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人趋化因子MIP-3α的原核可溶性表达及趋化活性分析
引用本文:张清平,彭国雄,王中康,殷幼平,夏玉先.人趋化因子MIP-3α的原核可溶性表达及趋化活性分析[J].中国生物工程杂志,2005,25(11):71-75.
作者姓名:张清平  彭国雄  王中康  殷幼平  夏玉先
作者单位:广东省惠州市中心人民医院检验中心, 惠州 516001
基金项目:国家“863”计划资助项目(2004AA246050)
摘    要:目的:克隆人趋化因子MIP3α,进行原核表达并初步鉴定其趋化活性。方法:从人扁桃体中提取总RNA,进行RTPCR,扩增MIP3α成熟蛋白基因,重组于pET32a(+)载体,转化大肠杆菌BL21TrxB(DE3),进行融合表达,Westernblot验证融合蛋白,金属离子亲和层析,肠激酶酶切,弱阳离子交换层析,得到纯化的MIP3α蛋白,趋化试验鉴定其趋化活性。结果:成功构建了MIP3α天然蛋白的硫氧还蛋白融合表达载体,表达并纯化出MIP3α蛋白,Westernblot证明融合蛋白能与羊抗人MIP3α抗体结合,纯化的MIP3α蛋白能趋化HEK293CCR6稳定转染细胞。结论:构建的天然MIP3α融合表达载体以可溶性蛋白的方式稳定表达MIP3α,初步纯化得到的MIP3α具有趋化HEK293CCR6稳定转染细胞的活性。

关 键 词:MIP-3α  融合表达  蛋白纯化  
收稿时间:2005-04-18
修稿时间:2005-09-01

Detection of Metarhizium anisopliae rDNA in Haemalymph of Infected Adult Locust by Real-time Fluorescence Quantitative PCR
ZHANG Qing-ping,PENG Guo-xiong,WANG Zhong-kang,YIN You-ping,XIA Yu-xian.Detection of Metarhizium anisopliae rDNA in Haemalymph of Infected Adult Locust by Real-time Fluorescence Quantitative PCR[J].China Biotechnology,2005,25(11):71-75.
Authors:ZHANG Qing-ping  PENG Guo-xiong  WANG Zhong-kang  YIN You-ping  XIA Yu-xian
Abstract:
Keywords:Metarhizium anisopliae Locust Real-time FQ-PCR
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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