腮腺炎病毒的结构多肽——分子量的电泳测定

腮腺炎病毒感染鸡胚后收集尿液和羊水,通过差异离心和蔗糖密度梯度离心提纯宥毒。经SDS—PAGE分离,以铬银染色法结合溴化乙锭和考马斯亮兰染色,发现病毒含有13种结构多肽,分子量分别为79,74,70,65,61,59,56,53,50,45,41,34和31 x103d。     

避免Golgi银染标本表层产生铬银沉淀的一个改进方法

经典的Golgi镀银染色法是神经组织研究和教学的重要技术。与其它几种银染技术相比,Golgi镀银染色法操作相对简便,能同时显示神经元与胶质细胞的整体形态,图像对比清晰,耐长久保存。但美中不足的是,标本表层易产生浓黑的铬银沉淀,影响某些重要结构的观察。     

水稻野败型细胞质雄性不育系和其保持系蛋白质多肽的比较研究

应用单向SDS—PAGE结合蛋白质铬银染色技术对水稻野败型细胞质雄性不育系珍汕97A和其保持系的叶绿体、线粒体和细胞质的蛋白质多肽进行了比较研究,发现两系之间存在明显的差异,生殖器官(穗子)上的差异比营养器官(叶片)上的差异更为显著。在成熟穗上,叶绿体可溶性蛋白不育系有25条带,保持系仅16条带,两者间有19个多肽不同;线粒体可溶性蛋白不育系有28条带,保持系比不育系少30.1和21.8KD两个多肽;细胞质可溶性蛋白丙酮沉淀物的水溶性蛋白组分不育系有24条带,保持系为29条带,两系间却有7条多肽存在差别;细胞质可溶性蛋白丙酮沉淀物的SDS-增溶性蛋白组分不育系有18条带,保持系只有11条带,两者间亦有7条多肽出现差异。由此可以看出,水稻野败型CMS表型的表达可能需要较多个基因的启动和关闭,既与叶绿体和线粒体有关,还涉及到核基因组的作用。     

重组HBsAg的纯化及动物免疫原性研究

用乙型肝炎病毒(HBV)DNA转染工程细胞株MT-5,收获培养上清液,经超过滤浓缩、PEG沉淀和3次超速离心,得到纯化的HBsAg。经SDS-PAGE银染色后,纯化的HBsAg显示两条多肽,分子量分别为23k和27k,与血源HBsAg的多肽成分相同,为HBsAg的两条特异性多肽。经PAGE银染色结果显示,纯化的HBsAg中杂蛋白含量符合疫苗制备要求。用上述方法提纯HBsAg,回收率可达44.1％以上。 将纯化的HBsAg吸附于氢氧化铝佐剂,免疫Balb/c小鼠,并与血源HBsAg对照,抗体半数阳转剂量(ED50)分别为0.501μg和0.832μg,说明基因工程HBsAg的免疫原性似优于血源HBsAg。     

多肽铬螯合物对糖尿病小鼠肝脏蛋白质表达影响的研究

目的：研究多肽铬螯合物对糖尿病小鼠肝脏蛋白质表达的影响,探讨其治疗糖尿病的机理。方法：通过腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型。将小鼠分为正常组模型组和胶铬组,胶铬组以灌胃方式加入多肽铬螯合物;以光镜及HE染色观察三组小鼠肝脏形态及组织学的变化,采用SDS-PAGE实验和非SDS-PAGE检测三组小鼠肝脏蛋白质表达。结果：光镜及组织学观察结果显示多肽铬螯合物可以有效地减轻四氧嘧啶对肝细胞造成的损伤。模型组肝脏25kDa-35kDa之间的某种蛋白表达升高而多肽铬螯合物可以降低此种蛋白的表达,初步推断这种蛋白质为SOD。结论：多肽铬螯合物能够通过降低四氧嘧啶造成的肝脏中抗氧化有美的蛋白盾代偿性升高而起到保护肝脏的作用．是一种新型的治疗糖尿痛所致的肝损伤的活性物盾。     

多肽铬螯合物对糖尿病小鼠肝脏蛋白质表达的影响

目的:研究多肽铬螯合的对糖尿病小鼠肝脏蛋白质表达的影响,探讨其治疗糖尿病的机理.方法:通过腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型.将小鼠分为正常组、模型组和胶铬组,胶铬组以灌胃方式加入多肽铬螯合物;以光镜及HE染色观察三组小鼠肝脏形态及组织学的变化,采用SDS-PAGE实验和非SDS-PAGE检测三组小鼠肝脏蛋白质表达.结果:光镜及组织学观察结果显示多肽铬螫合物可以有效地减轻四氧嘧啶对肝细胞造成的损伤.模型组肝脏25kDa-35kDa之间的某种蛋白表达升高而多肽铬螯舍物可以降低此种蛋白的表达,初步推断这种蛋白质为SOD.结论:多肽铬螯合物能够通过降低四氧嘧啶造成的肝脏中抗氧化有关的蛋白质代偿性升高而祈祷保护肝脏的作用,是一种新型的治疗糖尿病所致的肝损伤的活性物质.     

