鲫Dmrt3基因的克隆和表达分析 |
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引用本文: | 王佳, 罗琛. 鲫Dmrt3基因的克隆和表达分析[J]. 水生生物学报, 2014, 38(3): 548-555. DOI: 10.7541/2014.77 |
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作者姓名: | 王佳 罗琛 |
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作者单位: | 1.浙江大学生命科学学院, 杭州 310058;1.浙江大学生命科学学院, 杭州 310058 |
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基金项目: | 国家973项目(编号:2010CB126301);浙江省科技重大专项(2012C12907-9)资助 |
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摘 要: | DMRT家族是一个与性别决定相关的转录因子家族。为了研究家族成员之一的Dmrt3在我国重要养殖鱼类鲫胚胎发育、性别分化中的功能以及在育种中的作用,我们克隆了鲫Dmrt3基因的cDNA全长,并对Dmrt3基因在发育早期和不同组织中的表达进行了分析。结果显示:鲫Dmrt3基因cDNA全长为2182 bp,其中5¢端非编码区408 bp,3'端非编码区427 bp,开放阅读框1347 bp,编码448个氨基酸。蛋白结构预测显示DMRT3除了正常的DM结构域外,还有DMA结构域,在进化上与DMRT4和DMRT5的亲缘关系更近。巢式RT-PCR分析结果表明Dmrt3直到尾芽期才开始有微量表达,表达量在15体节期有明显增加但仍然处在一个较低的水平;在成体组织中只在精巢中检测到表达。这种表达时空模式提示Dmrt3可能在早期器官发生和雄性性腺发育调控中起作用。对Dmrt3启动子CpG岛的甲基化分析表明所检测的组织和配子中并不发生甲基化,说明这种雌雄特异性和组织特异性差异表达并不是通过对该基因启动子的差异甲基化修饰来调控的。此外,我们还发现了鲫Dmrt3的一个由逆转录产物形成的假基因pDmrt3。这些结果为进一步研究鲫Dmrt3在性别分化中的作用和评估其在鲫性别控制育种中的价值,以及分析DMRT家族的进化关系提供了基础资料。
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关 键 词: | 鲫 Dmrt3 基因克隆 基因表达 |
收稿时间: | 2013-05-09 |
修稿时间: | 2013-12-20 |
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