miR-19a在正常妊娠及重度子痫前期患者胎盘中的表达

目的：通过检测正常妊娠及重度子痫前期患者胎盘组织中miR-19a的表达,探讨其与子痫前期发病的关系。方法：收集10例重度子痫前期患者胎盘组织（实验组）和10例正常产妇胎盘组织（对照组）,应用荧光实时定量PCR（Real Time PCR）的方法检测两组miR-19a的表达差异。结果：重度子痫前期患者胎盘组织中miR-19a表达升高（P〈0.05）。结论：子痫前期患者胎盘组织中存在差异表达的miRNA,miR-19a在胎盘组织中的高表达可能与子痫前期的发病有关。     

sHLA-G在子痫前期患者的表达及意义

目的：检测子痫前期患者sHLA—G水平,探讨母血sHLA—G的水平和妊娠高血压疾病的关系。方法：采用酶联免疫吸附法检测20例正常孕妇晚期和20例子痫前期患者血清sHLA—G水平。结果：在正常妊娠组sHLA—G血清中的水平为10．72±3.40ng／mL;子痫前期组为9.46±1.5．10ng／mL。子痫前期组sHLA—G水平明显低于正常妊娠晚期组,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：sHLA-G可能与子痫前期患者的发病有关系。     

PEDF蛋白在子痫前期患者胎盘上的表达及意义

目的:研究子痫前期患者胎盘组织中色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达,探讨PEDF在子痫前期发病中的作用。方法:选取2012年3月至2013年3月在我院产科住院剖宫产的20例子痫前期孕妇作为研究对象,另选取同期正常分娩的孕妇20例作为对照组。采用Western blot、免疫荧光组织化学方法检测子痫前期患者和正常对照组妇女胎盘组织中PEDF和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,并通过免疫荧光方法计数胎盘微血管密度(MVD)。结果:同正常对照组相比,子痫前期患者胎盘组织中PEDF表达升高,而VEGF表达则减少。PEDF与VEGF组织表达位置大致相同。子痫前期患者胎盘组织中PEDF表达与24h尿蛋白定量呈正相关,与VEGF表达及MVD计数呈负相关;VEGF表达与MVD计数呈正相关。结论:PEDF与子痫前期疾病发生发展及病情轻重程度有关;PEDF可能是通过影响胎盘血管的重铸,而参与子痫前期疾病的发生发展。     

重度子痫前期舒适护理

舒适护理是一种整体化、个体化、创造性、有效的护理模式,使人在生理、心理、社会上达到最愉快的状态,或缩短、降低其不愉快的程度[1].2010年1月～2011年3月,我院自开展优质护理服务活动以来,我产科将舒适护理贯穿于42例重度子痫前期产妇的护理过程中,取得了满意效果,现报告如下.     

RhoB/ROCK 蛋白分子在重度子痫前期的表达

目的:探讨RhoB/ROCK蛋白分子在重度子痫前期(severe preeclampsia,sPE)患者胎盘组织中表达水平以及意义。方法:取sPE产妇和正常产妇胎盘组织各20例,通过Western blot和免疫组化检测胎盘组织中Rho亚家族蛋白(RhoB、RhoC)及其Rho激酶即ROCK(ROCKI、ROCKII)蛋白的表达水平,应用Spearman等级相关分析法检验RhoB、RhoC与ROCKI、ROCKII蛋白表达水平的相关性。结果:RhoB、ROCKI、ROCKII蛋白在sPE表达水平增加(P<0.05);sPE患者胎盘组织中RhoB与ROCKI、ROCKII蛋白表达水平均呈正相关(r=0.793,r=0.901,P<0.05)。结论:RhoB及其与下游分子ROCKI、ROCKII构成的信号通路,在sPE的发病中可能发挥着重要的作用。     

