YAP蛋白核过表达与卵巢癌腹膜及淋巴结转移的相关性分析

目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)与卵巢癌腹膜及淋巴结转移的相关性。方法:选择148例原发性卵巢癌和30例正常卵巢石蜡切片标本,采用Western blot、免疫组化分析YAP蛋白在正常卵巢组织、非转移性卵巢癌组织及转移性卵巢癌组织中的表达,分析YAP蛋白在卵巢癌组织中的表达与临床病理特征的关系,并应用单因素及多因素logistics分析卵巢癌腹膜和淋巴结转移的独立危险因素。结果:YAP蛋白在正常卵巢组织、非转移性卵巢癌组织及转移性卵巢癌组织中的表达量依次增高,两两比较差异均有统计学差异(P0.05)。YAP蛋白核过表达与组织学分化、残余病灶、复发、腹膜转移以及淋巴结转移均显著相关(P0.05)。YAP蛋白核过表达是独立的影响卵巢癌腹膜(OR:5.443;95%CI:2.287-12.950;P0.001)和淋巴结转移(OR:4.477;95%CI:2.059-9.735;P0.001)的独立危险因素。结论:YAP基因核过表达与卵巢癌腹膜转移及淋巴结转移密切相关,有可能作为临床上预测卵巢癌腹膜及淋巴结转移的新的分子标记物。     

CCR9和CCL25蛋白在上皮性卵巢癌中表达及临床意义

目的:探讨CCR9和CCL25蛋白在不同卵巢组织中的表达及其与上皮性卵巢癌患者临床病理因素之间的关系。方法:通过组织芯片结合免疫组织化学法检测78例上皮性卵巢癌组织和30例正常卵巢组织中CCR9和CCL25表达水平,结合上皮性卵巢癌病人的临床病理资料,进行统计分析。结果:CCR9和CCL25在上皮性卵巢癌中高表达,在正常卵巢组织中低表达,二者的表达与上皮性卵巢癌的组织类型、患者年龄无显著相关(P0.05),而与淋巴结转移、组织学分级和临床分期有显著相关(P0.05);上皮性卵巢癌组织中CCR9与CCL25表达相关(P0.05)。结论:CCR9和CCL25在上皮性卵巢癌的发生发展中可能起重要作用,二者可能是上皮性卵巢癌治疗的一个潜在的分子靶点。     

微小RNA-21与PTEN在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:检测微小RNA-21(miR-21)和抑癌基因PTEN在上皮性卵巢癌组织中的表达,探讨二者的相关性及其与临床病理特征间的关系.方法:采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)检测48例上皮性卵巢癌组织、24例良性上皮性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织标本中miR-21表达.采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶(SP)免疫组化方法检测上述组织中PTEN蛋白表达,分析mir-21表达和PTEN表达的相关性及其与临床病理特征的关系.结果:茎环Real-time RT-PCR检测miR-21表达的敏感性和特异性良好;miR-21在卵巢癌组织中的相对表达量(4.849±1.813)显著高于良性卵巢肿瘤(1.133±0.291)及正常卵巢组织(P<0.01),PTEN在卵巢癌组织中阳性表达率为(41.66%),明显低于卵巢良性肿瘤(83.33%)及正常卵巢(100%).卵巢癌组织中miR-21表达量与PTEN阳性表达率存在显著负相关(r=-0.447,P<0.01).miR-21及PTEN表达随卵巢癌的临床分期和组织分级的进展分别呈上升及下降趋势,而且二者表达均与淋巴结转移相关(P均<0.01),而与组织病理类型无关.结论:miR-21在上皮性卵巢癌组织中的表达升高,可能通过负性调节PTEN表达在卵巢癌的发生发展中发挥致癌基因的作用,并且与卵巢癌的演进及不良预后密切相关.     

