感染的组织中免疫牛型分枝杆菌 (BCG)抗原的表达 ,我们收集了2 0例结核病变的组织标本。用不同的抗原修复方法比较和摸索 ,并采用抗酸染色做对照 ,比较抗酸与BCG的结果及如何制作出较令人满意的免疫组织化学染色结果得出一点体会 :1 材料和方法1 1 病例 :收集我院手术切除的经病理组织学确诊的结核病变标本 2 0例 ,均经 10 %福尔马林液固定 ,石蜡包埋的组织标本。1 2 使用DAKO ,EnvisonSystem二步法试剂盒 ,兔抗牛型分支杆菌 (BCG)多克隆抗体。1 3 不同的抗原修… 相似文献
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探讨En Vision与特异性抗体复合一步法免疫组织化学标记的可行性及其应用效果。筛选适合于该法的特异性抗体。利用辣根过氧化物酶标记的第二抗体(En Vision)分别与72种单克隆和多克隆特异性抗体混合配制成即用型试剂,将两步标记法变为快速微波一步法,并对2100余例各种良性和亚性肿瘤的免疫组化标记结果进行观察和分析。结果显示绝大发特异性抗体的特异性和敏感性与标准En Vision法相似,其中46种特异性抗体结果稳定,重复性佳;14种特异必抗体稳定性欠佳,但临用前新配制效果仍较理想;12种不理想,不主张用于此法,结果表明En Vision与特异性抗体复合免疫组化一步法是一种有效、快速、简便的免疫组化染色技术。适用于临床病理快速免疫组化诊断,但对所用的特异性抗体应注意选择。 相似文献
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目的:探索一种简单有效的行BrdU免疫组织化学染色抗原热修复的方法。方法:本实验探索了三种抗原热修复方法:1)漂片煮沸法,2)贴片煮沸法,3)贴片改良法。将贴有冰冻组织切片的玻片置于恒温封闭体系中进行热修复。之后行BrdU免疫组化染色,栗集图像对这三种热修复方法进行比较。针对贴片改良法行BrdU与NeuN、P。CERB和DCX的荧光双标,采集图像以观察该方法在免疫荧光甄标实验中应用的可行性。结果:1)漂片煮沸法脑组织切片在经过热修复处理后,切片卷起皱缩,不能进行后续实验步骤;2)贴片煮沸法可见少量BrdU阳性细胞,但背景深,且少数脑片起泡,假阳性现象严重;3)贴片改良法B-U免疫组化及与NeuN、P-CERB和DCX的免疫荧光双标染色背景浅,阳性细胞明显。结论:采用改良的热修复法能充分暴露BrdU抗原,DAB显色及免疫荧光染色结果理想。此方法为一种较好的行BrdU免疫组织化学染色抗原热修复方法。 相似文献
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突触后成分的受体分子通过免疫组织化学技术进行检测有一定的技术困难,NMDAR2A就属于这类受体分子,用石蜡切片进行免疫组织化学必须结合高灵敏、高稳定性的抗原修复手段才能获得满意的结果。在过去的实验中常用pH6.0的枸橼酸缓冲液完成抗原修复,能观察到明确的细胞质阳性的神经元。 相似文献
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乙型肝炎病毒相关肾小球肾炎(HBVAssciated Glomerulne phvitis),简称乙肝性肾炎,临床上常要求对肾穿刺乙肝肾患者的标本做乙肝表面抗原(HBsAg),乙肝核心抗原(HBcAg)或乙肝e抗原(HBeAg)检测。然而不同的抗原修复方法对肾穿组织石蜡切片HBsAg、 相似文献
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目的观察不同抗原修复方法及修复液对COX-2抗原表达的影响及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法用光波/微波、高压锅结合枸椽酸缓冲液、EDTA作抗原修复处理,分别用即用型和浓缩型COX-2单克隆抗体对70例乳腺癌石蜡切片进行免疫组织化学染色。结果①光波/微波组合-EDTA、CA修复浓缩型COX-2的阳性率均比即用型COX-2的阳性率高(P0.01)。②高压锅抗原修复处理切片的免疫组化染色阳性率略比光波/微波的免疫组化染色阳性率高,但无统计学意义(P0.05);高压锅抗原修复处理的切片组织结构破坏程度和掉片情况均比光波/微波处理的重;③EDTA修复处理切片的免疫组化染色阳性率明显比用CA修复处理切片的免疫组化染色阳性率高(P0.01)。④COX-2表达水平与淋巴结转移有显著关系(χ2=5.24,P0.05);与年龄、肿瘤大小、组织学类型和分级之间无明显关系(P0.05)。结论用光波/微波-EDTA修复COX-2抗原,浓缩型COX-2抗体标记可明显提高免疫组织化学染色的敏感性,具有定位准确、阳性率高、操作简单、安全、组织结构保存好、不易掉片等优点;COX-2的表达与淋巴结转移显著相关,可作为乳腺癌的预后指标。 相似文献
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本研究采用免疫组织细胞化学ABC法对62例大肠癌区、癌移行区及癌旁区组织内P53和PCNA蛋白进行检测。结果表明,P53蛋白在大肠癌区阳性率占61.3%(38/62)、PCNA蛋白阳性率占71.0%(44/62)、阳性结果均位于癌细胞核内,P53蛋白阳性的癌细胞,少部分为核浆型。P53及PCNA蛋白联合表达与大肠癌发生及发展相关密切,并互相协同致癌,对大肠癌分化程度和Dukes分期影响较大,为大肠癌病变研究提供了分子生物学信息,对手术切除缘范围和评估大肠癌转移和预后有一定参考价值。 相似文献
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免疫组织化学染色技术EV二步法和LSAB法的应用比较 总被引:2,自引:0,他引:2
将目前广泛使用的 L SAB法和 EV二步法进行应用比较 ,经反复实验后发现这两种方法有许多共同点 ,也有各自的优点。切片经 DAB显色后 ,颜色鲜艳呈棕黄色 ,二者没有差别 ;背景清晰干净 ,无非特异性染色 ,阳性物明显易辨 ,二者没有明显区分 ;对于强、中、弱反应的病例 ,二者的敏感性不分上下 ;阳性物的定位和定性以及试剂使用的便利性 ,二者都一样。在时间使用上 ,EV二步法至少要少 30分钟 ,在步骤上前者比后者少两个步骤 ,EV法比 L SAB法每例的试剂花费要高出 1.5元。在进行常规免疫组化染色的时候 ,首先要决定用什么方法来进行染色 ,… 相似文献