十字花科黑腐病菌Ⅲ型效应物基因avrAC_(Xcc8004)推测的启动子区 |
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引用本文: | 蒋国凤,吴秋菊,梁晓夏,杨丽超,阳丽艳,王凛,吴小建,姜伯乐.十字花科黑腐病菌Ⅲ型效应物基因avrAC_(Xcc8004)推测的启动子区[J].微生物学报,2014(2). |
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作者姓名: | 蒋国凤 吴秋菊 梁晓夏 杨丽超 阳丽艳 王凛 吴小建 姜伯乐 |
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作者单位: | 广西大学林学院;亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;广西大学生命科学与技术学院; |
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基金项目: | 广西自然科学基金项目(2010GXNSFB013020)~~ |
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摘 要: | 【目的】十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc),能侵染所有十字花科植物,引起黑腐病。Xcc通过III型分泌系统(Type III Secretion System,T3SS)将III型效应物(T3SS effector,T3SE)蛋白直接转运到植物细胞内,T3SEs对于病原菌致病性至关重要。许多已鉴定的T3SEs基因的启动子区都存在植物诱导启动子盒(Plant-inducible promoter,PIP-box)和-10 box,但PIP-box及-10 box与经典的启动子-10区及-35区之间的关系如何未见报道,-10 box的序列保守性如何也未见报道。本研究旨在对T3SE基因avrAC Xcc8004推测的启动子区进行研究。【方法】首先,通过5'RACE确定其转录起始位点,接着用Fusion PCR对-10 box TACGTT序列中倒数第二个碱基T进行点突变为A/C/G,即:TACGAT、TACGCT和TACGGT,构建GUS融合报告菌株,定量测定GUS酶活。【结果】5'RACE结果显示avrAC Xcc8004的转录起始位点为A,对比分析得到启动子的-35区位于PIP-box之后8 bp处,而-10区与-10 box重叠;avrAC Xcc8004启动子区的PIP-box和-35区、-10 box的整个模体为:TTCAC-N15-TTCGC-N8-TTGATG-N18-TACGTT。最后,GUS定量测定结果表明,突变为C时(TACGCT)的菌株的GUS酶活最高,突变为G时(TACGGT)的酶活增高最少。在ΔhrpX和ΔhrpG中的GUS酶活均比在Xcc 8004中有显著的降低。【结论】Xcc的T3SE基因PIP-box与-35区前后相衔,-10 box即-10区,-10 box对于avrAC Xcc8004的转录活性有较大的影响,-10 box突变前后avrAC Xcc8004均受HrpG和HrpX正向调控。
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关 键 词: | 十字花科黑腐病菌 III型效应物 HrpX avrACXcc PIP-box - box |
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