促性腺激素对猪卵丘细胞-卵母细胞复合体体外减数分裂恢复作用的研究

本实验利用猪卵母细胞体外无血清培养技术,选用猪卵泡液中自然存在的次黄嘌呤（ＨＸ）作为卵母细胞自发成熟的抑制剂,研究了促性腺激素对猪卵丘细胞－卵母细胞复合体（ＣＥＯ）减数分裂恢复的具体作用。ＣＥＯ在含有不同浓度的促性腺激素（ＦＳＨ,ｈＣＧ,ＦＳＨ＋ｈＣＧ）的培养液中培养２４ｈ,观察卵母细胞减数分裂恢复（ＧＶＢＤ）情况。实验结果如下：１．ＦＳＨ（１－５００ＩＵ／Ｌ）能够明显刺激ＣＥＯ克服ＨＸ的抑制作用而恢复减数分裂（Ｐ＜０．０５）,该作用具有剂量依赖性;２．ｈＣＧ（１－５００ＩＵ／Ｌ）对ＣＥＯ减数分裂的恢复无明显作用;３．ｈＣＧ（１０－５００ＩＵ／Ｌ）与ＦＳＨ（１０,１００ＩＵ／Ｌ）无协同作用。上述结果表明,猪ＣＥＯ减数分裂的恢复可能主要依赖于ＦＳＨ的作用,该作用能使猪卵丘细胞产生一种或几种阳性因子,作用于卵母细胞,从而克服ＨＸ的抑制作用而恢复减数分裂。ｈＣＧ无明显作用,可能是因为卵丘细胞上没有ＬＨ受体或ＬＨ受体的数量不足     

哺乳动物卵母细胞减数分裂恢复的诱导

促使哺乳动物卵母细胞减数分裂恢复的机制尚不十分清楚。有腔卵泡中发育充分的卵母细胞被减数分裂抑制因子阻滞在生发泡（GV）期,环一磷酸腺苷（cAMP)是研究得最为清楚的减数分裂抑制因子。然而,其它因子也参与了卵母细胞减数分裂的阻滞。虽然排卵前的促黄体素（LH）峰诱导卵母细胞减数分裂恢复已成定论,但是参与该事件的各种过程非常复杂,因而还没有完全确定。目前,有两种主要但并不互相排斥的假说。第一种假说认为,LH对颗粒细胞的刺激作用终止减数分裂抑制因子流向卵母细胞,从而使卵母细胞膈离这些抑制因子并进而促使减数分裂恢复,第二种假设认为LH刺激颗粒细胞产生一种减数分裂诱导信号,该信号进而克服或者破坏减数分裂抑制因子的作用。权衡这两种假说,目前的证据倾向于支持阳性信号假说,而且最近的研究暗示,该种阳性信号的产生发生在颗粒细胞中LH诱导的cAMP水平上升和MAPK激酶激活之后。     

体外培养条件下促性腺激素对昆明白小鼠卵母细胞成熟及卵丘扩展的影响

研究促卵泡激素（FSH）,人绒毛膜促性腺激素（hCG)对昆明白小鼠卵母细胞成熟和卵丘扩展的影响,以及体外培养时卵丘扩展与卵母细胞成熟之间的关系,FSH可以明显促进次黄嘌吟（HX）抑制条件下的卵丘－卵母细胞复合体CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展,其最佳作用剂量为100IU／L,且FSH作用30分钟即可以使CEO获得恢复减数分裂的信息,在HX存在的条件下,FSH处理后10hr,CEO卵丘明显扩展,而生发泡破裂（GVBD）则在16－20hr明显增加,所有卵丘未扩展的CEO中卵母细胞均未发生GVBD,低剂量hCG单独或与FSH共同存在,对CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展均无明显影响;高剂量hCG可以部分抑制FSH对卵母细胞成熟的促进作用,结果表明：FSH明显促进CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展,而hCG却不具有此作用,体外培养条件下（含次黄嘌呤）,卵丘扩展是卵母细胞成熟的前提条件,但卵母细胞成熟并不需要卵丘完全扩展。     

