科微学术

生物工程学报

首页 > 过刊浏览>2009年第25卷第7期 >1035-1041
PDF HTML阅读 XML下载 导出引用 引用提醒
腺病毒介导IL-24-E1A双基因载体的构建及其体外抑制SMMC-7721肝癌细胞生长作用初探
DOI:
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

江苏省高校自然科学研究项目(No. sz127822)资助。


Construction of adenovirus vector expressing IL-24 and E1A and its inhibition of SMMC-7721
Author:
Affiliation:

Fund Project:

University Science Research Project of Jiangsu Province (No. sz127822).

  • 摘要
    • |
  • 图/表
    • |
  • 访问统计
    • |
  • 参考文献
    • |
  • 相似文献
    • |
  • 引证文献
    • |
  • 资源附件
    • |
  • 文章评论
    摘要:

    构建IL-24和E1A双基因腺病毒载体, 获得Ad-IL-24-E1A重组腺病毒子, 分析其体外抑瘤作用。PCR及BglⅡ和SalⅠ酶切获得IL-24, 与空载体构建成pAdTrack-IL-24-IRES。Xho I和EcoR V酶切获得E1A片段, 与pAdTrack-IL-24-IRES连接后成功构建pAdTrack-IL-24-IRES-E1A, 同源重组、包装和扩增获得Ad-IL-24-E1A重组病毒子。用50 MOI重组腺病毒感染 SMMC-7721肝癌细胞, MTT法测定Ad-IL-24-E1A的细胞生长抑制作用; 流式细胞仪分析细胞凋亡情况。本研究成功获得Ad-IL-24-E1A重组病毒子。与其他组相比, Ad-IL-24-E1A明显抑制肿瘤细胞生长, 感染48 h后凋亡率达52%, 而抑制正常细胞作用不明显。研究提示Ad-IL-24-E1A双基因重组载体明显抑制SMMC-7721肝癌细胞生长。

    Abstract:

    We constructed the recombinant adenovirus vector expressing IL-24 and E1A (Ad-IL-24-E1A) and investigated the inhibition of Ad-IL-24-E1A on SMMC-7721 hepatocellular carcinoma in vitro. We amplified IL-24 gene by PCR using pAdTrack-IL-24 as template. The IL-24 gene was cloned into pAdTrack-IRES at the BglⅡand SalⅠsite to form pAdTrack-IL-24-IRES. E1A digested from pAdTrack-E1A was cloned into the pAdTrack-IL-24-IRES at the Xho I and EcoR V site to form the pAdTrack-IL-24-IRES-E1A. We co-transformed both pAdTrack-IL-24-IRES-E1A and pAdeasy-1 digested by Pme I and packaged to obtain Ad-IL-24-E1A. Ad-IL-24-E1A at 50 MOI infected SMMC-7721 cells. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay determined cell proliferation. Flow cytometry detected Cell apoptosis. The apoptotic rate of SMMC-7721 cells was 52% 48 h after infection with Ad-IL-24-E1A. The result showed that the growth of SMMC-7721 cells was significantly inhibited by Ad-IL-24-E1A at the MOI of 50.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

汪小华,缪竞诚,谢宇锋,盛伟华,单云波,杨吉成. 腺病毒介导IL-24-E1A双基因载体的构建及其体外抑制SMMC-7721肝癌细胞生长作用初探[J]. 生物工程学报, 2009, 25(7): 1035-1041

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
  • HTML阅读次数:
  • 引用次数:
历史
  • 收稿日期:2009-02-10
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期:
  • 出版日期:
您是第位访问者
生物工程学报 ® 2024 版权所有

通信地址：中国科学院微生物研究所    邮编：100101

电话：010-64807509   E-mail：cjb@im.ac.cn

技术支持：北京勤云科技发展有限公司