| 高通量流式荧光微球悬液芯片检测乙肝病毒基因分型 |
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| 引用本文： | 刘永兰,包晗,赵锦荣,向安,郭晏海,雷小英,汪钦,颜真.高通量流式荧光微球悬液芯片检测乙肝病毒基因分型[J].现代生物医学进展,2012,12(35):6805-6809. |
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| 作者姓名： | 刘永兰 包晗 赵锦荣 向安 郭晏海 雷小英 汪钦 颜真 |
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| 作者单位： | 第四军医大学药学院药物基因组学教研室全军基因诊断技术研究所 陕西西安710032 |
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| 基金项目： | 国家“十一五”重大传染病专项(2009ZX10004-311);国家重点基础研究发展规划(973)项目(2010CB933900);西安市科技计划(SF09027) |
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| 摘 要： | 目的:建立HBV基因分型高通量液相芯片检测技术,并探讨其应用价值.方法:对GenBank中收录的明确分型的HBV基因序列进行分析,选择preS2-S区设计引物和A、B、C和D型特异性探针.与荧光编码微球偶联的特异型探针与一条引物生物素标记的PCR产物直接杂交反应,然后结合亲和素标记的藻红蛋白,用流式检测仪(Bio-Plex 200)检测荧光信号.检测182份阳性乙肝患者血清DNA,其中35份样品检测结果与测序法比较.用B、C型质粒DNA倍比稀释及混合样品检测灵敏度来评估该方法.结果:建立了HBV基因分型的快速高通量液相芯片检测方法.182份患者血清检测结果为:B型占24.2％ (44/182),C型占71.4％(130/182),D型为6.6 ％(12/182),BC混合型4.4％(8/182).其中35份样本与测序法比较,除3份混合型测序法未检出外,其它32例结果均相同本方法的灵敏度检测下线为1×103 copies/mL.结论:应用悬液芯片技术进行乙肝病毒的基因分型分析,具有较好的特异性和较高的灵敏度,并有简便、灵活和高通量等优势.该检测系统不仅在科研中有广泛的前景,也有望成为临床推广的多重分子诊断和基因分型的新方法.
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| 关 键 词： | 荧光微球 悬液芯片 乙肝病毒 基因分型 |
Development of High-throughput Detection of HBV Genotypes Using a Fluid Fluorescent Microsphere Suspension Array |
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| LIU Yong-lan,BAO Han,ZHAO Jin-rong,XIANG An,GUO Yan-hai,LEI Xiao-ying,WANG Qin,YAN Zhen.Development of High-throughput Detection of HBV Genotypes Using a Fluid Fluorescent Microsphere Suspension Array[J].Progress in Modern Biomedicine,2012,12(35):6805-6809. |
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| Authors: | LIU Yong-lan BAO Han ZHAO Jin-rong XIANG An GUO Yan-hai LEI Xiao-ying WANG Qin YAN Zhen |
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| Affiliation: | △(Institute of Gene Diagnosis & Department of Pharmacogenomics,School of pharmacy,The Fourth Military Medical University,Xi’an,Shaanxi,710032,China) |
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