沉默DEPDC1抑制鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移

DEPDC1(DEP domain containing 1)是一个新的肿瘤相关基因,在多种恶性肿瘤的发生发展进程中起着重要作用。我们前期工作中在鼻咽癌细胞内沉默了DEPDC1的表达,发现抑制细胞增殖并诱发细胞凋亡。本研究旨在探讨沉默DEPDC1表达后,对鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移能力的影响及其分子机制。结果显示,siRNA介导DEPDC1表达沉默后,细胞侧向运动能力、侵袭及迁移能力显著降低。qRT-PCR及Western印迹检测发现DEPDC1沉默导致EMT上游关键转录因子Twist1及间质细胞标志分子Vimentin表达显著下调。这些研究表明,鼻咽癌细胞中DEPDC1通过调节Twist1等EMT关键分子的表达在细胞侵袭转移过程中起关键作用。推测DEPDC1在鼻咽癌中高表达可能对于促进其侵袭转移具有重要作用,进而促进肿瘤发生发展,但具体分子机制仍有待更深入研究。     

过表达DNALI1抑制低氧环境中鼻咽癌细胞株CNE-2z侵袭与迁移

目的探讨模拟肿瘤内低氧微环境下,动力蛋白轴突轻链中间体1 （DNALI1）对鼻咽癌细胞株CNE-2z增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。 方法R语言软件分析GEO数据库中鼻咽癌组织的3个数据集,分析其差异基因（DEGs）。低氧是肿瘤微环境基本特征,体外细胞研究均在低氧工作站（1﹪O₂）中进行,以模拟体内低氧微环境。将DNALI1过表达质粒和空载体质粒包装成慢病毒后感染CNE-2z细胞,构建DNALI1基因稳定过表达的CNE-2z细胞株。将CNE-2z细胞分别进行正常培养（空白对照,BC）,感染空载体慢病毒（阴性对照,NC）和感染过表达DNALI1慢病毒（过表达DNALI1,DNALI1-OE）。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和Western blot检测DNALI1 mRNA和蛋白表达水平;集落形成实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。 结果生物信息学分析发现,与健康人鼻咽组织相比,鼻咽癌组织中DNALI1基因低表达。在低氧环境中,BC组与NC组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭比较,差异均无统计学意义;与BC组和NC组比较,DNALI1-OE组细胞增殖能力和凋亡水平比较,差异均无统计学意义（P均> 0.05）。与BC组和NC组比较,DNALI1-OE组细胞迁移能力[（198.67±3.22）,（199.00±3.00）比（75.00±7.55）个]和侵袭能力[（240.67±16.01）,（259.67±3.06）比（83.33±9.50）个]降低,差异具有统计学意义（P均< 0.001）。 结论低氧环境中,DNALI1过表达可抑制CNE-2z细胞侵袭与迁移能力,但对细胞增殖、凋亡无明显影响。     

RPA1低表达对辐射抵抗人鼻咽癌CNE-2R细胞侵袭迁移及细胞周期的影响*

目的: 探讨复制蛋白A1(RPA1)沉默对人鼻咽癌CNE-2R细胞侵袭、迁移及细胞周期的影响。方法: 采用shRNA技术构建RPA1低表达的CNE-2R细胞模型并通过RT-PCR和Western blot实验验证。选用空白对照组(CNE-2R)、阴性对照组(NC-shRNA)、RPA1低表达组(RPA1-shRNA)3组细胞完成后续实验,通过CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖能力、Transwell实验检测侵袭能力、划痕实验检测迁移能力,流式细胞术检测细胞周期;Western blot实验检测Chk2、p-Chk2、Cdc25c和p-cdc25c蛋白的表达。结果: 与CNE-2R和NC-shRNA组比较,RPA1-shRNA组细胞的RPA1mRNA和蛋白质均显著降低(P＜0.01和＜0.05);RPA1-shRNA组组细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著下降(P均＜ 0.05),细胞周期被阻滞在G2/M期(P＜0.01);RPA1-shRNA组细胞Chk2、Cdc25c的表达低于CNE-2R和NC-shRNA组细胞(P＜0.05), 而p-Chk2、p-cdc25c的表达高于其它两组(P ＜0.05)。结论: RPA1低表达抑制辐射抵抗人鼻咽癌CNE-2R细胞的增殖、迁移以及使细胞周期阻滞于G2/M期。     

LncRNA OSER1-AS1通过调控miR-433-3p影响宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭

该研究旨在探讨lncRNA OSER1-AS1对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对miR-433-3p的调控作用.利用Western blot和qRT-PCR方法检测宫颈癌细胞中OSER1-AS1、miR-433-3p的表达水平,发现宫颈癌细胞中OSER1-AS1的表达水平显著升高(P＜0.05),而miR-433...     

