地鼠肾组织经胰酶消化后，接种于盛有2000毫升含5％小牛血清的营养液的15升大瓶内，在旋转机上(4—5转／小时)37--38℃培养42—48小时，瓶壁周围即布满繁殖成致密单层的细胞。然后接种乙型脑炎病毒“P，”毒种，37—38℃静置培养36—48小时。当25—50％细胞圆缩，病变区明显和较多细胞脱落时收获，毒力log LD50 为5.0—6.5者占74％；log LD50为4.5一4.9者占26％。所制疫苗的ID50=10-3叫毫升以下者占84．6％。疫苗在8屯保存一年半，ID50没有降低。