BMP-7 在子痫前期肾脏损伤中的表达及临床意义

目的：探究BMP-7 在子痫前期肾脏损伤中的表达及临床意义。方法：选取2012 年3 月到2013 年12 月我院妇产科收治的98 例子痫前期肾脏损伤患者作为研究对象,以30例健康孕妇为对照,分别采用ELISA 方法检测血液、尿液中BMP-7 蛋白、尿茁2微 球蛋白（beta2-MG）浓度,以苄索氯胺比浊法测定24 h尿蛋白定量。结果：①与对照组相比,子痫前期肾脏损伤患者尿液及血清 BMP-7 蛋白浓度显著降低(P<0.05);②随着病程进展,子痫前期组尿液血清BMP-7 蛋白浓度、尿白蛋白定量、beta2-MG 显著升高 (P<0.05);③子痫前期组尿液、血清BMP-7 蛋白浓度分别与尿白蛋白定量、beta2-MG 成正相关（P＜0.05）。结论：子痫前期肾脏损伤 患者血清BMP-7 蛋白水平显著降低,可用于评估子痫前期肾脏损伤进展,对临床具有指导意义。     

1例重度子痫前期并发腹水患者的护理体会

重度子瘸前期属妊娠期高血压疾病,是以妊娠20周后高血压、蛋白尿、水肿为特征的妊娠期特有的疾病,并伴有全身多脏器的损害。重度子痫前期并发腹水是病情严重的表现,该病严重威胁着孕产妇及围生儿的生命安全。     

IL-4 和IFN-γ mRNA 在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:检测胎盘组织中IFN-γ和IL-4的表达,探讨IFN-γ和IL-4在子痫前期的发病中的作用.方法:采用原位杂交法检测了20例正常妊娠孕妇和34例子痫前期组(包括16例轻度和18例重度)中的IFN-γ、IL-4 mRNA的表达水平,并通过图像分析系统对染色结果进行定量分析.结果:(1)IL-4 mRNA的表达在正常妊娠组、子痫前期轻度组和子痫前期重度组的表达无差异(P＞0.05).(2)与正常妊娠组、子痫前期轻度组相比,子痫前期重度组IFN-γ mRNA的表达有差异性(P＜0.05);子痫前期轻度组与正常妊娠组相比无差异(P＞0.05).(3)与正常妊娠组相比,子痫前期轻度组、重度组IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA的比值均有差异性(P＜0.05),且随病情的加重比值增大.结论:Th1/Th2细胞因子的平衡偏离可能是导致子痫前期发病的病因之一.     

解整合素金属蛋白酶19(ADAM19)与子痫前期的相关性研究

通过对孕妇胎盘组织和外周血中解整合素金属蛋白酶19(ADAM19)的检测,探讨ADAM19与子痫前期发病的关系.将病人分为研究组(子痫前期组)和对照组(正常妊娠组),子痫前期组病人中早发型50例,晚发型44例,对照组病人50例.于临近分娩时取静脉血,分娩后取胎盘组织,应用免疫组织化学技术和免疫印迹技术对胎盘组织中ADAM19蛋白进行检测,用ELISA法检测两组血浆中ADAM19的水平.结果显示,胎盘组织中ADAM19分布在多种滋养层细胞中,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞和一些绒毛间质结缔组织细胞、毛细血管中,其阳性信号定位于细胞膜上和细胞质中;ADAM19的蛋白表达正常胎盘中为0.34±0.03,晚发型子痫前期组为0.53±0.02,早发型子痫前期组为0.82±0.03,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).正常孕妇血浆中ADAM19为(4.52±0.10)μg/L,晚发型子痫前期为(4.32±0.11)μg/L,早发型子痫前期(3.78±0.10)μg/L.早发型子痫前期组与对照组比较有统计学差异(P<0.001),晚发型子痫前期组与对照组比较无统计学差异(P>0.05),早发型与晚发型子痫前期比较有统计学差异(P<0.001).结果表明,子痫前期胎盘组织中ADAM19过度表达可能与子痫前期的发生和发展有关,ADAM19有可能作为预测子痫前期发病的分子标志.     

