摘要:根据ALV_J原型株HPRS103株gp85基因的内部序列,和pol基因的3′端设计一对引物H5/H7。从发生ML病死蛋用型鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏和输卵管组织中提取总RNA,反转录为cDNA,经PCR扩增得到长度为545bp的ALV_J cDNA特异性探针。探针定位于5258~5802bp。将病鸡的组织石蜡切片置Hybaid Express原位PCR仪平台上,以H5/ H7为引物进行原位PCR扩增。应用地高辛标记的cDNA探针对原位PCR扩增后切片进行了原位杂交检测。结果在待检组织肿瘤组织、十二指肠、骨髓中出现明显的阳性信号。睾丸、肺、胰腺、大脑、输卵管、肾脏均检出散在的阳性信号。这是国内外首次从分子水平证明蛋鸡J亚群禽白血病。