中药通过cAMP-磷酸二酯酶介导的信号调节炎症（英文）

炎症是保护人体免受有害刺激的一种防御机制.然而,失控的炎症可导致局部或系统性组织损伤.研究表明,中药可以通过抑制cAMP-磷酸二酯酶(PDEs)活性发挥抗炎作用.本文综述了cAMP-PDEs选择性中药介导的cAMP对多种炎症信号通路中关键蛋白的调节作用,主要包括对NF-κB、MAPKs (p38、ERK或JNK)、TLR、My D88和STAT3的抑制作用以及对Nrf2、HO-1、AMPK和PPARγ的激活作用.其中,对NF-κB的抑制作用是cAMP-PDEs选择性中药最重要的信号转导通路.     

高效液相色谱测定血小板cAMP-磷酸二酯酶活力

本文报道了离子交换高效液相色谱-紫外检测磷酸二酯酶(PDE)活力的方法。本方法的回收率为93.02±2.09％,重复性CV为3.16％,5’-AMP在17.0—90.7pmol/10μl、cAMP在138—1104pmol/10μl浓度范围内,相关系数分别为0.9986和0.9950。用5’-AMP生成率和cAMP的转化率表达PDE活力,两者吻合。本方法能灵敏地反映茶碱对PDE的抑制作用。     

2'-'5-三腺苷酸对巨噬细胞腺苷酸环化酶和cAMP-磷酸二酯酶活性的影响

1989年,我们曾首次证实干扰素作用介导物pppA2＇p5＇A2＇p5＇A(2＇-5＇-三腺苷酸,2＇-5＇P_3A_3)能引起巨噬细胞中cAMP,cGMP水平升高,表明这两种环核苷酸在传递干扰素信息中起着重要作用。在上述研究的基础上,本研究观察了2＇-5＇P_3A_3对腺苷酸环化酶(AC)和cAMP-磷酸二酯酶(cAMP-PDE)两种酶的活性影响,结果发现,1×10~(-6)mol/L的2＇-5＇P_3A_3可显著增加AC的活性,而对cAMP-PDE活性沒有显著影响,这说明2＇-5＇P_3A_3引起的细胞内cAMP水平的升高是由于激活AC而使其生成增多,而不是抑制cAMP-PDE而使其降解减少的结果。     

磷酸二酯酶研究进展

细胞内ｃＧＭＰ是独立的信使分子,参与细胞内多种功能的调节。普遍存在于细胞内的鸟苷酸环化酶(ｇｕａｎｙｌａｔｅｃｙｃｌａｓｅ,ＧＣ)催化ＧＴＰ生成ｃＧＭＰ。ＧＣ分为膜结合性酶和胞浆可溶性酶两种同工酶。ＮＯ是可溶性ＧＣ的激活剂,可促进ｃＧＭＰ的生成,使细胞内ｃＧＭＰ水平升高,进而使血管扩张。早在19世纪70年代,人们就发现有机硝酸酯对缺血性心脏病有良好的治疗作用,但不了解其作用机理。ＮＯ和ｃＧＭＰ的发现,揭示了硝基类扩血管药物的作用机理。无论膜型ＧＣ或胞浆型ＧＣ催化生成的ｃＧＭＰ,其水解都是由磷酸二酯酶(ＰＤＥ)催…     

环核苷酸磷酸二酯酶的研究进展

环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ）有五类同工酶,它们的结构相似,但各具有不同的生化特性及生理功能,它们的调节方式亦各异。目前开发的许多选择性ＰＤＥ同工酶抑制剂有可能成为平喘药、强心药、血管扩张药、抗血栓药与抗抑郁药。     

磷酸二酯酶7及其抑制剂

磷酸二酯酶7(phosphodiesterase7, PDE7)作为体内特异性水解第二信使环腺苷一磷酸（cyclic adenosine monophosphate, cAMP）的一类蛋白水解酶,通过调 控组织细胞内cAMP水平及机体信号传导活动,参与了体内多种疾病的发生发展过 程.PDE7主要分布于前炎症细胞及免疫细胞.最新研究表明,PDE7作为一个新的潜在的抗动脉粥样硬化及抗炎症免疫类药物的新靶点,其抑制剂可能在研究及治疗动脉粥样硬化及慢性阻塞性肺病等免疫炎症类疾病方面具有重要意义. 本文简述PDE7基因结构、生物学功能以及其抑制剂研究,并重点就其与疾病之间联系做一综述.     