哺乳动物促性腺激素对文昌鱼卵母细胞成熟的影响

在繁殖季节,将哺乳动物促性腺激素注射到性腺正在成熟文昌鱼体内,注射３６小时后,检查促性腺激素的生理效应,结果表明这两种激素均有效地诱发卵母细胞成熟和产卵。从而认为雌性文昌鱼的生殖活动,像脊椎动物一样,可能受促性腺激素的调控。     

促性腺激素释放激素类似物对长臀wei脑垂体促性腺激素分泌的影响

采用离体灌流孵育技术和促性腺激素的放射免疫测定方法,对长臀wei(Cranoglanis bouderius)脑垂体碎片促性腺激素的分泌进行了研究。结果表明：持续的促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)能显著刺激退化期的长臀wei离体脑垂体碎片促性腺激素(GTH)的分泌,并且长臀wei脑垂体碎片对持续的GnRH-A刺激未表现出脱敏性,该结果与胡子鲇和鲇鱼相似,而与金鱼和鲤科鱼类不同;重复脉冲GnRH-A刺激对长臀wei脑垂体碎片GTH分泌具有促进作用,而且存在剂量依存关系,与鲇鱼和鲤科鱼类相类似。上述结果表明在长臀wei的人工繁殖中可以用持续高浓度GnRH-A刺激对长臀wei进行催熟和催产。     

促性腺激素释放激素类似物对长臀(鱼危)脑垂体促性腺激素分泌的影响

采用离体灌流孵育技术和促性腺激素的放射免疫测定方法,对长臀(鱼危)(Cranoglanis bouderius)脑垂体碎片促性腺激素的分泌进行了研究.结果表明:持续的促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)能显著刺激退化期的长臀(鱼危)离体脑垂体碎片促性腺激素(GTH)的分泌,并且长臀(鱼危)脑垂体碎片对持续的GnRH-A刺激未表现出脱敏性,该结果与胡子鲇和鲇鱼相似,而与金鱼和鲤科鱼类不同;重复脉冲GnRH-A刺激对长臀(鱼危)脑垂体碎片GTH分泌具有促进作用,而且存在剂量依存关系,与鲇鱼和鲤科鱼类相类似.上述结果表明在长臀(鱼危)的人工繁殖中可以用持续高浓度GnRH-A刺激对长臀(鱼危)进行催熟和催产.     

FSH诱导卵丘细胞分泌一种促减数分裂物质

本实验利用卵母细胞的体外培养模型,将小鼠卵丘－卵母细胞复合体（CEO）和去卵丘卵母细胞（DO）在体外培养,系统研究了促性腺激素（FSH、hCG）诱导小鼠卵母细胞减数分裂的机制。结果显示,FSH能剂量依赖性地诱导CEO恢复减数分裂（Fig.1),但对DO无影响;hCG对CEO、DO皆无效果（Fig.2);用FSH预处理CEO时间达到1小时后,就能显著诱导卵母细胞成熟,2小时后作用达到最大,不再增强（Fig.3);用FSH处理CEO2小时及24小时的培养液,能诱导DO恢复减数分裂,但预处理卵丘细胞24小时的培养液,并不能诱导DO恢复减数分裂（Fig.4A);这种培养液在70℃下30分钟后,仍能刺激DO成熟（Fig.4B);甾醇类物质合成抑制剂酮康唑,可剂量依赖性地抑制FSH的促减数分裂恢复作用（Fig.5)。这些结果说明,FSH可能诱导卵丘－卵母细胞复合体中的卵丘细胞分泌一种促减数分裂恢复物质;该物质用于卵母细胞,诱导其恢复减数分裂而成熟;这种物质可能是一种甾醇类物质。     

鱼类促性腺激素受体研究进展

促性腺激素FSH/LH在脊椎动物的生殖调控中占据中心地位,其生理功能主要通过其特异性受体FSH-R/LH-R所介导.研究表明,鱼类FSH-R和LH-R主要在性腺表达,也在脑、肝脏、肾脏、脾脏等部位表达,主要调控生殖细胞的成熟和最后的排卵及排精.     