Study on the Expressions of PHD and HIF in Placentas from Normal Pregnant Women and Patients with Preeclampsia

Objective: To investigate the relationship between oxygen sensitivity of trophoblast and hypoxia in preeclamptic placenta by the study on the expressions of hypoxia-inducible factor prolyl 4-hydroxylase (PHD) and hypoxia-inducible factor (HIF) in placentas from normal pregnant women and patients with pre-eclampsia.Methods: Subjects were chosen from the in-patients or the out-patients from May 2003 to May 2004. They were divided into 5 groups: early pregnancy group (EP), 13 cases; middle pregnancy group (MP), 9 cases; late pregnancy group (LP, or control group), 12 cases; preeclampsia (PE) group, 20 cases; gestational hypertension group (GH), 10 cases. The mRNA expressions of PHD-1 and -2 and -3 in placentas from all the subjects were assessed by in situ hybridization and Real-time PCR. The expressions of HIF-1α and -2α in placentas from different groups were assessed by immunohistochemistry and western blot.Results: PHD-1,-2 and -3 mRNA were mainly expressed in cytoplasm of trophoblast, especially strongly expressed in extravillous trophoblast. During the progress of pregnancy, the expression of PHD-1 increased significantly (R=0.616, P<0.001). The PHD-1mRNA expression in placentas from PE group decreased significantly compared with that from control group, P<0.05. A significant direct correlation between the PHD-1 mRNA expression in placentas from PE group and their placenta weight was found (R=0.457, P<0.05). The HIF-2α, not the HIF-1α expression, from PE group was significantly higher than that from control group, P<0.01; The HIF-2α expression in trophoblast from PE was inversely correlated to the date of the onset of the disease (R=-0.730, P<0.01).Conclusions: PHD-1 played an important role in hypoxic response pathway of trophoblast through modulating the level of HIF-2α. The overly activated hypoxic response pathway of trophoblast in preeclamptic placenta, which is manifested as the result of HIF-2α over-expression, is the key point to hypoxic dysfunction of trophoblast.     

血清血管生成素相关生长因子水平与子痫前期发病的关系

目的:探讨血清血管生成素相关生长因子(AGF)水平与子痫前期发病的关系。方法:选择2013年1月至2014年12月间在我院进行产前检查并行剖宫产终止妊娠的子痫前期患者42例作为研究组,同期收住的正常妊娠孕产妇30例作为对照组。应用双抗体酶联免疫吸附法检测血清AGF水平,应用RT-PCR法测定胎盘组织AGF mRNA水平。结果:研究组收缩压、舒张压及血清AGF水平显著高于对照组,分娩孕周显著小于对照组,新生儿出生体重显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组胎盘AGF mRNA水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。多因素Logistic分析显示,孕产妇胎盘AGF mRNA水平与血清AGF水平、孕产妇收缩压、舒张压呈正相关(r=0.605,0.428,0.403,P均0.05)。结论:子痫前期患者血清AGF水平异常,胎盘AGF表达异常,提示AGF可能与子痫前期发病有关。     

慢性高血压合并妊娠发生子痫前期的危险因素分析

目的:探讨慢性高血压合并妊娠发生子痫前期的危险因素,为筛查慢性高血压孕妇合并子痫前期提供参考依据。方法:选取2009年3月~2013年7月我院收治的慢性高血压妊娠患者116例,根据是否合并子痫前期分为慢性高血压合并妊娠组(NHDP组)和慢性高血压合并子痫前期组(HDP组),比较两组患者不同孕期的血压、尿蛋白水平以及血液生化检测指标间的差异。结果:两组间年龄、孕次、孕前尿蛋白水平、孕早期及孕中期的平均动脉压、尿蛋白水平间差异均无统计学意义(P0.05)。HDP组孕前体质指数、孕晚期的平均动脉压、尿蛋白水平、Hb、UA、LDH、FDP均较NHPD组显著升高(P0.05),两组间Plt水平差异无统计学意义(P0.05)。logistic回归分析发现Hb、UA及FDP是慢性高血压妊娠患者并发子痫前期的危险因素。结论:凝血状况、血清尿酸水平及肾功能变化是慢性高血压合并妊娠者发生子痫前期的危险因素。     