磷酸二酯酶5参与平滑肌功能调节的机制

磷酸二酯酶5(phosphodiesterase type 5,PDE5)又称对环鸟苷酸特异的磷酸二酯酶(cGMP-specific phosphodiesterase),广泛分布于机体的平滑肌细胞中,通过对细胞内特定区域的cGMP水平的调节,参与平滑肌(收缩、舒张)状态的快速调控.现对PDE5的基因表达和酶活性的调控方式,亚细胞分布,以及在平滑肌中的调节机制和药理应用进行综述.     

青藤碱通过AMPK/SIRT1信号通路介导糖酵解抑制类风湿性关节炎大鼠炎症反应

研究青藤碱通过腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK)/沉默信息调节因子1(silent information regulators 1,SIRT1)信号通路介导糖酵解抑制类风湿性关节炎大鼠炎症反应的作用机制。将大鼠随机分为对照组、模型组、青藤碱组和青藤碱+AMPK抑制剂组。测量各组大鼠足趾肿胀程度;比较关节炎指数;ELISA法检测血清中炎症因子水平,包括白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α);HE染色检测滑膜组织病理学变化;分光光度法检测滑膜组织中乳酸含量;Western blot法检测滑膜组织中AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、SIRT1、丙酮酸激酶肌肉亚型M2(pyruvate kinase muscle isozyme M2,PKM2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha, HIF-1α)蛋白表达。结果显示：和对照组比较,模型组大鼠足趾肿胀程度、关节炎指数评分、血清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量、乳酸含量及滑膜组织中HIF-1α、PKM2、LDHA蛋白表达均明显升高,p-AMPK/AMPK比值和SIRT1蛋白表达明显降低(P<0.05);和模型组比较,青藤碱组大鼠足趾肿胀程度、关节炎指数评分、血清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量、乳酸含量及滑膜组织中HIF-1α、PKM2、LDHA蛋白表达均明显降低,p-AMPK/AMPK比值和SIRT1蛋白表达明显增加(P<0.05);和青藤碱组比较,青藤碱+AMPK抑制剂组大鼠足趾肿胀程度、关节炎指数评分、血清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量、乳酸含量及滑膜组织中HIF-1α、PKM2、LDHA蛋白表达均明显升高,p-AMPK/AMPK比值和SIRT1蛋白表达明显降低(P<0.05)。这些结果说明青藤碱可下调类风湿性关节炎大鼠糖酵解活性,抑制炎症水平,改善类风湿性关节炎症状,其作用机制可能和激活AMPK/SIRT1信号通路有关。     

中药治疗溃疡性结肠炎所涉信号通路研究进展

溃疡性结肠炎是一种非特异性、病因未明的结肠黏膜慢性炎症性疾病,由遗传易感性、环境因素、异常免疫应答等多种因素所致。目前治疗溃疡性结肠炎的药物以氨基水杨酸类、皮质类固醇、免疫抑制剂等为主,但其长期使用存在药物毒性、过敏反应等副作用,而我国传统中药治疗溃疡性结肠炎表现出疗效显著、复发率低、毒副作用小等明显优势。综述中药治疗溃疡性结肠炎涉及6 种关键信号通路（NF-κB、TLR4-MyD88-NF-κB、MAPK、JAK/STAT、PI3K-AKT-mTOR 以及Wnt 和Notch）及相关新信号通路的研究进展,为中药治疗溃疡性结肠炎作用机制的深入研究提供新的思路。     

中药网络药理学研究中的生物信息学方法

为了更有效地治疗癌症、心血管疾病、免疫系统疾病等复杂疾病,基于分子网络的多靶点药物发现理念逐渐成为一种新的趋势,而中药整体、辨证、协同的用药观再一次引起了药物发现领域的极大兴趣。中药在治疗复杂慢性疾病方面有确切的疗效和较小的毒副作用。中药网络药理学从分子网络调控的水平上阐明中药的作用机制,为多靶点药物发现提供有益的启示和借鉴,并有可能从临床有效的中药反向开发现代多组分、多靶点新药。针对基于生物分子网络的中药药理学研究路线中的4 个步骤,介绍近年来中药网络药理学研究中相关的生物信息学方法。     