促性腺激素抑制激素与生殖轴的关系

下丘脑的促性腺激素释放激素((GnRH)对调控促性腺激素释放十分重要.10年前在鸟类中首先发现了促性腺激素抑制激素(GnIH),它的鉴定提示GnRH不是唯一能直接影响垂体促性腺激素释放的下丘脑神经肤.GnIH及其同系肽广泛存在于鸟类及哺乳动物体内,GnIH在脑部与GnRH神经接触,GnIH可以直接抑制垂体促性腺激素的合成和释放,GnIH及其受体在鸟类和哺乳动物的生殖腺存在.因此GnIH可以在多个水平直接影响生殖轴:脑部、垂体、生殖腺.     

促性腺激素释放激素免疫调节作用的研究进展

淋巴细胞自身可以表达促性腺激素释放激素（ｇｏｎａｄｏｒｅｌｉｎ,ＧｎＲＨ）和其受体（ｆｏｎａｄｏｒｅｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧｎＲＨＲ）。ＧｎＲＨ能促进Ｔ淋巴细胞的增殖及ＩＬ－２Ｒ的表达;也能促进Ｂ细胞的增殖分化及ＩｇＧ的分泌;对早期淋巴细胞增殖分化有特别重要的作用;对ＮＫ细胞、粒细胞、巨噬细胞也有一定影响。这说明ＧｎＲＨ对机体细胞免疫和体液免疫均有较强的调节作用。     

鳗鲡繁殖生物学研究Ⅴ.性类固醇激素诱导雌鳗促性腺激素分泌…

多次注射雌二醇或睾酮对雌鳗促性腺激素的合成与分泌活动以及卵巢发育都有明显的促进作用,其中睾酮的作用更较雌二醇显著;多次注射ＬＨＲＨ－Ａ的促进作用则不明显。多次埋植雌二醇或睾嗜促使脑垂体合成ＧｔＨ,但所取血清样品中的ＧｔＨ含量都未见明显增加,多次埋植雌二醇后血清中卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢ＧＳＩ增长幅度小,表明埋植雌二醇虽能促使肝细胞合成和卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢明显发育长大,这表明埋     

下丘脑促性腺激素释放激素脉冲发生器

哺乳动物下且脑内诱发并调节促性腺激素释放激素脉冲式释放进入垂体门脉循环,从而引起黄体生成素脉冲式释放的神经机制叫做ＬＨＲＨ脉冲发生器,在下丘脑内侧基底部,记录到和ＬＨＲＨ脉冲释放相同下的多单位阵发性放电,以此为指标可直接生机能的中区神经内分泌系统的活动。     

促性腺激素释放激素Buserelin 稳定性的研究

目的:研究Buserelin原料药的性质在温度、湿度、光线等条件的影响下随时间变化的规律,为该原料药的生产、包装、储存、运输及有效期的制定提供依据。方法:根据中国药典2005版二部附录XIX C药物稳定性试验指导原则及化学药物稳定性研究技术指导原则进行强光照射、高温(60℃、40℃)、高湿(RH92.5%±5%、RH75%±5%)影响因素试验,加速试验(40℃±2℃、RH75%±5%;25℃±2℃、RH60%±10%);按Buserelin原料药标准规定的质量指标及相关的检验方法对产品在试验条件下的主要质量指标进行检测。结果:强光照射、高温、高湿等影响因素对Buserelin的稳定性有明显影响,故应密封、于干燥、阴凉处保存。在加速试验中,Buserelin原料药的各项质量指标发生了小的变化,但均在质量标准规定的范围内。结论:强光照射、高温、高湿等影响因素对Buserelin的稳定性有明显影响,应在阴凉干燥处避光密封保存和运输。加速试验结果证明:在此条件下,它的各项质量指标变化均在质量标准范围内,符合Buserelin原料药质量标准规定的要求;故将其保质期暂定为两年。     

促性腺激素释放激素细胞模型研究进展

促性腺激素释放激素 (GnRH)神经元是哺乳动物中枢生殖调控体系的最终共同通路。然而 ,由于GnRH神经元在脑内数目稀少以及散在分布 ,长期以来给GnRH神经元的分离鉴定和功能研究带来了极大的困难。因此 ,科学家们一直致力于寻找理想的细胞模型。离体GnRH细胞株 (GT1)以及最近在体绿色荧光蛋白 GnRH(GnRH GFP)转基因小鼠的诞生 ,给生殖内分泌领域的研究创造了极好的条件 ,必将促进该领域的研究进程     