PDCD4和DNMT1在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义

目的:检测PDCD4和DNMT1在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、卵巢上皮性癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组化法检测20例正常卵巢、25例卵巢良性肿瘤、40例卵巢上皮性癌组织中PDCD4和DNMT1的表达情况,分析其与卵巢上皮性癌临床病理参数之间的关系。结果:正常及良性卵巢组织中PDCD4的阳性表达率明显高于卵巢癌组(P0.05),卵巢癌的FIGO分期越高,PDCD4的表达越低,卵巢癌的病理分化程度越低,PDCD4的表达也越低,PDCD4的表达与卵巢癌的组织类型、腹水、年龄、是否绝经无关。正常及良性卵巢组织中DNMT1的阳性表达率明显低于卵巢癌组(P0.05),卵巢癌的病理分化程度越低,DNMT1的表达越高,但其与卵巢癌的FIGO分期、组织类型、腹水、年龄、是否绝经均无关。卵巢癌中DNMT1的与PDCD4的表达呈显著负相关(P0.05)。结论:PDCD4和DNMT1在卵巢癌中的表达呈负相关,PDCD4的表达下调和DNMT1的表达上调可能在卵巢癌的发生及发展中起重要作用。     

上皮性卵巢癌组织中uPA及uPAR的表达(英文)

目的:研究uPA和uPAR在卵巢癌中的表达,分析其与卵巢癌的发展和预后的关系。方法:采用免疫组织化学法检测60例上皮性卵巢癌、20例交界性卵巢肿瘤及20例良性卵巢肿瘤组织中uPA、uPAR及表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:(1)uPA、uPAR、在上皮性卵巢癌中的表达率(75%,66.7%)明显高于交界性卵巢肿瘤(40%,30%)及良性卵巢肿瘤组织(30%,25%),差异均有统计学意义(uPAx2=22.078,P0.001;uPARx2=19.510,P0.05),而交界性卵巢肿瘤与良性卵巢肿瘤组织间差异无统计学意义(P0.05)。(2)uPA、uPAR在恶性卵巢肿瘤中阳性表达率与手术病理分期、组织分级和有无淋巴结转移有关;晚期癌组阳性表达率高于早期癌组(uPAx2=14.400,P0.05;uPARx2=9.6,P=0.002);低分化癌组的阳性表达率高于中高分化癌(uPAx2=15.002,P0.05;uPARx2=36.906,P0.05);有淋巴结转移癌组阳性表达率高于无淋巴结转移癌组(uPAx2=13.333,P0.05;uPARx2=15.313,P0.05);差异均有统计学意义;但是与癌症病理类型、病人年龄、肿瘤大小无关。uPA与uPAR的表达存在正相关。结论:在uPA和uPAR可通过促进血管生成和降解细胞外基质(基质)和基底膜,在肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。uPA及uPAR在上皮性卵巢癌组织中表达上调,支持这些因子在肿瘤浸润和转移中发挥重要作用,二者有可能作为预测上皮性卵巢癌预后的重要参考指标。     

趋化因子受体CCR3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探讨趋化因子受体CCR3在上皮性卵巢癌组织中的表达情况,以及其与卵巢癌临床病理特征的关系。方法:收集上皮性卵巢癌组织、良性上皮性卵巢肿瘤组织以及正常卵巢组织标本各30例,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量反转录聚合酶链反应[poly(A)-RT-qPCR]检测其CCR3的表达,并分析上皮性卵巢癌组织中CCR3的表达与患者临床病理特征之间的关系。结果:上皮性卵巢癌组织中CCR3的表达显著高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,差异有统计学意义(P0.05);且上皮性卵巢癌组织中CCR3的表达与患者的分期、组织分级及淋巴结转移均显著相关(P0.05)。结论:CCR3在上皮性卵巢癌组织中呈高表达,且在上皮性卵巢癌的发生和发展过程中均起着十分重要的作用。     