分月扇舟蛾颗粒体病毒的结构多肽

采用垂直板不连续SDS-PAGE分析了分月扇舟蛾(Clostera anastomosis简称Cas)颗粒体病毒的结构多肽,结果表明,经Sepharose-6B柱层析的颗粒体蛋白仅有一条主肽,其分子量为32×10~3d;病毒粒子的结构多肽至少有23种其分子量范围在13—85×10~3d之间。采用PAS染色法测得Vp_(34)、Vp_(31)、Vp_(10)三条主带呈弱阳性反应,可认为有糖旦白有在的可能性。     

常用实验动物肿瘤细胞染色体的研究——Ⅱ.大鼠Walker 256癌肿的核型分析

本文用几种显带染色技术和Ag-AS染色法,分析了大鼠Walker 256癌肿的核型。结果表明,Walker 256癌肿是一种亚三倍体细胞,染色体众数为57—58(18.0—23.5％),其中包括8条标记染色体。经银染色后,Walker 256癌肿有3条染色体显示有银染核仁组织者(Ag-NORs)。     

胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螯合物对糖尿病小鼠免疫力的影响

目的研究胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）（CPCC）螯合物对由四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠的免疫力的影响。方法通过腹腔注射四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型,观察胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螯合物对小鼠血糖、脾指数、胸腺指数、脾细胞增殖能力、NK细胞杀伤活性、CD40、CD40L的表达等指标的影响。结果胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）螫合物可以有效预防小鼠血糖升高,对脾指数、胸腺指数有一定的恢复作用,脾细胞增殖能力明显增强,NK细胞的杀伤活性被提高,CD40、CD40L的阳性表达率增加。结论胶原蛋白多肽-铬（Ⅲ）能活化免疫细胞,恢复和改善小鼠机体的免疫功能,提高小鼠机体的免疫力,一定程度地减轻四氧嘧啶的毒性作用,降低血糖。     

一种改良的蛋白质双向电泳银染色法

Switzer等人于1979年发展了蛋白质的银染色法.由于其灵敏度远远高于传统的考马斯亮蓝染色法,结合蛋白质的双向电泳技术,可获得分辨率极高的分析系统,已日益成为生化分析的重要工具.许多生化工作者对银染色法作了改良.但是,其中某些方法我们难以重复,或底色过深,假象多,或操作步骤过于繁琐.我们结合前人经验,建立了一个在本实验室条件下易行、价廉、重复性好的改良方法.     

细胞培养中支原体污染的PCR检测

根据支原体16s rDNA序列,选择RemyTeyssou设计的三条寡核苷酸链,组成两套引物:P_(1-2a)能检测出细胞培养中常见的各种支原体,P_(1-2b)能检出无胆甾原体。反应可检出体系中10CFV的菌体。此法先用于对实验室人为污染支原体Vero细胞的检测,后与DNA 染色法和培养法比较,检测了49份生物样品,其中24份传代细胞,PCR检测的阳性率为58％,DNA染色法为42％,培养法为33％;三者的灵敏性比较,PCR可检出10~(-3)稀释度的阳性样品,高于其他两种方法。此PCR方法快速、灵敏、特异,适用于细胞培养中支原体污染的检测。     

考马斯亮蓝—银染色法——一种更灵敏的凝胶蛋白质染色法

我们曾报道一种重复性好而灵敏的电泳凝胶蛋白质染色法。其后发现银染色法虽然灵敏,但有一定的选择性,某些蛋白不易被银染色着色。若将考马斯亮蓝染色与银染色相结合,则可弥补彼此弱点,而且可提高灵敏度,是一种较为理想的凝胶蛋白质染色法。一、材料与方法(一)试剂丙烯酰胺、双丙烯酰胺、SDS 为国产品,均重结晶后使用;考马斯亮蓝 G—250及戊二醛(Fluka 产品);硝酸银 GR 级(西安化学试剂厂产品);Ampholine(LKB 产品);尿素     

