凋亡细胞的超微结构变化

细胞凋亡可用多种方法进行检测,但对其形态学特征的透射电镜观察是确定细胞凋亡的最可靠的方法。动植物细胞凋亡的形态学特征基本相似,细胞凋亡过程中突出的超微结构变化为细胞核染色质凝集成团块状或染色质边集,细胞质显空泡化,凋亡细胞发生碎裂,形成凋亡小体,同时伴有细胞器的改变。     

复方奥硝唑- 甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞凋亡及超微结构的影响

目的:观察不同浓度复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞(HPDLC)凋亡与超微结构的影响。方法:用含有不同浓度复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂(0、1.25、2.5、5、10、20g/L)的培养液对人牙周膜细胞进行培养,流式细胞术检测细胞凋亡指数;透射电镜下观察HPDLC超微结构的改变。结果:在1.25、2.5 g/L的浓度下对HPDLC的凋亡率和超微结构均与对照组无显著性差异;而5、10 g/L的浓度组的细胞凋亡率较对照组小且超微结构显示细胞胞质内粗面内质网和线粒体增多,细胞突起增多;而在高浓度药物20 g/L的作用下,凋亡率有所增加,细胞发生退变,溶酶体增多。结论:5、10 g/L的复方奥硝唑甲磺酸培氟沙星缓释制剂对体外培养的HPDLC的生长有一定促进作用,高浓度药物20g/L则对HPDLC生长有一定的抑制作用。     

复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞凋亡及超微结构的影响

目的：观察不同浓度复方奥硝唑．甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞（HPDLC）凋亡与超微结构的影响。方法：用含有不同浓度复方奥硝唑一甲磺酸培氟沙星缓释制剂（0、1．25、2．5、5、10、20g／L）的培养液对人牙周膜细胞进行培养,流式细胞术检测细胞凋亡指数;透射电镜下观察HPDLC超微结构的改变。结果：在1．25、2．5gm的浓度下对HPDLC的凋亡率和超微结构均与对照组无显著性差异;而5、10g/L的浓度组的细胞凋亡率较对照组小且超微结构显示细胞胞质内粗面内质网和线粒体增多,细胞突起增多;而在高浓度药物20g/L的作用下,凋亡率有所增加,细胞发生退变,溶酶体增多。结论：5、10g／L的复方奥硝唑甲磺酸培氟沙星缓释制荆对体外培养的HPDLC的生长有一定促进作用。高浓度药物20g/L则对HPDLC生长有一定的抑制作用．     

硒对氧化应激诱导的胎盘滋养层细胞增殖与凋亡的影响

摘要 目的：检测硒（NaSe）对CoCl₂氧化应激诱导人胎盘滋养层细胞(JEG-3) 增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法：体外培养JEG-3 细胞,在加入CoCl₂（500 μM）氧化应激诱导前先加入NaSe(100nM) 预处理24小时,MTT 实验检测硒对氧化应激JEG-3的增殖促进作用; 利用细胞流式术（FCM）检测硒对氧化应激JEG-3细胞凋亡的影响;用Western blot检测硒影响氧化应激JEG-3细胞增殖与凋亡的可能分子生物学机制。结果：MTT 提示硒能够增加氧化应激诱导的JEG-3细胞的增殖活性(P＜0.05) ,降低氧化应激JEG-3细胞凋亡率(P＜0.01) ,同时硒蛋白Gpx1表达上调(P＜0.05) ,脂质过氧化物MDA表达下降（P＜0.05）。结论：硒通过上调硒蛋白Gpx1 表达,降低脂质过氧化物MDA表达,进而降低氧化应激JEG-3细胞凋亡率而发挥其促进增殖活性,提示硒的补充对子痫前期的预防和治疗具有重要的意义。     

亚硒酸钠诱导SW480细胞凋亡过程中活性氧的作用

为探讨亚硒酸钠诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的机理,将荧光探针2′,7′－二氯荧光黄乙二脂（2′,7′－DCFH－DA）、罗丹明123（rhodamine123）负载人结肠癌细胞,利用多光子成像系统测定胞内活性氧（ROS）、线粒体跨膜电位（△Ψm）的变化。结果发现（1）Na2SeO3作用SW480细胞,可导致细胞凋亡和胞内的ROS增加。SOD、过氧化氢酶可降低凋亡率并抑制ROS的增加。（2）线粒体电子传递链抑制剂鲁藤酮及氰化钠可抑制OS增加。（3）Na2SeO3可导致线粒体的跨膜电位的下降。表明Na2SeO3作用细胞可导致来源于线粒体的ROS增加,ROS介导亚硒酸钠诱导细胞凋亡。     

