| H9N2型禽流感病毒HA基因的克隆及其DNA疫苗的动物免疫试验 |
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| 引用本文： | 何宏轩,秦曦明,张强哲,汤义,刘丽艳,郑昌学,段明星.H9N2型禽流感病毒HA基因的克隆及其DNA疫苗的动物免疫试验[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(2):163-166. |
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| 作者姓名： | 何宏轩 秦曦明 张强哲 汤义 刘丽艳 郑昌学 段明星 |
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| 作者单位： | [1]清华大学生物科学与技术系，生物膜与膜生物工程国家重点实验室，北京100084 [2]河南职业技术师范学院动物科学系，新乡453003 |
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| 摘 要： | 血凝素(HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质．根据已发表的149亚型AIV的HA基因序列，设计合成了1对H9HA特异引物，以AIV A／Chicken／Henan／1／1999／(H9N2)核酸为模板，通过RT-PCR扩增出1条1．6kb cDNA片段。将HA基因插入pVAXI中，构建了真核表达质粒pVAX-H9，采用活体电击法免疫3周龄SPF鸡10只，剂量为50μg/只，3周后加强免疫一次，5周后以100倍鸡胚感染剂量(EID)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒，其间每周检测抗体水平变化，6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离，结果为攻毒后免疫组鸡HI效价为9log2-10log2，对照组为2log2-4log2；免疫组病毒分离数为0／10。对照组为10／10,表明所构建的HA基因表达质粒可作为基因疫苗诱导鸡产生免疫保护反应。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 血凝素基因 RT-PCR 克隆 DNA疫苗 |
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