| 积雪草对转染TGF-β1基因的大鼠肾小球系膜细胞Smad 2/3、Smad 7和胶原蛋白Ⅳ表达的影响 |
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| 引用本文： | 马继伟,王宏天,刘浩飞,董磊鹏,丁元,白继琼,张翥,东莉洁.积雪草对转染TGF-β1基因的大鼠肾小球系膜细胞Smad 2/3、Smad 7和胶原蛋白Ⅳ表达的影响[J].中国应用生理学杂志,2018,34(2):122-125. |
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| 作者姓名： | 马继伟 王宏天 刘浩飞 董磊鹏 丁元 白继琼 张翥 东莉洁 |
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| 作者单位： | 1. 河南中医药大学第一附属医院, 郑州 450000;
2. 信阳市中心医院, 河南 信阳 464000;
3. 巩义市人民医院, 河南 巩义 451200;
4. 天津医科大学眼科医院, 眼科研究所, 天津 300384 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金支持项目（81570872）；天津市应用基础与前沿技术研究计划一般项目（15JCYBJC24900） |
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| 摘 要： | 目的：通过细胞转基因技术，获得稳定表达转化生长因子β1（TGF-β1）的系膜细胞（MC）克隆，观察积雪草（CA）对Smad 2/3、Smad 7和胶原蛋白1V表达及Smad 2/3磷酸化的影响。方法：采用脂质体的方法将TGF-β1表达质粒转入MC细胞，采用G418筛选并建立稳定表达TGF-β1的细胞株。将MC细胞株分为3组：对照组（未转染TGFβ1的MC+RPMI 1640+10%正常大鼠血清），TGF-β1转染组（稳定表达TGF-β1的MC+RPMI 1640+10%正常大鼠血清），积雪草（CA）组：稳定表达TGF-β1的MC+RPMI 1640+10%含高浓度CA的大鼠血清。实验重复5次。ELISA法检测各组培养上清中TGF-β1和胶原Ⅳ的含量；RT-PCR方法检测各组细胞TGF-β1、Smad 2/3、Smad 7的mRNA表达水平；Western印迹法检测各组细胞TGF-β1、Smad 2/3、p-Smad 2/3、Smad 7、胶原Ⅳ的蛋白质水平。结果：TGF-β1转染组细胞上清液中的TGF-β1和胶原蛋白Ⅳ水平显著升高，积雪草能显著降低TGF-β1和胶原蛋白Ⅳ水平；TGF-β1转染组细胞中TGF-β1、Smad 2/3的mRNA和蛋白质表达水平及Smad 2/3的磷酸化水平均显著升高，而CA可显著降低MC细胞中TGF-β1、Smad 2/3的mRNA和蛋白质表达水平及Smad 2/3的磷酸化水平；TGF-β1转染组细胞中的Smad 7 mRNA水平显著降低，而CA能使Smad 7的mRNA水平显著升高。结论：稳定表达TGF-β1的MC细胞能激活TGFβ1/Smad信号通路，并引起胶原蛋白Ⅳ表达增加，而CA通过抑制此通路的激活，进而抑制胶原蛋白Ⅳ的表达而减缓糖尿病肾病（DN）的发生。
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| 关 键 词： | 大鼠 糖尿病肾病 积雪草 转化生长因子-β1 Smad信号通路 胶原蛋白Ⅳ |
| 收稿时间： | 2017-06-23 |
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