WT-1、Smac蛋白在上皮性卵巢癌中的表达和临床意义研究

目的:探讨WT-1和Smac蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色方法检测40例正常卵巢组织,40例卵巢上皮性良性肿瘤组织,60例全面分期手术治疗的上皮性卵巢癌组织中WT-1、Smac蛋白的表达,并分析WT-1、Smac蛋白的表达与上皮性卵巢癌临床病理特征的相关性及二者之间的相关性。结果:WT-1蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达明显高于正常卵巢组织或卵巢上皮性良性肿瘤组织(P0.05);Smac蛋白在上皮性卵巢癌组织中表达明显低于正常卵巢组织或卵巢上皮性良性肿瘤组织(P0.05)。上皮性卵巢癌组织中WT-1、Smac蛋白的表达与肿瘤临床分期、组织分化程度、淋巴结有无转移均显著相关(P0.05)。且上皮性卵巢癌中WT-1、Smac蛋白的表达呈明显负相关性(r=-0.35,P0.05)。结论:WT-1蛋白高表达或Smac蛋白低表达可能在上皮性卵巢癌的发生、发展中发挥重要作用,检测WT-1、Smac蛋白的表达有助于上皮性卵巢癌恶性程度的判断和预后评估。     

上皮性卵巢癌中Maspin蛋白与血管内皮生长因子-C的表达及其相关性

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中maspin蛋白与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的临床意义及其相关性。方法:采用免疫组化技术检测75例上皮性卵巢癌中maspin蛋白与VEGF-C的表达情况,以卵巢良性肿瘤及正常卵巢作为对照。结果:maspin和VEGF-C在上皮性卵巢癌中的阳性表达率分别为61.3%、82.7%,均明显高于卵巢良性肿瘤(13.3%、20%)和正常卵巢组织(0%、0%),maspin蛋白在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期高、组织学分级高、腹水形成和淋巴结转移有关;VEGF-C与FIGO分期高、淋巴结转移和腹水形成有关;上皮性卵巢癌中maspin蛋白与VEGF-C的表达成正相关。结论:maspin和VEGF-C在上皮性卵巢癌中表达上调,在卵巢上皮性癌的浸润、转移中起重要作用。     

Skp2和P27在上皮性卵巢癌中表达及其临床意义

目的:检测Skp2和P27在上皮性卵巢癌中的表达,分析Skq2和P27与临床病理特征间的关系,探讨二者在上皮性卵巢癌发生发展中的作用.方法:应用免疫组织化学SP法,检测69例上皮性卵巢癌、15例良性卵巢肿瘤以及15例正常卵巢组织中Skp2和P27的表达,分析Skp2和P27表达与上皮性卵巢癌临床病理参数的关系,及两者的相关性.结果:上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织Skp2和P27表达阳性率各为42.02%,26.67%、6.67%和47.82%,66.67%、86.67%,差异有统计学意义(P<0.05).Skp2的表达与临床分期和病理组织学分级显著相关,与患者年龄、病理类型、有无淋巴结转移和肿瘤大小无显著相关.P27的表达与临床分期、有无淋巴结转移和病理组织学分级显著相关,与患者年龄、病理类型和肿瘤大小无显著相关.Skp2和P27在上皮性卵巢癌中表达呈显著负相关,相关系数r=-0.463,(P<0.01).结论:Skp2与P27呈负相关,二者表达可能与上皮性卵巢癌的发生发展有关.     

特异AT序列结合蛋白1在卵巢癌的表达及临床病理学意义

目的:检测上皮性卵巢癌中特异AT序列结合蛋白1(Special AT-rich sequence-bindingprotein 1,SATB1)的表达,探讨SATB1表达与卵巢癌的发生,进展及转移的关系及意义.方法:以实时荧光定量RT-PCR和免疫组化方法检测91例上皮性卵巢癌组织、13例卵巢交界性囊腺瘤及8例正常卵巢组织中SATB1mRNA和蛋白的表达,分析SATB1基因表达与临床病理参数的相关性.结果:上皮性卵巢癌组织和交界性囊腺瘤组织中SATB1 mRNA表达量分别为正常卵巢组织的6.97倍和5.70倍,差异有统计学意义(P＜0.05).SATB1 mRNA表达水平随着卵巢癌分期升高而增加:Ⅰ期,Ⅱ期和Ⅲ期分别为正常卵巢组织的5.31倍,6.67倍和8.04倍(P＜0.05),并且在淋巴结转移组表达明显高于无转移组(P＜0.05).免疫组化也显示SATB1蛋白在上皮性卵巢癌中表达高于正常卵巢组织,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:SATB1的表达水平可能与上皮性卵巢癌发生,进展及转移有关.     