姜黄素通过调节NF-κB/NLRP3通路减轻LPS诱导小胶质细胞神经炎症损伤

目的研究姜黄素对脂多糖（LPS）诱导的神经细胞炎症的抑制作用,并探讨姜黄素抑制炎症的分子机制。 方法以小胶质细胞（BV2）为研究对象,对照不做任何干预,模型组给予100 ng/mL LPS干预24 h构建神经炎症细胞模型,1、5、10 μmol/L姜黄素+ 100 ng/mL LPS干预24 h,应用细胞免疫荧光法检测BV2细胞内白细胞介素6 （IL-6）、IL-10、p-NF-κB、NLRP3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平;应用Western blot检测NF-κB/NLRP3信号通路蛋白表达水平;采用ELISA法检测各组细胞上清肿瘤坏死因子α （TNF-α）、IL-1β和iNOS含量。给予NF-κB抑制剂BAY 11-7082后,检测BV2细胞内IL-6、IL-10、Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。实验数据采用t检验、单因素方差分析和Dunnett-t检验方法分析。 结果与对照比较,模型组炎症因子TNF-α（398.80 ± 11.39比113.00 ± 5.93）、IL-1β （592.40 ± 11.32比206.70 ± 6.81）、IL-6 （1.73 ± 0.09比0.99 ± 0.03）、iNOS（88.39 ± 2.14比32.48 ± 1.71）、p-NF-κB （1.92 ± 0.02比1.02 ± 0.05）、NLRP3蛋白表达水平（10.33 ± 0.61比1.02 ± 0.05）和凋亡相关蛋白Bax表达水平（2.68 ± 0.10比1.05 ± 0.08）升高,IL-10蛋白表达水平（0.82 ± 0.03比1.01 ± 0.06）和Bcl-2蛋白表达水平（0.70 ± 0.02比1.11 ± 0.06）降低（P均< 0.05）。Western blot结果表明,与对照比较,模型组p-NF-κB （2.65 ± 0.06比1.04 ± 0.05）和NLRP3蛋白表达水平（4.380 ± 0.08比1.07 ± 0.04）升高（P < 0.001）。与模型组相比,高浓度姜黄素处理后TNF-α （207.90 ± 7.37比398.80 ± 11.39）、IL-1β （405.40 ± 6.56比592.40 ± 11.32）、IL-6 （1.09 ± 0.05比1.73 ± 0.09）、iNOS （39.52 ± 1.32比88.39 ± 2.14）、p-NF-κB （01.21 ± 0.05比1.92 ± 0.02）和NLRP3蛋白表达水平（1.51 ± 0.11比10.33 ± 0.61）降低,IL-10蛋白表达水平（2.61 ± 0.03比0.82 ± 0.03）升高;与模型组相比,高浓度姜黄素处理后Bax蛋白表达水平（0.80 ± 0.04比2.68 ± 0.10）降低,Bcl-2蛋白表达水平（1.93 ± 0.02比0.70 ± 0.02）升高（P < 0.001）。与模型组相比,NF-κB抑制剂作用后,IL-6蛋白表达水平（0.88 ± 0.06比2.70 ± 0.12）和Bax蛋白表达水平（1.14 ± 0.04比3.63 ± 0.16）降低,IL-10蛋白表达水平（1.58 ± 0.03比0.52 ± 0.04）和Bcl-2蛋白表达水平（1.48 ± 0.11比0.53 ± 0.05）升高（P均< 0.001）。Western blot结果表明,与模型组相比,1、5、10 μmol/L姜黄素处理后p-NF-κB和NLRP3蛋白表达水平降低,且呈浓度依赖性（0.40 ± 0.02比2.65 ± 0.06、0.21 ± 0.02比4.38 ± 0.08,P < 0.001）。 结论姜黄素可降低LPS诱导的小胶质细胞神经炎症损伤,其机制可能与下调NF-κB/NLRP3信号通路,抑制炎症和细胞凋亡有关。     

中药抗炎治疗小儿慢性咳嗽的研究进展（英文）

慢性咳嗽是儿童呼吸科门诊的常见疾病,病因具有多样化和年龄差异.现代医学认为神经源性气道炎症是慢性咳嗽的重要原因,多采用抗炎、抗过敏药物治疗.中药治疗儿童慢性咳嗽遵从整体观念和辨证论治,主要从风、痰、虚论治,具有确切疗效.通过查阅文献,本文对治疗儿童慢性咳嗽的中药进行了总结,并对其抗炎机制进行综述.临床研究发现,依据中医扶阳理论辨治儿童慢性咳嗽,可获得良好疗效,在此一并进行简要阐述.     