低温对紫外照射诱导人乳腺癌细胞凋亡的影响

采用Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８荧光染色技术,透射电镜,流式细胞术研究低温对紫外照射诱导体外培养的人乳腺癌细胞凋亡的影响。结果显示：４℃低温处理可增强紫外照射诱导人乳腺癌细胞凋亡,且低温增强细胞凋亡具有时间效应和剂量效应关系。细胞经４℃处理０,１２,２４ｈ并照射６ｍｉｎ,在培养６ｈ后各实验组细胞的调亡率开始升高,与培养０ｈ时相比差异显著（Ｐ〈０．０１）,培养１２￣１８ｈ时达到高峰（１５．４６－６４．     

硒代硫酸钠诱导HL60细胞凋亡——还原态硒的细胞毒性(英文)

细胞毒性研究认为Cd2+的释放是硒化镉(CdSe)纳米粒子的细胞毒性机制之一,而Se2-阴离子在纳米粒子中的毒性机制未知。作者研究了硒代硫酸钠(selenosulfate(SSeO3)2-)对HL60细胞的细胞毒性作用,发现10μmol/L的硒代硫酸钠可以显著抑制细胞活力,诱导细胞凋亡,出现了染色质凝聚、DNA ladder和G0/G1凋亡亚峰。线粒体膜电位显著降低的同时,促凋亡蛋白Bax的免疫荧光增加。结果表明还原态的Se2-阴离子有显著的细胞毒性作用,可以诱导HL60细胞凋亡。同时也暗示Se2-阴离子的释放可能是含Se2-纳米粒子(比如硒化镉的量子点)细胞毒性的机制之一。     

天然提取物诱导人HepG2 细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是机体维持内环境稳定,更好的适应生存环境采取的一种死亡过程。细胞凋亡异常与肿瘤的发生、发展存在密切的关系。细胞凋亡的信号途径主要有死亡受体介导的外源性通路、线粒体介导内源性通路、内质网信号通路及MAPK信号通路。通过作用于凋亡信号通路上一些关键基因,诱导肿瘤细胞凋亡被认为是临床抗肿瘤治疗最有成效的治疗方法之一。研究已证实多种天然提取物作用于凋亡信号途径中一些重要因子可诱导细胞凋亡,并取得较好的抑制肿瘤增殖的效果。本文是关于细胞凋亡机制及各种天然提取物作用于凋亡通路上主要基因进行抗肿瘤治疗研究进展的综述。     

硒对肝癌细胞凋亡作用的研究

在小鼠右腋皮下接种Ｈ２２肿瘤细胞悬液,灌服含硒液（硒酸酯多糖）有抑制皮下肿瘤块生长的作用,在人肝癌细胞株培养液中,加入一定浓度含硒液（２０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、１５０μｇ／ｍｌ）,能抑制肝癌细胞增殖,并促使细胞凋亡。与此同时,小鼠血液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性提高,血浆和细胞培养液中ＮＯ含量升高。探讨硒酸脂多糖引起肝癌细胞凋亡,可能与使抗氧化活性提高、阻遏自由基对癌细胞增殖的介导及促使ＮＯ释放增加有关。     

The Decrease of Relative Weight,Lesions, and Apoptosis of Bursa of Fabricius Induced by Excess Dietary Selenium in Chickens

Selenium is an essential trace element possessing immune-stimulatory properties. The purpose of this 42-day study was to investigate the effects of excess dietary sodium selenite on immune function by determining morphological changes and apoptosis of bursa of Fabricius. Three hundred 1-day-old Avian broilers were fed on a basic diet (0.2 ppm selenium) or the same diet amended to contain 1, 5, 10, and 15 ppm selenium supplied as sodium selenite (n = 60/group). Relative weight of bursa was significantly decreased in the 1, 5, 10, and 15 ppm groups at 28 days of age, when compared with that of 0.2 ppm group. Pathological lesions were progressed with the dietary Se level increased. The gross lesions of bursa involved obvious atrophy with decreased volume and pale color. Histopathologically, decreased number of lymphocytes and loosely packed lymphocytes appeared in the medulla and cortex in the follicles. Ultrastructurally, mitochondria injury and increased apoptotic cells with condensed nuclei were observed. In comparison to that of control group, excess Se (5, 10, and 15 ppm) intake increased the percentage of Annexin V positive cells, as measured by flow cytometry. Terminal deoxynucleotidyl transferase 2′-deoxyuridine 5′-triphosphate nick end-labeling assay showed that there were increased frequencies of apoptotic cells in 10 and 15 ppm selenium groups. These data suggest that Se supplementation with sodium selenite should be carefully evaluated as excess selenium (more than 5 ppm) intake could cause profound immunologic inhibition.     

