细菌质粒的消除*

利用化学消除剂或改变生长条件可以消除细菌中的质粒。除宿主菌的特性及其所含质粒分子量大小之外 ,消除率还与消除剂浓度、作用时间有关。嵌合染料适用于消除大肠杆菌中的质粒。十二烷基硫酸钠对具有性纤毛的细菌作用效果较好。适当提高培养温度可消除一些细菌中的质粒 ,胸腺嘧啶限量法仅适用于其营养缺陷型菌株的质粒消除。利用原生质体的形成与再生及反复冻融菌体均可消除细菌中的质粒。     

细菌内源质粒消除研究进展北大核心CSCD

为了探究细菌内源质粒的功能,包括细菌耐药性、细菌共生、细菌荚膜形成、细菌的重金属抗性等方面,需要对细菌的内源质粒进行消除。本文综述了基于物理学、化学及分子生物学的细菌内源质粒消除方法,阐明了质粒消除的原理。结合笔者自身的研究对质粒消除技术进行了展望。     

紫色非硫细菌质粒的制备与性质

介绍一种适于紫色非硫细菌质粒的制备方法,该法简单,易操作,质粒ＤＮＡ纯度好,收率高,通过在加富培养基上连续传代数次,质粒ＤＮＡ可自行消除。     

中药对R质粒消除作用的研究

由于 R质粒的传播和耐药菌株的增加 ,临床抗菌药物的敏感性下降 ,为临床治疗带来极大的困难。人们试图寻找出一种有效的方法把 R质粒从宿主菌中消除掉 ,使其重新恢复对药物的敏感性。许多理化因素均可消除质粒 ,如高温培养、紫外线照射 ,常用的化学消除剂有 SDS、溴化乙啶与口丫啶橙等。但由于这些因素对人体均有较强的毒副作用 ,不能投入临床应用。目前耐药 R质粒的消除仍是一个国际性难题 ,到现在为止还没有一个较好的可供体内使用的消除 R质粒的方法。而中草药具有天然、低毒甚至无毒的特点 ,人们希望从我国传统中药中选择出非常适合…     

细菌的抗药性质粒

细菌的抗药性质粒胡焱（安徽省铜陵市第九中学２４４０１１）１９２９年Ａ．Ｆｌｅｍｉｎｇ偶然发现了青霉素,１９４０年Ｅ．Ｂ．Ｃｈａｉｎ等人从青霉菌的培养物中分离提纯出青霉素结晶。自此抗菌素得到了广泛的应用。然而某些致病菌随之出现了抗药性。在研究细菌抗药性...     

细菌质粒的稳定性

引言 质粒稳定性在微生物遗传工程研究和生产中占有十分重要的地位,只有构建高表达同时高稳定的重组质粒才能达到高产的目的。 一般的说,在没有选择压力时培养含质粒细胞若干代,出现无质粒细胞即是质粒不稳定。     

鱼类病原菌中R^＋质粒的检出及其特性

本文研究了５个属的１５株鱼类病原菌对１７种抗菌药物的耐药性,其中,对β－内酰胺类和红霉素的耐药率最高,对妥霉素最敏感。以Ｅ．ｃｏｌｉＫ－１２ＲＣ８５为受体菌,鱼类病原菌为供体菌,采用细菌接合试验,从耐氨苄青霉素,四环素和磺胺的嗜水气单胞菌ＣＪ２６株中检测到一株耐四环素和磺和磺胺的可自身传递的Ｒ质粒ＰＷＨ９６０１。它对四环素的抗性可被四环素类药制所诱导。ＰＷＨ９６０１上的耐药基因在供体菌和受体菌中的     

作为宿主系统的几株乳酸菌的表型特征

目的：研究乳酸菌载体－宿主系统。方法：采用涂片染色和形态特征观察,用鉴别生化实验如过氧化氢酶实验,碳水化合物发酵产酸实验,精氨酸水解实验及抗生素抗性实验等对含有pMG36e质粒的乳酸菌MG1363,乳球菌IL1403和乳杆菌ATCC4356进行研究鉴定。结果：乳酸乳球菌乳脂亚种MG1363,乳酸乳球菌乳酸亚种IL1403含有质粒pMG36e的MG1363致及嗜酸乳杆菌ATCC4356其表型特征分别与伯杰氏手册中相应细菌特征一致,质粒pMG36e含有红霉素抗性基因,结论：此乳酸菌宿主一载体系统可用载体来源的红霉素抗性进行筛选,用于外源基因在乳酸菌中克隆和表达的研究。     

62种细菌基因组中密码子碱基位置上碱基分布的差异性及相关性

应用生物信息学方法,对已完成测序的62种细菌基因组进行：1．同一密码子碱基位置上不同碱基分布频率的比较;2．不同密码子碱基位置上同一碱基分布频率的比较。结果显示：1．三个密码子碱基位置上及四种碱基的分布频率差异存在显著性;2．三个密码子碱基位置上的四种碱基的分布频率显著相关。结论提示,在细菌的进化过程中,任一密码子碱基位置上任一碱基的分布有可能受到所处密码子碱基位置及其他三种碱基分布的影响。     

一些细菌和真菌的解磷能力及其机理初探

4株细菌和8株真菌培养6天后,发现培养液中有机酸含量大幅度增加,PH大幅度地下降,磷的含量大幅度增加,真菌比细菌表现出更强的溶解磷矿粉的能力,不同的微生物分泌有机酸的数量和种类差别很大,菌分泌的有机酸种类比细菌要多。但是,培养液中有机酸总量与解磷量之间并不存在显的相关性。     