circPVT1通过miR-24-3p/let-7a-5p/FSCN1轴促进鼻咽癌细胞侵袭迁移

目的 鼻咽癌是一种来源于鼻咽上皮的恶性肿瘤,其临床特征之一是易发生淋巴转移,但是目前鼻咽癌转移的分子机制尚未阐明。circPVT1是由PVT1基因2号外显子反向拼接形成的环状RNA (circRNA),在多种肿瘤中表达上调,本文探讨了circPVT1在鼻咽癌侵袭迁移中的作用和分子机制。方法 通过RT-qPCR检测circPVT1及其下游miRNA和FSCN1在鼻咽癌细胞的表达情况,Transwell和划痕愈合实验检测circPVT1对鼻咽癌细胞侵袭迁移的影响,RNA pull-down实验检测circPVT1结合的miRNA,双荧光素酶报告实验检测miR-24-3p和let-7a-5p靶向抑制FSCN1 mRNA表达。结果 在鼻咽癌细胞中过表达circPVT1可以促进鼻咽癌细胞侵袭迁移,而敲低circPVT1则可以抑制鼻咽癌细胞的侵袭迁移。进一步研究发现,circPVT1可以通过竞争性吸附miR-24-3p和let-7a-5p,上调FSCN1的表达,从而促进鼻咽癌细胞的侵袭迁移。结论 circPVT1通过miR-24-3p/let-7a-5p/FSCN1轴促进鼻咽癌细胞侵袭迁移,证实c...     

lncRNA PSMA3-AS1靶向调控miR-627-3p对肝癌Hep3B细胞增殖、迁移及侵袭的影响

该文旨在探讨lncRNA PSMA3-AS1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能的作用机制。采用qRT-PCR法对肝癌组织、癌旁组织、正常人肝上皮细胞THLE-3,以及人肝癌细胞MHCC97H、Hep3B、SK-HEP-1中lncRNA PSMA3-AS1、miR-627-3p的表达量进行检测;将si-NC、si-lncRNA PSMA3-AS1、miR-NC、miR-627-3p mimics分别转染至Hep3B细胞,si-lncRNA PSMA3-AS1与anti-miR-NC,以及si-lncRNA PSMA3-AS1与anti-miR-627-3p共转染至Hep3B细胞;双荧光素酶报告实验检测lncRNA PSMA3-AS1与miR-627-3p的靶向关系;MTT法检测细胞增殖;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成情况;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭;蛋白质印迹法检测MMP2、MMP9蛋白表达量。qRT-PCR实验结果显示,与癌旁组织比较,肝癌组织中lncRNA PSMA3-AS1的表达量升高(P<0.05),miR-627-3p的表达量降低(P<0.05...     

EB病毒LMP1-CTAR3对NP69细胞增殖和蛋白质表达的影响

为了探讨EB病毒潜伏性膜蛋白1(LMP1)第三个功能活性区域(CTAR3)在鼻咽上皮细胞NP69中的转化作用机制,采用逆病毒感染的方法,将浓缩的逆病毒RV-LMP1和RV-LMP1△232～351分别感染鼻咽上皮细胞NP69,建立NP69-LMP1与NP69-LMP1△232～351稳定表达细胞系.通过绘制生长曲线、平皿克隆形成试验和软琼脂集落形成试验比较野生型和突变型LMP1对NP69细胞增殖的影响,运用蛋白质组学方法鉴定NP69-LMP1与NP69-LMP1△232～351细胞间的差异表达蛋白,选用实时荧光定量RT-PCR与Western blot对其中部分蛋白质点差异表达进行验证.结果发现:a.突变型LMP1△232～351促NP69细胞增殖的能力较野生型LMP1明显降低(n=3,P<0.05);b.鉴定了LMP1-CTAR3在NP69细胞中参与调节的16个蛋白质(表达上调的蛋白质8个,下调的8个).c.实时荧光定量RT-PCR和Western blot证实了部分上述蛋白质的差异表达.以上结果说明,LMP1-CTAR3是其发挥促细胞增殖的重要活性部位,可能通过参与调节G蛋白和异柠檬酸脱氢酶等蛋白质的表达而起作用.     

circCALN1/miR-143-3p/BCL-2调控轴影响鼻咽癌细胞增殖与侵袭的分子机制研究

该文探讨circCALN1(circular RNA calneuron1)在鼻咽癌中的表达及调控分子机制.运用生物信息软件预测circCALN1调控的miRNA及miRN调控的靶基因;运用RT-PCR检测鼻咽癌组织及细胞株中的基因表达水平;常规培养鼻咽癌细胞株(CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F、6-10B)...     