鸡胸腺APUD细胞的存在

为了确定鸟类免疫器官内有无内分泌细胞的存在,该文应用Ｇｒｉｍｅｌｉｕｓ嗜银染色法,ＭａｓｓｏｎＦａｎｔａｎａ亲银染色法,铅苏木精法和５－ＨＴ免疫组织化学方法,对鸟胸腺,腔上囊和脾脏进行了观察。结果表明：鸡和虎斑颈槽蛇相同,仅胸腺含有少量嗜银,亲银,铅染和（或）５－免疫反应阳性的细胞,具有一定的内分泌功能,腔上囊虽与胸腺同为中枢免疫器官,但没有此类细胞,这说明二者在内分泌调节等方面且一定差异。     

蛋白电泳的高灵敏度银染法

随着蛋白质凝胶电泳和等电聚焦电泳分离技术的发展,在考马斯兰呈带染色技术的基础上,近年来又出现了超灵敏度的银染色法。Switzer等人将银染色法和考马斯兰染色对比,前者比后灵敏100倍,与同位素放射自显影相媲美;同时银染法还具有自显影所不具备的优点,简便快速,可监测出迅速变化的细胞体系中瞬时出现的各种蛋白质组分。但Switzer法重现性较差,     

车轮虫干银染色方法的改进

车轮虫（trichodinids）是一大类病害性寄生或共栖生的缘毛类纤毛虫,是鱼类中最为常见的寄生虫之一。虫体大多数分类性状在活体观察或非染色状态下不可直视,因此易于被忽视。干银染色法是目前车轮虫细胞学、遗传学、分类及形态学研究中常用的手段。经典的干银染色法作为车轮虫属间分类和种类鉴别的重要研究手段而沿用至今。国际间较流行的车轮虫种类鉴别的研究方法主要采用Foissner（1991）和Lom and Dykova（1992）对Klein（1958）的干银法修正版。     

铬银染色SDS-PAGE法在小分子肽制品检定中的应用

铬银染色SDS-PAGE法简便、快速、灵敏度高,现已成为分析、检定微量蛋白质和多肽样品的常用方法。该法用于分子量在10000Da以上的样品时效果很好,但用于分子量在10000Da以下的样品如人表皮生长因子(hEGF,分子量约6200Da)时,其电泳带太宽,且常不能形成平直的条带,给样品纯度和分子量的测定带来很大困难。我们在进行重组人表皮生长因子(rhEGF)样品的SDS-PAGE分析时,对电泳条件作了一些改进,取得了较好的效果,现报告如下。     

兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析

兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析王恒安,杜念兴,徐为燕（南京农业大学,南京２１００９５）关键词兔出血症病毒,结构多肽,氨基酸分析有关兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）结构多肽的报道很多,有认为只有１条,有报道４条的,也有报道多达６条的。但其主要结构多肽为分...     

家蚕核型多角体病毒结构多肽的双向电泳分析

用等电聚焦-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳的双向电泳法和银染色方法,分析了家蚕核型多角体病毒粒子和核衣壳的结构多肽。该病毒单粒包埋型病毒粒子含约96种多肽,核衣壳含约72种多肽。病毒粒子制剂和核衣壳制剂中含有较多量的分子量为31K的多肽,用蔗糖梯度离心、离心洗涤、碱处理甚至蛋白酶酶解和去污剂处理,都不能将其除去。向病毒制剂中加入纯化的多角体蛋白后作双向电泳,发现外加多角体蛋白改变原等电点面与上述31K多肽重合。对31K多肽的来源进行了讨论。     

豚鼠小肠EC细胞的免疫细胞化学和银染法的比较研究

本实验利用同一切片标本,在光镜水平上,对豚鼠小肠ＥＣ细胞进行了免疫细胞化学和不同银染法的比较研究。实验结果显示,全部Ｍａｓｓｏｎ－Ｆｏｎｔａｎａ亲银染色阳性细胞均呈ＰＡＰ染色阳性;另一方面,小部分（１５％）Ｇｒｉｍｅｌｉｕｓ嗜银染色阳性细胞却表现为亲银染色和ＰＡＰ染色双阴性。以上结果表明,在显示ＥＣ细胞上,亲银染色具有很高的特异性,因此仍不失为一种经济和实用的方法;嗜银染色显示ＥＣ细胞,尽管其敏感性稍高于亲银染色法,但不具有免疫细胞化学与亲银染色技术那样明显的特异性。     

用微波技术改进的PAM染色

ＰＡＭ染色法是一种显示肾小球基底膜的六胺银染色与Ｍａｓｓｏｎ三色法结合起来应用的复合染色法,它可在同一切片上显示多种组织成分,是肾穿活检中必不可少的方法。但它步骤多,耗时长,严重影响制片速度,为此,我们用微波技术对ＰＡＭ染色法进行改进（简称为ＭＷ－Ｐ...