利用FRET技术研究Hepcidin 和Fpn 相互作用

中国生物工程杂志

2011, Vol. 31

Issue (01): 56-60

技术与方法

利用FRET技术研究Hepcidin 和Fpn 相互作用

刘晓志^1,2, 赵会景³, 陈伟斌^1,2, 常彦忠¹, 段相林¹

1. 河北师范大学分子神经生物学及神经药理学研究所石家庄 050016;
2. 华北制药集团新药研究开发中心石家庄 050050;
3. 石家庄市第四十一中学石家庄 050081

The Study of the Interaction Between Hepcidin and Fpn by FRET

LIU Xiao-zhi^1,2, ZHAO Hui-jing³, CHEN Wei-bin^1,2, CHANG Yan-zhong¹, DUAN Xiang-lin¹

1. The Institute of Molecular Neurobiology and Neurpharmacology, Hebei Normal University, Shijiazhuang 050016, China;
2. North China Pharmaceutical Group, New Drug Research and Development Center, Shijazhuang 050050, China;
3. The NO.41 Middle School of Shijiazhuang City, Shijazhuang 050081, China

全文: PDF(495 KB) HTML

摘要：

铁是生命必需的微量元素,ferroportin(Fpn)是小肠吸收细胞铁释放的重要蛋白。新近发现肝脏分泌的抗菌多肽 hepcidin 具有调节肠铁吸收的重要作用,但目前尚缺少Fpn和hepcidin发生作用的实验依据。应用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer ,FRET)对hepcidin和Fpn之间的作用关系进行了深入研究。首先进行了hepcidin-CF P融合蛋白表达载体的构建及表达鉴定;然后对含YFP,Fpn-YFP基因动物细胞表达载体的构建、表达和FRET检测。实验结果证实hepcidin和Fpn之间存在直接的相互作用,并发现两种蛋白发生相互作用后hepcidin也在细胞质中有分布。为临床治疗铁代谢紊乱性疾病提供了新的治疗策略和重要理论依据。

关键词： 荧光共振能量转移(FRET); 铁调素(hepcidin); Fpn(ferroportin)

Abstract:

Iron is an essential trace element of life, ferroportin (Fpn) is the intestinal absorption of iron release of important cell proteins. Newly discovered antimicrobial peptide hepcidin secreted by the liver can regulate the important role of intestinal iron absorption, but still play a role in the lack of Fpn and experimental basis for hepcidin. So fluorescence resonance energy transfer technology (fluorescence resonance energy transfer, FRET) on the role of hepcidin and Fpn relationship between the depth study. First of all, were hepcidin-CFP fusion protein expression vector and identification; then with YFP, Fpn-YFP gene in animal cell expression vector, expression, and FRET detection. The results confirmed that hepcidin and Fpn direct interaction between, and found that two proteins interact in the cytoplasm after the distribution of hepcidin also. The results for the treatment of disorders of iron metabolism to provide a new and important theoretical basis for therapeutic strategies.

Key words: Fluorescence resonance energy transfer(FRET) Hepcidin Ferroportin(Fpn)

收稿日期: 2010-08-12 出版日期: 2011-01-25

ZTFLH:

Q78

基金资助:

国家自然科学基金(30870265)、河北省自然科学基金(C2010000410)资助项目

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引用本文:

刘晓志, 赵会景, 陈伟斌, 常彦忠, 段相林. 利用FRET技术研究Hepcidin 和Fpn 相互作用[J]. 中国生物工程杂志, 2011, 31(01): 56-60.

LIU Xiao-zhi, ZHAO Hui-jing, CHEN Wei-bin, CHANG Yan-zhong, DUAN Xiang-lin. The Study of the Interaction Between Hepcidin and Fpn by FRET. China Biotechnology, 2011, 31(01): 56-60.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/ 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2011/V31/I01/56

[1] Durand P Y.Iron therapy: is it different with peritoneal dialysis compared to haemodialysis?. Nephrol Ther, 2006, 2 Suppl 5: 341-346.

[2] Wallace D F, Dixon J L, Ramm G A, et al. A novel mutation in ferroportin implicated in iron overload. Journal of Hepatology, 2007, 46(5): 921-926.

[3] Atanasiu V, Manolescu B, Stoian I. Hepcidin--central regulator of iron metabolism. Eur J Haematol, 2007, 78(1): 1-10.