骆驼蓬碱通过LOXL1-AS1影响卵巢癌细胞CAOV3增殖、凋亡、迁移侵袭

该研究探讨了骆驼蓬碱对卵巢癌细胞CAOV3增殖、凋亡、迁移侵袭的影响及分子机制.卵巢癌细胞CAOV3分为对照组,骆驼蓬碱低、中、高剂量组,si-NC组,si-LOXL1-AS1组,骆驼蓬碱高剂量+pcDNA组,骆驼蓬碱高剂量+pcDNA-LOXL 1-AS 1组.用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率;平板克...     

Met degradation by SAIT301, a Met monoclonal antibody,reduces the invasion and migration of nasopharyngeal cancer cells via inhibition of EGR-1 expression

Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is a common malignant tumor with high invasive and metastatic potential. The hepatocyte growth factor (HGF)-Met signaling pathway has a critical role in mediating the invasive growth of many different types of cancer, including head and neck squamous cell carcinoma. HGF also stimulates NPC cell growth and invasion in the cell line model. In this study, we determined the inhibitory effect of Met, using a Met-targeting monoclonal antibody (SAIT301), on the invasive and growth potential of NPC cell lines. Met inhibition by SAIT301 resulted in highly significant inhibition of cell migration and invasion in both the HONE1 and HNE1 cell lines. In addition, we also found that co-treatment of SAIT301 and HGF decreased the anchorage-independent growth induced by HGF in HNE1 cell lines. After SAIT301 treatment, Met, together with its downstream signaling proteins, showed downregulation of p-Met and p-ERK, but not p-AKT, in both HONE1 and HNE1 cell lines. Interestingly, we found that HGF treatment of NPC cell lines induced early growth response protein (EGR-1) expression, which is involved in cell migration and invasion. In addition, co-treatment with SAIT301 and HGF inhibited the HGF-induced expression of EGR-1. Next, knockdown of EGR-1 using small-interfering RNA inhibited HGF-induced cell invasion in NPC cell lines, suggesting that the expression level of EGR-1 is important in HGF-induced cell invasion of NPC cells. Therefore, the results support that SAIT301 inhibited Met activation as well as the downstream EGR-1 expression and could have therapeutic potential in NPC. Taken together, we suggest that Met is an anticancer therapeutic target for NPC that warrants further investigation and clinical trials and SAIT301 may be a promising tool for NPC therapy.     

苯胺嘧啶衍生物X-9通过下调整合素β1表达抑制肝细胞癌迁移侵袭

整合素在许多肿瘤细胞中高表达,并且参与肿瘤细胞的侵袭转移。在肝细胞癌中,整合素β1被报导高表达,并促进肿瘤细胞的侵袭。目前,对于整合素的表达调控癌细胞机制以及干预其表达进而抑制肿瘤细胞转移的研究较少。本研究探讨利用小分子化合物抑制整合素表达来抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的可能。首先,对临床肝癌细胞患者癌组织和癌旁组织中的整合素β1的表达进行检测,发现其在癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。对TCGA肿瘤数据库的生物信息学分析结果同样显示,整合素β1的高表达与肝癌的分期(P=0.019)和预后(P=0.013)相关。通过筛选发现,苯胺嘧啶衍生物X-9可以抑制肝癌细胞中整合素β1的mRNA和蛋白质的表达(P<0.01)。细胞划痕愈合实验和细胞穿孔实验结果显示,苯胺嘧啶衍生物X-9能够抑制肝癌细胞的迁移和侵袭(P<0.01)。进一步的研究证实,在肝癌细胞中外源表达整合素β1可以逆转X-9对肝癌细胞迁移和侵袭的抑制;而在敲低整合素β1的细胞中,X-9对细胞的迁移和侵袭的抑制被消除。因此,鉴定出苯胺嘧啶衍生物X-9可以通过下调整合素β1表达,进而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。     

苯胺嘧啶衍生物X-9通过下调整合素β1表达抑制肝细胞癌迁移侵袭

整合素在许多肿瘤细胞中高表达,并且参与肿瘤细胞的侵袭转移。在肝细胞癌中,整合素β1被报导高表达,并促进肿瘤细胞的侵袭。目前,对于整合素的表达调控癌细胞机制以及干预其表达进而抑制肿瘤细胞转移的研究较少。本研究探讨利用小分子化合物抑制整合素表达来抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的可能。首先,对临床肝癌细胞患者癌组织和癌旁组织中的整合素β1的表达进行检测,发现其在癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P<0.05）。对TCGA肿瘤数据库的生物信息学分析结果同样显示,整合素β1的高表达与肝癌的分期（P=0.019）和预后（P=0.013）相关。通过筛选发现,苯胺嘧啶衍生物X09可以抑制肝癌细胞中整合素β1的mRNA和蛋白质的表达（P<0.01）。细胞划痕愈合实验和细胞穿孔实验结果显示,苯胺嘧啶衍生物X-9能够抑制肝癌细胞的迁移和侵袭（P<0.01）。进一步的研究证实,在肝癌细胞中外源表达整合素β1可以逆转X-9对肝癌细胞迁移和侵袭的抑制;而在敲低整合素β1的细胞中,X-9对细胞的迁移和侵袭的抑制被消除。因此,鉴定出苯胺嘧啶衍生物X-9可以通过下调整合素β1表达,进而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。     