上皮性卵巢癌组织miR-338-3p、miR-1294的表达及临床意义

摘要 目的：探讨上皮性卵巢癌组织中微小RNA（miR）-338-3p、miR-1294表达与患者临床病理参数的关系,并分析其表达对上皮性卵巢癌预后的影响。方法：收集2010年6月～2015年6月我院行手术治疗的上皮性卵巢癌患者的石蜡组织样本（癌组织和癌旁正常组织）,实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测组织样本中miR-338-3p、miR-1294的表达情况;分析癌组织中miR-338-3p、miR-1294表达与患者临床病理参数的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析miR-338-3p、miR-1294表达与患者预后的关系;Cox回归模型分析上皮性卵巢癌患者的预后影响因素。结果：与癌旁正常组织相比,上皮性卵巢癌组织中miR-338-3p、miR-1294表达均降低（均P<0.05）;miR-338-3p表达与组织学分级、淋巴结转移、FIGO分期相关（均P<0.05）;miR-1294表达与肿瘤直径、淋巴结转移、FIGO分期相关（均P<0.05）。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-338-3p低表达组患者、miR-1294低表达组患者的预后较差（均P<0.05）。Cox回归模型分析结果显示,淋巴结转移、较高FIGO分期、miR-338-3p低表达、miR-1294低表达是上皮性卵巢癌预后的危险因素（均P<0.05）。结论：上皮性卵巢癌组织中miR-338-3p、miR-1294均低表达,且均与较差临床病理参数、预后不良相关;miR-338-3p、miR-1294可能是上皮性卵巢癌患者预后预测的潜在指标。     

抑癌基因PTEN 在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义*

目的:通过免疫组织化学方法检测PTEN基因在正常甲状腺组织、甲状腺良性肿瘤组织、甲状腺乳头状癌癌组织中的表达水平并进行比较,探讨其对甲状腺乳头状癌诊断和治疗的意义。方法:采用SP免疫组化方法,用已知阳性组织做阳性对照,以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗做阴性对照,分别作HE染色和免疫组织化学染色。结果:PTEN蛋白在三组组织中的表达差异具有显著性(P<0.001);正常甲状腺组织、甲状腺良性肿瘤组织中的阳性率分别为100%和82.5%,均显著高于甲状腺癌组织中的45%(P<0.05),即PTEN在甲状腺癌中表达显著降低;PTEN在甲状腺乳头状癌淋巴结转移组和无淋巴结转移组阳性表达率分别为15%和60%,差异有显著性(x2=10.91,P=0.001);PTEN在甲状腺乳头状癌在包膜侵犯组和无侵犯组的阳性表达率分别为25.93%和60.61%,差异有显著性(x2=7.22,P=0.007);PTEN在甲状腺癌淋巴结转移组和包膜侵犯组的阳性表达强度显著低于无淋巴结转移和包膜侵犯组(P<0.01),有统计学意义。结论:PTEN基因表达的降低在甲状腺癌的发生和转移过程中起重要作用。     

Clinicopathological Characteristics of Gynecological Cancer Associated with Hypoxia-Inducible Factor 1α Expression: A Meta-Analysis Including 6,612 Subjects