[4] Chaudhuri S, Banerjee A, Basu K, et al. Interaction of flavonoids with red blood cell membrane lipids and proteins: Antioxidant and antihemolytic effects. International Journal of Biological Macromolecules, 2007, 41(1): 42-48.

[5] Ji D, Lv W, Huang Z, et al. Fluorescence resonance energy transfer imaging of CFP/YFP labeled NDH in cyanobacterium cell.Journal of Luminescence, 2007, 122-123(2007): 463-466.

[6] Chirio-lebrun M C, Prats M. Fluorescence resonance energy transfer (FRET): theory and experiments. Biochemical Education, 1998, 26(4): 320-323.

[7] Slimane T A, Fontanges P, Trugnan G. GFP, FRAP, FLIP, FRET, PRIM, FLASH ect.New microscopic techniques using new fluorescent probes. An overview. Biology of the Cell, 1999, 91(3): 227-228.

[8] Munishkina L A, Fink A L. Fluorescence as a method to reveal structures and membrane-interactions of amyloidogenic proteins. Biochimica Biophys Acta,2007,1768(8):1862-1885.

[9] Theodorsson E. Haemochromatosis, hepcidin and disorders of iron metabolism: fields of substantial clinical relevance and current advances.. Scand J Clin Lab Invest, 2006, 66(2): 79-82.

[10] Chen Y, O’Donoghue M B, Huang Y F, et al. A surface energy transfer nanoruler for measuring binding site distances on live cell surfaces. Journal of American Chemical Society,2010,132(46):16559-16570.

[1]	徐登安, 赵纯钦, 张赤红, 陈静. *大麦水孔蛋白基因HvTIP2;1及其启动子的表达特性分析*[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(7): 15-21.
[2]	温赛, 杨建国. 地衣芽孢杆菌原生质体电转化方法的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(7): 76-82.
[3]	高珊, 陈炜, 于磊, 李静, 孙彩显, 高杰, 刘牧. 小鼠和大鼠的胚胎培养基及若干相关问题[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(7): 83-93.
[4]	张旭宁, 权春善, 廖颖玲, 柳科欢, 熊文, 范圣第. 金黄色葡萄球菌双组分系统反应调节蛋白AgrA的原核表达、纯化及活性鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(5): 32-40.
[5]	高越, 檀硕, 任兆瑞, 张敬之. 原位染色检测慢病毒载体转录通读方法的建立[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(5): 55-60.
[6]	郭兆来, 白学贵, 严金平, 陈宣钦, 李昆志, 徐慧妮. *菠菜SoHb基因的原核表达及功能分析*[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(4): 54-59.
[7]	房战, 徐美娟, 饶志明, 满在伟, 许正宏, 耿燕, 陆茂林. 过量表达钝齿棒杆菌柠檬酸合酶编码基因prpC2对L-精氨酸合成的影响[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(3): 49-55.
[8]	蒋延超, 蒋世云, 傅凤鸣, 黄凯, 康星欣, 徐丹. 透明质酸生物合成途径及基因工程研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(1): 104-110.
[9]	艾君, 姜潮, 刘敏, 王晓艳, 田海山, 李校堃. 拟南芥双油体蛋白融合表达KGF-2及其生物学活性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(1): 21-26.
[10]	郝梓凯, 李丕武, 郝昭程, 陈利飞. *敲除frdB基因对大肠杆菌厌氧混合酸发酵的影响*[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(11): 67-75.
[11]	柴玉琼, 张玉红, 韩凝, 朱睦元. 植物维生素E基因工程研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(11): 100-106.
[12]	吴花拉, 张严玲, 罗旭, 葛飞, 潘光堂, 沈亚欧. 位点特异性重组系统及其在植物转基因研究中的应用[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(11): 107-118.
[13]	马义, 罗天杰, 洪岸. 新型重组VPAC2激动剂RD的制备及促进胰岛素功能的分子机制[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(11): 60-66.
[14]	李尤简, 张国奇, 郭吉星, 陈新凯, 豆晓霞, 陈创夫, 盛金良. 绵羊肌肉生长抑制素MSTN原核表达及其纳米抗体文库的构建与鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(9): 87-93.
[15]	唐存多, 史红玲, 唐青海, 焦铸锦, 阚云超, 邬敏辰, 李剑芳. 生物催化剂发现与改造的研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(9): 113-121.

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