砷暴露诱导人肝细胞氧化应激过程中NADPH氧化酶作用机制

目的：探讨砷暴露诱导细胞氧化应激的分子机制。方法：采用人正常肝细胞进行亚砷酸钠和砷酸钠的暴露处理,并设相应对照组,采用SOD模拟物MnTMPyP和还原型谷胱甘肽（reducedglutathione,GSH）预处理,检测细胞超氧阴离子（02。）和细胞整体ROS的水平。WestemBlot方法检测细胞氧化／抗氧化重要酶微粒体谷胱甘肽硫转移酶（microsomalglutathioneS-transferase-l,Mgst．1）、半胱氨酸双加氧酶l（cysteinedioxygenasel,Cd01）和NADPH氧化酶的催化亚基NOX4的表达。针对NADPH氧化酶,采用特异性抑制剂（diphenyleneiodoniumchloride,DPI）进行预处理,观察对砷暴露引起的细胞ROS水平及细胞凋亡的影响。结果：砷暴露能够显著诱导细胞超氧阴离子的产生,提高细胞整体ROS水平,其中三价砷（亚砷酸钠,A矿）诱导氧化应激作用显著强于五价砷（砷酸钠,As5＋）。亚砷酸钠能够显著提高NOX4的表达。针对NADPH氧化酶的抑制剂DPI能够显著抑制砷暴露引起的细胞ROS水平升高以及细胞凋亡的增加。结论：NADPH氧化酶是砷暴露诱导人肝细胞的作用靶点,砷能够通过NADPH氧化酶产生大量超氧阴离子,提高ROS水平,造成氧化应激,诱导人正常肝细胞凋亡。     

靶向survivin基因的siRNA对姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的影响

目的:研究靶向survivin基因的siRNA对胃癌细胞,survivin表达的影响,抑制survivin基因表达对姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的影响。方法:通过脂质体将survivinsiRNA导入胃癌细胞株BGC-803,用Real-timePCR和Western-blotting检测转染后细胞内survivin基因表达水平,流式细胞仪和Hochest染色检测细胞凋亡的改变。结果:姜黄素可抑制BGC-803细胞的生长,其生长抑制率和药物浓度与作用时间呈依赖关系;姜黄素作用BGC-803细胞后,survivin蛋白和mRNA表达降低;通过转染survivinsiRNA抑制BGC-803细胞survivin基因的表达能促进姜黄素诱导BGC-803细胞凋亡的作用。结论:靶向抑制survivin基因表达后姜黄素诱导胃癌细胞BGC-803凋亡的作用增强。     

川芎嗪对顺铂诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡的影响

目的:探讨川芎嗪对顺铂耳蜗毒性中细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法:将60只健康白色红目豚鼠随机分为3组:对照组、顺铂组和中药组,各组动物均于用药前及停药后测试听觉脑干诱发电位(ABR).电镜观察螺旋神经节细胞超微结构损伤情况,利用TUNEL测定各组耳蜗细胞凋亡情况。结果:对照组ABR阈值为40.94±6.75 db,顺铂组ABR阈值为76.26±4.54 db,中药组ABR阈值为58.98±5.82 db,三组比较,差异具有显著性(P<0.01);耳蜗透射电镜显示中药组较顺铂组耳蜗组织超微结构损伤明显减轻;TUNEL检测顺铂组有大量阳性细胞,与中药组比较,差异具有显著性(P<0.01)。结论:川芎嗪可以通过抑制细胞凋亡来拮抗顺铂的耳蜗毒性。     

Modulation of Apoptosis Induced by Tricyclic Antidepressants in Human Peripheral Lymphocytes