葡萄糖调节蛋白78在子痫前期中的表达及其意义

目的：探讨葡萄糖调节蛋白78（GRP78）mRNA及蛋白在胎盘组织的表达水平及其与子痫前期的发病关系。方法：选择2010年1月-2010年12月在南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院产科住院的子痫前期患者35例（子痫前期组）,以同期正常孕妇35例为对照组。采用RT-PCR技术、蛋白印迹（western-blot）法和免疫组化检测两组孕妇胎盘组织中GRP78的mRNA与蛋白表达水平差异。结果：子痫前期组患者胎盘组织中GRP78mRNA与蛋白表达水平均显著高于相应孕周正常妊娠组。结论：子痫前期能够诱导GRP78表达,CHOP/GADD153表达的增高与子痫前期的发病有关。     

检测人老化胎盘组织中miR-182的表达

目的：通过检测miR-182在正常妊娠各期、老化胎盘组织中的表达,探讨miR-182在胎盘发育过程中的调控作用,并同时探讨miR-182与血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的相关性,为寻找胎盘老化特别是胎盘提前老化发生机制提供依据。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测42例标本（早孕绒毛和胎盘组织）中miR-182的表达情况。结果：miR-182在正常妊娠早孕绒毛组织、正常妊娠胎盘组织及老化胎盘组织中均表达。miR-182表达水平各个组间比较：早期与中期妊娠组、中期与晚期未足月妊娠组、晚期未足月与晚期足月妊娠组有显著差异（P〈0.05）;胎盘老化组与正常妊娠早期、中期、晚期未足月、晚期足月组有极显著差异（P〈0.01）;妊娠的早期、中期、晚期,miR-182的表达逐渐增多,老化胎盘组织中miR-182高水平表达。结论：miR-182与胎盘老化的发生高度相关,可能在胎盘老化机制中起重要的调控作用。     

子痫前期循环系统标志物sFlt-1的重组表达及化学发光检测方法的建立

目的：表达可溶性fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)重组蛋白,建立针对sFlt-1的化学发光检测方法。方法：构建pcDNA3.4-sFlt-1-His*6表达载体,转染至HEK293细胞进行重组表达。利用链霉亲和素-生物素亲和体系及双抗体夹心法,实现对sFlt-1的定量检测。结果：该方法的最低检测限为2 pg/mL,线性范围为20～40 000 pg/mL,平均回收率为92%,批内及批间精密度变异系数(variable coefficient, CV)均小于10%,与珀金埃尔默sFlt-1检测试剂盒进行比对的相关系数R²为0.925 2。结论：获得了具有天然生物活性的sFlt-1蛋白,建立了具有良好性能的sFlt-1检测方法,后续进一步开发可应用于子痫前期的诊断筛查。     

Preeclampsia Does Not Alter Vascular Growth and Expression of CD31 and Vascular Endothelial Cadherin in Human Placentas

Preeclampsia is characterized by maternal endothelial dysfunction (e.g., increased maternal vascular permeability caused by the disassembly of endothelial junction proteins). However, it is unclear if preeclampsia is associated with impaired vascular growth and expression of endothelial junction proteins in human placentas. Herein, we examined vascular growth in placentas from women with normal term (NT) and preeclamptic (PE) pregnancies using two endothelial junction proteins as endothelial markers: CD31 and vascular endothelial-cadherin (VE-Cad). We also compared protein and mRNA expression of CD31 and VE-Cad between NT and PE placentas, and determined the alternatively spliced expression of CD31 using PCR. We found that CD31 and VE-Cad were immunolocalized predominantly in villous endothelial cells. However, capillary number density (total capillary number per unit villous area) and capillary area density (total capillary lumen area per unit villous area) as well as CD31 and VE-Cad protein and mRNA levels were similar between NT and PE placentas. PCR in combination with sequence analysis revealed a single, full-length CD31, suggesting that there are no alternatively spliced isoform of CD31 expressed in placentas. These data indicate that preeclampsia does not significantly affect vascular growth or the expression of endothelial junction proteins in human placentas.