BackgroundGynecological cancer is characterized by tumor hypoxia. However, the role of hypoxia-inducible factor 1α (HIF-1α) in gynecological cancer remains unclear.MethodElectronic databases including Cochrane Library, PUBMED, Web of Knowledge and clinical trial registries were searched from inception through October 2014 for published, case-control studies assessing the association between HIF-1α and the clinicopathological characteristics of gynecological cancer. We pooled results from 59 studies using fixed or random-effects models and present results as odds ratios (ORs) following the PRISMA guidelines.ResultsOur meta-analysis, which included 6,612 women, demonstrated that the expression of HIF-1α was associated with the clinicopathological characteristics of gynecological cancer. The expression of HIF-1α in cancer or borderline tissue was significantly higher than that in normal tissue (cancer vs. normal: odds ratio (OR) =9.59, 95% confidence interval (CI): 5.97, 15.39, p<0.00001; borderline vs. normal: OR=4.13, 95% (CI): 2.43, 7.02, p<0.00001; cancer vs. borderline: OR=2.70, 95% (CI): 1.69, 4.31, p<0.0001). The expression of HIF-1α in III‒IV stage or lymph node metastasis was significantly higher than that in I‒II stage or that without lymph node metastasis, respectively (OR=2.66, 95% (CI): 1.87,3.79, p<0.00001; OR= 3.98, 95% (CI): 2.10,12.89, p<0.0001). HIF-1α was associated with histological grade of cancer (Grade 3 vs. Grade 1: OR=3.77, 95% (CI): 2.76,5.16, p<0.00001; Grade 3 vs. Grade 2: OR=1.62, 95% (CI): 1.20,2.19, p=0.002; Grade 2 vs. Grade 1: OR=2.34, 95% (CI): 1.82,3.00, p<0.00001),5-years disease free survival (DFS) rates (OR=2.93, 95% (CI):1.43,6.01, p=0.001) and 5-years overall survival (OS) rates (OR=5.53, 95% (CI): 2.48,12.31, p<0.0001).ConclusionHIF-1α is associated with the malignant degree, FIGO stage, histological grade, lymph node metastasis, 5-years survival rate and recurrence rate of gynecological cancer. It may play an important role in clinical treatment and prognostic evaluation.     

Kallistatin在乳腺癌中表达的临床病理意义

目的:探讨Kallistatin在乳腺癌中表达的临床病理意义及预后价值。方法:收集乳腺癌档案蜡块及临床资料,分为无淋巴结转移的原发灶(NMBT),有淋巴结转移的原发灶(PBT)及配对的淋巴结转移灶(PMLN),应用免疫组化技术检测Kallistatin表达,统计学分析。结果:结果显示kallistatin在PBT组的表达高于NMBT组合和PMLN组。kallistatin的表达与组织学类型(P=0.003)、淋巴结状态(P0.001)、临床分期(P=0.002)、雌激素受体(ER)表达(P=0.046)有显著相关性。kallistatin在浸润性小叶癌中的阳性表达率高于浸润性导管癌,在PBT组的阳性表达率显著高于NMBT,临床分期越晚期阳性表达率越高,在ER阳性的病历中表达更高。Kaplan-Meier分析显示,kallistatin的阳性表达是乳腺癌患者无病生存时间短(P=0.008)和总生存时间短(P=0.006)的危险因素。在浸润性乳腺导管癌患者中,kallistatin的阳性表达与生存时间短有关(P=0.026)。还与ER阳性表达患者生存时间较短有关(P=0.010)。结论:Kallistatin在乳腺癌中的表达有较为复杂的临床病理意义,其表达提示预后不良。     

PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测80例胃癌组织、36例正常胃黏膜组织、30例肠上皮化生组织及31例异型增生组织中PIG11、Caspase-3蛋白的表达水平,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系及两者之间的相关性。结果:胃癌组织中PIG11、Caspase-3蛋白的阳性表达率均显著低于正常胃黏膜、肠上皮化生及异型增生组织(P0.01);PIG11、Caspase-3蛋白表达水平与胃癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移及远处转移密切相关(P0.05),但与患者的年龄、性别及肿瘤的浸润深度无关(P0.05);PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.859,P0.01)。结论:PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中明显表达下调,且与胃癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移及远处转移密切相关,可能作为胃癌预后评估的参考指标。PIG11表达下调可能通过抑制Caspase-3的表达促进胃癌的发生和发展。     

