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斜纹夜蛾羧酸酯酶基因的克隆、序列分析及表达水平
引用本文:黄水金,秦文婧,陈琼.斜纹夜蛾羧酸酯酶基因的克隆、序列分析及表达水平[J].昆虫学报,2010,53(1):29-37.
作者姓名:黄水金  秦文婧  陈琼
作者单位:江西省农业科学院植物保护研究所,南昌,330200
基金项目:江西省自然科学基金项目(2008GZN0010)
摘    要:为了明确斜纹夜蛾Spodoptera litura对溴氰菊酯产生抗性的分子机理, 本研究利用RT-PCR技术和RACE方法获得了1个斜纹夜蛾羧酸酯酶基因的全长cDNA序列, 命名为Slest2。序列分析表明, 该cDNA全长1 796 bp(GenBank 登录号: DQ445461), 5′和3′UTR区分别长63和119 bp,开放阅读框编码一个由537个氨基酸残基组成的羧酸酯酶蛋白。通过对氨基酸同源性分析表明, 该羧酸酯酶与其他物种的酯酶均具有很高的氨基酸相似性,并具有多个在不同酯酶蛋白家族中均保守的区域。采用实时定量PCR技术比较了Slest2在斜纹夜蛾抗、感品系中的表达水平。当以cDNA为模板检测mRNA转录水平时发现, Slest2在抗性品系中的转录水平是敏感品系的46.85倍; 以基因组DNA为模板检测Slest2基因的拷贝数时发现, Slest2在抗、感性品系中的拷贝数无显著差异(前者为后者的1.16倍)。这些结果表明, 抗性与敏感品系具有相似的Slest2基因拷贝数, 但它们在抗性品系中的转录水平显著升高。由此推测Slest2基因的转录水平升高与斜纹夜蛾对溴氰菊酯的抗药性密切相关。

关 键 词:斜纹夜蛾  酯酶  抗药性  抗性品系  敏感品系  序列分析  实时定量PCR  

Cloning, sequence analysis and expression levels of a carboxylesterase gene from Spodoptera litura ( Fab. ) ( Lepidoptera: Noctnidae)
HUANG Shui-Jin,QIN Wen-Jing,CHEN Qiong.Cloning, sequence analysis and expression levels of a carboxylesterase gene from Spodoptera litura ( Fab. ) ( Lepidoptera: Noctnidae)[J].Acta Entomologica Sinica,2010,53(1):29-37.
Authors:HUANG Shui-Jin  QIN Wen-Jing  CHEN Qiong
Affiliation:Institute of Plant Protection/a>;Jiangxi Academy of Agricultural Sciences/a>;Nanchang 330200/a>;China
Abstract:In order to clarify the molecular mechanisms of deltamethrin resistance in Spodoptera litura (Fab.),the esterase gene of S. litura was cloned by using the RT-PCR with degenerate primers and rapid amplification of cDNA ends (RACE) strategies,and designated as Slest2. Sequence analysis demonstrated that the fragment was 1 796 bp in full-length with a 63 bp 5' UTR and 119 bp 3'UTR (GenBank accession no. DQ445461),the open reading frame encoded a 537-amino-acid protein. Homology analysis indicated that the dedu...
Keywords:Spodoptera litura  carboxylesterase  insecticide resistance  resistant strain  susceptible strain  sequence analysis  real-time quantitative PCR  
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