几种神经内分泌因子对鲤促性腺激素释放激素（GnRH）释放的调节作 …

用离体静态培育系统进行的初步研究表明,在幼鲤,多巴胺（ＤＡ）显著刺激下丘脑片段和脑垂体碎片释放ＧｎＲＨ,并且是剂量依存的;促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）和γ－氨基酸丁酸（ＧＡＢＡ）对ＧｎＲＨ的释放没有影响。在成鲤,ＤＡ抑制下丘脑片希和脑垂体碎片释放ＧｎＲＨ,而ＴＲＨ和ＧＡＢＡ刺激ＧｎＲＨ的释放;ＤＡ对ＧＡＢＡ刺激的ＧｎＲＨ释放也具有抑制作用;ＴＲＨ和ＧＡＢＡ的协同作用对下丘脑和脑垂体ＧｎＲＨ释放活动     

米非司酮对恒河猴促性腺激素分泌水平的抑制作用

目的分析米非司酮（RU486）对恒河猴促性腺激素分泌水平的影响,探讨RU486影响恒河猴促性腺激素分泌的可能机制,为临床安全用药提供理论依据。方法采用生物测定法测定恒河猴促性腺激素,比较在不同情况下恒河猴促性腺激素的分泌水平。结果实验表明：不同时间（0、0.5、1、2、4、8、12、244、8 h）用药后,RU486对恒河猴促黄体激素（LH）、促滤泡激素（FSH）分泌水平的影响,在用药0.5、1、24、h后,对LH、FSH分泌均有抑制作用,其中在用药4 h时,LH、FSH分泌水平均有显著的降低,而用药81、2、244、8 h后,LH、FSH浓度没有显著差异。在月经周期的不同时期一次用药后发现,卵泡期：RU486对LH、FSH分泌水平影响较小;排卵期：RU486对LH、FSH峰的发生延迟现象;黄体期：观察到RU486对FSH、LH基础分泌水平及脉冲的幅度出现下降。结论RU486对恒河猴的LH、FSH分泌水平,在不同情况下有显著差异。     

大鼠垂体促性腺激素细胞内cAMP的改变对LHβ mRNA表达的影响

目的 分析大鼠LHβ mRNA表达的促性腺激素释放激素(GnRH)受体后信号转导机制.方法 将体外培养的大鼠腺垂体促性腺激素(GTH)细胞用cAMP的兴奋剂FSK或抑制剂SQ22536处理后,再用高频GnRH脉冲刺激,然后用实时荧光定量PCR法测定细胞LHβ mRNA的Ct值,并与空白组比较.结果 LHβ mRNA的Ct值随着GTH细胞cAMP含量的增高而显著降低,随着cAMP含量的降低而显著增高.结论 cAMP是高频GnRH脉冲刺激所引起的LHβ mRNA表达的受体后的信号转导途径.     

儿茶酚胺神经递质对促性腺激素释放激素分泌的影响

下脑脑儿茶酚胺神经递质是调节促性腺激素释放激素合成和分泌的重要因素。形态学和药理学证据以及离体实验都证明,儿茶酚胺类神经递质通过直接的突触联系或通过间接的途径影响ＧｎＲＨ释放,并参与ＧＧｎＲＨ的基因;儿茶酚胺的调节作用与体内类固醇水平有关。     

多巴胺能药物对鲤鱼促性腺激素分泌活动的影响

研究多巴胺（ＤＡ）及其激动剂阿扑吗啡（ＡＰＯ）和拮抗剂Ｄｏｍｐｅｒｉｄｏｎｅ（ＤＯＭ）对不同性腺发育时期和不同年龄雌鲤促性腺激素（ＧｔＨ）分泌活动的影响。结果表明：鲤鱼基础ＧｔＨ分泌具有明显的季节性变化,表现为血清ＧｔＨ含量在性腺发育早期较低,性腺成熟期升高,到性腺退化期又降低。ＤＡ和ＡＰＯ对ＧｔＨ分泌的抑制作用及ＤＯＭ对ＧｔＨ分泌的刺激作用在不同性腺发育时期为：性腺发育早期〉性腺成熟期〉性腺退化