宫颈鳞状细胞癌中ADAM17 的表达及其临床意义

目的:探讨去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法:运用免疫组织化学法分别检测正常宫颈上皮、宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内瘤样变组织中ADAM17的表达,并分析其与宫颈癌临床分期及淋巴结转移的相关性。结果:ADAM17在正常宫颈上皮组织切片中无明显表达,在宫颈上皮内瘤样变组织中少部分表达,呈浅黄色,在宫颈鳞状细胞癌中癌细胞大量表达,ADAM17表达呈棕褐色,数量较多且浓染。不同临床分期的宫颈鳞状细胞癌组织中ADAM17的阳性表达率比较存在显著统计学差异(P0.05),且随临床分期的上升,ADAM17的表达逐渐升高;有淋巴结转移的宫颈鳞状细胞癌组织中ADAM17的阳性表达率显著高于无淋巴结转移的宫颈鳞状细胞癌组织,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:ADAM17蛋白在宫颈鳞状细胞癌组织中呈异常高表达,且与宫颈鳞状细胞癌的临床分期和淋巴结转移密切相关,通过检测ADAM17蛋白的表达可能有助于宫颈鳞状细胞癌的诊断、治疗和预后预测。     

膀胱癌组织CALD1 mRNA表达水平与临床病理特征和预后的关系分析

摘要 目的：探究膀胱癌组织钙调蛋白结合蛋白（CALD1）信使RNA（mRNA）表达水平与临床病理特征和预后的关系。方法：选取2015年7月-2017年7月于我院收治并确诊的111例膀胱癌患者为研究对象,收集癌组织及癌旁正常组织,采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测CALD1 mRNA在膀胱癌组织与癌旁正常组织中的表达差异,分析CALD1 mRNA相对表达量与临床病理特征的关系。对患者进行5年随访,分析CALD1 mRNA相对表达量与预后的关系。结果：CALD1 mRNA在膀胱癌组织的相对表达量显著高于癌旁正常组织（P<0.05）;CALD1mRNA相对表达量与膀胱癌患者组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关（P<0.05）;111例患者出院后随访5年,4例失访,107例患者获得随访,CALD1低表达组和高表达组的5年总生存率分别为72.34%（34/47）、50.00%（30/60）（P＜0.05）,CALD1低表达组5年总生存率高于高表达组;Cox比例风险回归模型分析显示,组织低分化程度、TNM高分期、淋巴结转移、CALD1mRNA高表达是影响膀胱癌患者预后的危险因素（P<0.05）。结论：CALD1在膀胱癌组织中呈高表达,CALD1mRNA相对表达量与患者组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后相关。     

上皮性卵巢癌中Maspin蛋白与血管内皮生长因子-C的表达及其相关性

目的：探讨上皮性卵巢癌组织中maspin蛋白与血管内皮生长因子-C（VEGF-C）表达的临床意义及其相关性。方法：采用免疫组化技术检测75例上皮性卵巢癌中maspin蛋白与VEGF-C的表达情况,以卵巢良性肿瘤及正常卵巢作为对照。结果：maspin和VEGF-C在上皮性卵巢癌中的阳性表达率分别为61.3%、82.7%,均明显高于卵巢良性肿瘤（13.3%、20%）和正常卵巢组织（0%、0%）,maspin蛋白在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期高、组织学分级高、腹水形成和淋巴结转移有关;VEGF-C与FIGO分期高、淋巴结转移和腹水形成有关;上皮性卵巢癌中maspin蛋白与VEGF-C的表达成正相关。结论：maspin和VEGF-C在上皮性卵巢癌中表达上调,在卵巢上皮性癌的浸润、转移中起重要作用。