MTA1 Overexpression Induces Cisplatin Resistance Innasopharyngeal Carcinoma by Promoting Cancer Stem Cells Properties

Themetastasis-associated gene 1 (MTA1) oncogene hasbeen suggested to be involved in the regulation of cancer progression. However, there is still no direct evidence that MTA1 regulates cisplatin (CDDP) resistance, as well as cancer stem cell properties. In this study, we found that MTA1 was enriched in CNE1/CDDP cells. Knock down of MTA1 in CNE1/CDDP cells reversed CSCs properties and CDDP resistance. However, ectopic expression of MTA1 in CNE1 cells induced CSCs phenotypes and CDDP insensitivity. Interestingly, ectopic overexpression of MTA1-induced CSCs properties and CDDP resistance were reversed in CNE1 cells after inhibition of PI3K/Akt by {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002. In addition, MTA1 expression and Akt activity in CNE1/CDDP cells was much higher than that in CNE1 cells. These results suggested that MTA1 may play a critical role in promoting CDDP resistance in NPC cells by regulatingcancer stem cell properties via thePI3K/Akt signaling pathway. Our findings suggested that MTA1 may be a potential target for overcoming CDDP resistance in NPC therapy.     

PBX3高表达促进食管鳞状细胞癌的侵袭和迁移（英文）

PBX3是PBX家族成员之一,它是机体生长发育所必需的蛋白质因子。当PBX3基因表达异常时,它可导致肿瘤的发生,促进其侵袭转移。PBX3的作用在其他肿瘤研究中已有了解,但其在食管癌中的作用尚不清楚。本研究旨在通过了解PBX3在食管癌细胞中的表达及其与临床病理参数和患者愈后的关系,以及对食管癌侵袭及转移的影响。对食管癌进行PBX3的临床与细胞学研究结果显示,PBX3表达与食管癌患者浸润深度和淋巴转移有关,与患者的年龄、性别、肿瘤分期无关。PBX3表达水平越高,食管癌的恶性程度越高。进一步通过PBX3基因转染食管癌细胞株证明,该基因可促进上皮间质转化,并增强转移侵袭特性。我们的研究结果提示,PBX3与食管鳞状细胞癌的侵袭、转移及愈后有关,其可能是通过影响食管鳞状细胞癌的上皮-间质转化,促进癌细胞的侵袭及迁移。所以,PBX3有可能作为评估食管鳞状细胞癌恶性程度的指标。     

重组人IL-18-EGF的双顺反子表达及其对NK细胞和肝癌细胞的影响

构建重组人IL-18-EGF肿瘤靶向分子双顺反子原核表达系统,研究重组人IL-18-EGF融合蛋白对人自然杀伤细胞（natural killer cell,NK细胞）和人肝癌细胞（SMMC-7721）的影响。构建重组人IL-18-EGF原核双顺反子表达系统pET28a（＋）-proIL-18-EGF-Caspase-4/BL21,重组蛋白经纯化后,作用于NK细胞,应用CCK-8法和ELISA试剂盒分别检测NK细胞的增殖情况和IFN-γ的分泌量。Cy3荧光标记IL-18-EGF检测融合蛋白与肿瘤细胞表面EGFR的结合情况。IL-18-EGF与NK细胞共同孵育24 h后,取培养上清液作用于人肝癌细胞SMMC-7721,分别使用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测IL-18-EGF对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。实验结果显示：重组人IL-18-EGF能加快NK细胞的增殖,促进NK细胞分泌IFN-γ;IL-18-EGF能与肿瘤细胞表面EGFR特异性结合;细胞划痕实验中,重组人IL-18-EGF组空白区域的抗填充能力高于对照组;Transwell小室实验中,12,24,48 h时IL-18-EGF组细胞穿膜数分别为94.6±2.9、101.8±4.0和116.2±4.5,均显著低于相应时间的对照组（分别为128.6±8.5、133.0±7.5和138.8±5.4）（P〈0.05）。以上结果表明,IL-18-EGF对人肝癌细胞SMMC-7721的迁移和侵袭能力有明显的抑制作用,能提高机体的免疫能力,有可能作为辅助药物运用于肝癌的治疗。