PCR直接检测龈下菌斑主要可疑牙周致病菌

目的：应用PCR方法直接检测龈下菌斑主要可疑牙周致病菌与牙周病活动部位的关系,探讨其方法的可行性并探讨其主要可疑牙周致病菌的分布规律。方法：应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)直接检测龈下菌斑主要可疑致病菌16s RNA保守区域片段。40名受试者包括牙周病患者20人,每人同口取一个牙周病活动部位,一个相对健康或牙周病静止对照部位;成人健康者20人,每人各取一个标本。结果：龈下菌斑5种可疑牙周致病菌在牙周病活动部位的检出率牙龈卟啉菌为86％,福赛类杆菌为95％,螺旋体为86％,中间普氏菌和黑色普氏菌分别为95％和33％,均显著高于同口部位对照组和健康对照组。结论：PCR直接检测菌斑牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、福赛类杆菌、齿密螺旋体及黑色普氏菌匀与牙周炎活动部位相关。     

重症监护患者病原菌感染及耐药性分析

目的：了解重症监护患者感染的病原菌及其耐药特点,为临床防治感染提供依据。方法：对我院ICU1998年1月-2000年1月所有分离的细菌菌株、真菌菌株及细菌耐药性进行回顾性调查。结果：医院内感染仍以G^-菌为主占83.3%,其次为真菌11.1%,G^ 菌5.5%。G^-菌以不动杆菌属为主,占26.7%。G^ 菌以金黄色葡萄球菌（金葡菌）为主。金葡菌中耐苯唑青霉素的金葡萄（MRSA）占66.6%,表皮葡萄球菌（表葡萄）中耐苯唑青霉素的表葡菌（MRSE）占33.3%。真菌以白色念珠菌为主占80.0%。在细菌耐药性方面,G^-菌对泰能的耐药率最低为2.6%。结论：重症监护患者感染病原菌以G^-菌为主,真菌和G^ 菌与应引起重视,且大多数病原菌耐药率较高,使临床经验性选择抗生素治疗医院感染非常困难。     

产细菌素乳酸菌的筛选及体外抑菌试验

从健康鸡、兔、仔猪肠道内容物及新鲜粪便中分离到4l株乳酸菌,通过单层琼脂平板扩散实验,筛选出5株有明显抑菌活性代谢产物的乳酸菌,其中4株属于乳杆菌属,l株属于链球菌属。排除酸的干扰后,离心发酵液对指示菌仍有抑菌活性,用胰蛋白酶和本瓜蛋白酶处理后抑菌活性明显降低,用过氧化氢酶作用上清液,抑菌效果不变,说明过氧化氢未起作用,从而得知抑菌物质中有蛋白质类细菌素。将离心发酵液分别调pH值为2．0、3．0、4．0、5．0、6．0、7．0,做抑菌试验,试验结果证明：所分离的5株乳酸菌在pH2．0,3．0,4．0时均有较强的抑菌活性,且MD菌株在pH7．0时抑菌活性亦较强,这进一步排除了酸的作用。每周重复一次,抑菌结果完全一致,但至第5周时,抑菌现象完全消失,说明抑菌物质随时间的延长而失活,起抑菌作用的物质不是有机酸。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的种类及耐药分析

目的：为预防和治疗质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBL）细菌感染提供依据。方法：采用E-test法对可疑细菌进行ESBL检测,用K-B法做药物敏感试验,用WHONET4进行分析。结果：在890株革兰阴性杆菌中检出ESBL44株,其中大肠埃希菌18株、肺炎克雷伯菌10株、阴沟肠杆菌9株、费劳地枸椽酸杆菌3株、嗜水气单胞菌2株、鼠伤寒沙门菌1株、液化沙雷菌1株,对亚胺培菌、呋喃妥因、阿米卡星、环丙沙星的敏感率分别为100%、68.2%、29.5%、25.0%。结论：产ESBL细菌分布广泛、阳性率高、易借助耐药质粒传播,具有较高的交叉耐药性和多重耐药性。     

Bacterial conjugation betweenEscherichia coli andPseudomonas spp. donor and recipient cells in soil

Summary Experiments conducted in microcosms containing loam soil samples inoculated with eitherE. coli orPseudomonas spp. donor and recipient cells showed that bacterial cells survived and conjugated over a 24-h incubation period.E. coli transconjugants were detected 6 h after donor and recipient strains were introduced into sterile soil samples. In non-sterile soil samples, transconjugants were detected between 8 and 24 h incubation.Pseudomonas transconjugants were recovered from sterile soil samples between 6 and 12 h after their introduction and as early as 2 h in non-sterile soil. The results show that genetic interactions occur in non-sterile soil in relatively short periods of time at relatively high transfer frequencies (10^–3 to 10^–4). Studies on genetic interactions in soil are becoming necessary in risk assessment/environmental impact studies prior to the release of genetically engineered or modified organisms into uncontained environments.     

Subdivision of Salmonella enteritidis PT 4 by pulsed-field gel electrophoresis: Potential for epidemiological surveillance

Abstract The capacity to reduce nitrate (NIT⁺ character) of wild-type and mutant strains of the purple nonsulfur bacterium Rhodobacter capsulatus was analysed by the methods of plasmid genetics and by DNA-DNA hybridization techniques. By conjugative introduction of the endogenous 115-kb plasmid of strain AD2 into a plasmid-free NIT⁻ mutant of the same strain the missing assimilatory nitrate reductase activity was restored. By analogous experimental techniques, the capacity to reduce nitrate was also temporarily established in the Rb. capsulatus NIT⁻ wild-type strain B10. DNA-DNA hybridization experiments with the narGHIJ operon of Escherichia coli and napA of Alcaligenes eutrophus yielded positive signals with an 11-kb Eco RI fragment of the AD2 plasmid.