用Tn5插入导致的T-1(His Hup Fix)变株为受体，从慢生大豆根瘤菌USDA 110基因文库中钓取His+结合子10株，经捡测，它们都不同程度地恢复了Hup+与Fix+功能，从它们的DNA琼脂糖凝肢电泳图上，可见到都有一个分子量大小各异的pLAFRI：：his质粒，其中5株接合子的重组质粒已转入E．Coli HB101中，从它们的质粒电泳图型再显示其分子量各有差异，经 Southern转移之后，分别用hup探针和nif探针进行DNA杂交分析，明确Ecr菌株的质粒能与hup和nif探针杂交，Ec。菌株的质粒能与hup探针杂交，其它三株虽能解除Hup Fix-功能上的缺陷，但其质粒DNA序列上并无与nif或hup序列有同源性的成份