We have recently reported that the tricyclic antidepressants (TCAs) imipramine, clomipramine, and citalopram induce apoptosis in human peripheral lymphocytes. This system is well suited for studies on the pathophysiology/physiology of apoptosis regulation. Apoptosis was determined using both DNA gel electrophoresis and flow cytometric analysis. TCA-induced apoptosis in lymphocytes was monitored in the presence of the protein synthesis inhibitor cycloheximide (CHX), the RNA synthesis inhibitor actinomycin D (Act D), the antioxidant reduced glutathione (GSH), the nuclease inhibitor aurintricarboxylic acid (ATA), the cytokine interlukin-2 (IL-2), and the immunostimulator linomide. CHX and Act D failed to prevent and actually enhanced TCA-induced apoptosis in lymphocytes, indicating that protein and RNA syntheses are not required for this process. Exogenous IL-2, GSH, and ATA protected the lymphocytes from apoptosis induced by TCAs in a dose-dependent manner, whereas linomide had no effect on TCA-induced apoptosis under our in vitro conditions. Our data demonstrate that TCA-induced apoptosis in human lymphocytes shares many common features with other stimuli-induced apoptotic processes. © 1997 John Wiley & Sons, Inc. J Biochem Toxicol 12: 115–123, 1998     

黑色素抑制流感病毒诱导宿主细胞凋亡

报道了流感病毒体外诱导狗肾细胞系（ＭＤＣＫ）细胞凋亡的检测结果,对黑色素选择性抑制流感病毒诱导细胞凋亡的可能性进行了探讨,同时与临床上常用的抗病毒药物病毒唑的效果进行比较。结果显示：病毒感染６ｈ后,即可观测到宿主细胞核固缩现象、ＤＮＡ凝胶电泳出现特征性的梯状图谱,感染１２ｈ后,细胞核可见明显的裂解;并且流感病毒株Ａ１／京防８６１诱导细胞凋亡能力强于Ｂ沪防／９３－１;在２０～１２５μｇ／ｍＬ浓度范围内,黑色素可有效抑制６４个血凝单位（ＨＵ）的流感病毒感染诱导的细胞凋亡而无细胞毒性作用,其抑制效率类似病毒唑。初步研究结果表明：黑色素抗流感病毒诱导细胞凋亡机理与其阻断病毒吸附侵入宿主细胞有关     

痘苗病毒诱导HeLa细胞的凋亡

痘苗病毒感染ＨｅＬａ细胞后形态学上出现了较典型的细胞凋亡特征,电泳分析显示出ＤＮＡ阶梯,用ＤＮＡ断裂原位检测技术发现其染色质断裂主要存在于核周,与染色质凝聚位置相似。     

中药夏枯草对人甲状腺癌细胞系SW579增殖周期及凋亡的影响

目的：探讨夏枯草对人甲状腺癌细胞系SW579细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度夏枯草在不同作用时间内对在体外培养SW579细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果：夏枯草可在G0／G1期阻滞人甲状腺癌细胞系SW579的增殖,使s期细胞比率降低;在一定范围内,夏枯草的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论：夏枯草能抑制人甲状腺癌细胞系SW579细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

EGCG对LPS刺激人肺腺癌A549细胞凋亡及CUGBP1蛋白表达的影响

目的：研究表没食子儿茶素-3-没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）对炎性刺激的人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及与CUGBP1表达的关系。方法：MTT法检测EGCG和LPS刺激A549细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫细胞化学检测EGCG对LPS刺激人肺腺癌A549细胞内CUGBP1蛋白的表达。结果：与对照组相比,LPS体外显著促进A549细胞增殖,其胞核胞质内CUGBP1表达明显增强（P〈0.01）。加入EGCG可拮抗LPS促A549细胞增殖的作用,促进其凋亡,明显抑制LPS刺激的A549细胞内CUGBP1的表达（P〈0.01）。CUGBP1蛋白定量分析可知EGCG和LPS共同孵育A549细胞4h、24h时,细胞中的CUGBP1蛋白表达量较单纯LPS作用时降低。但EGCG和LPS共同孵育A549细胞24h,A549细胞中胞核CUGBP1蛋白表达量（1210.565±3.46）较4h时胞核CUGBP1蛋白表达量（67.344±3.68）高,差异有统计学意义（t=927.164,P〈0.001）。结论：EGCG可能通过干扰CUGBP1基因的表达抑制炎症刺激人肺腺癌细胞A549的增殖,促进其凋亡。