| 蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽S-转移酶的部分纯化 |
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| 引用本文： | 汤方,张常忠,梁沛,史雪岩,高希武.蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽S-转移酶的部分纯化[J].昆虫学报,2005,48(2):172-178. |
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| 作者姓名： | 汤方 张常忠 梁沛 史雪岩 高希武 |
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| 作者单位： | 中国农业大学农学及生物技术学院昆虫学系 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划"973"项目(G2000016207);国家自然科学基金项目(30471153,30170621) |
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| 摘 要： | 通过用聚乙烯亚胺（PEI）、硫酸铵、聚乙二醇（PEG）沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera (Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究。结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果。通过PEI沉淀去核酸后,再用硫酸铵沉淀,中肠和脂肪体GST活性分布在70%～75％和60%～65％沉淀段,比活力分别为1 081.49和596.41 nmol/(min·mg),纯化倍数分别为2.53和2.2。在6种PEG中,PEG10000和PEG20000的纯化效果较好。在中肠和脂肪体中PEG10000沉淀的GST活性峰分别在40%～45％和30%～40％,GST比活力分别为795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.4和3.97。PEG20000沉淀中肠和脂肪体GST的活性峰分别在25%～40％和25%～45％,比活力分别是767.57和945.96 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.81和3.05。用GSH-Sepharose 4B纯化中肠GST,GST比活力达到5 888.44 nmol/(min·mg),纯化倍数达到107.38。
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| 关 键 词： | 棉铃虫 谷胱甘肽S-转移酶 硫酸铵沉淀 聚乙烯 |
| 文章编号： | 0454-6296(2005)02-0172-07 |
| 修稿时间： | 2004年8月18日 |
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