中药活性成分改善缺血缺氧所致脑微血管内皮屏障功能损伤的研究进展

缺血性脑卒中发生时,基质金属蛋白酶等效应分子以及炎症反应、氧化应激等会破坏血脑屏障,增加缺血区有害产物进入脑组织,产生脑水肿,引起继发性脑损伤。所以,保护与维持脑微血管内皮屏障功能的完整性,是脑卒中防治的重要策略之一。从调节效应分子和相关信号通路的角度出发,综述中药活性成分对模拟缺血性脑卒中的体内外脑微血管内皮屏障功能损伤模型的改善作用研究进展,以期为进一步阐释中药活性成分防治缺血性脑卒中的作用机制以及新药创制提供参考和依据。     

Gli1与β-catenin相互作用促进二者在结肠癌细胞中的协同核输入

Wnt信号通路和Hedgehog（Hh）信号通路在胚胎和干细胞的发育中发挥重要作用.此外,这两条信号途径在结肠癌复发和浸润的过程也至关重要.然而,Wnt信号通路、Hedgehog信号通路二者之间具体的交互作用机制目前仍不清楚.本文发现,这两条途径的关键分子Gli1和β-联蛋白之间存在蛋白质相互作用.Gli1与β-联蛋白之间的分子相互作用有助于二者的核输入.同时发现,在肠癌细胞系中,Gli1与β-联蛋白协同上调表达. LiCl激活细胞Wnt信号通路使Gli1表达水平增加, RNA干扰抑制Wnt信号通路,Gli1的表达水平下降.同时,Gli1的过表达也提高了细胞内β-联蛋白的表达水平,并且用Hedgehog信号通路抑制剂GANT61处理细胞,降低Gli1的表达后细胞内β 联蛋白的表达相应下降.本研究揭示了Gli1 和 β-联蛋白的相互作用及二者协助核输入在Wnt、Hedgehog信号通路交互调节中发挥重要作用,Wnt、Hedgehog信号通路交互作用为大肠癌发生发展研究提供了细胞水平交互调控机制.     

中医药防治病毒性肝炎转化医学模式初探

目的 以转化医学模式申报、管理、应用中医药防治病毒性肝炎科研项目,实现基础科研和临床应用的双向联通。 方法 以承担国家“十一五”重大科技专项课题为契机,组建转化医学研究团队,统筹管理科研项目分配和申报,共享科研仪器设备和医学生物标本及生物信息库,通过科学的运行机制实现中医药防治病毒性肝炎科研成果向临床应用进行转化。 结果 近2年,实施转化医学模式的医院在研国家级项目达4项,天津市局级项目4项;2年来培养中西医结合人才3人,选派4人攻读医学硕士、博士研究生,3人取得硕士学位。 结论 以转化医学模式,组织管理中医药防治病毒性肝炎科学研究,能够打破传统医学研究的分隔,重建中医药防治病毒性肝炎医学研究体系,实现实验室与临床的双向转化,不失为从人才培养到学科建设等各方面的中医药转化医学模式的有益探索。

     

具有抗炎活性的中药对脂肪酸合酶的抑制作用（英文）

随着肥胖及其相关疾病的患病率不断上升,肥胖并发的慢性炎症已成为一个不容忽视的公共卫生问题,迫切需要针对肥胖相关慢性炎症新的治疗方案和干预策略.脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)是一种多功能复合酶,是治疗肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝、炎症和癌症的潜在靶点.持续的炎症反应是潜在的危险因素.一些关键的炎症标志物与肥胖密切相关,其中特别是FAS抑制剂的研究受到越来越多的关注.在我国,中药已广泛被应用于炎症的治疗,其中有多种中药对FAS表现出强抑制作用.本文综述了中药FAS抑制剂的结构和活性特点,对于研发中药FAS抑制剂治疗炎症提供了依据.