大容量人天然抗体库的构建、鉴定及初步应用

中国生物工程杂志

2005, Vol. 25

Issue (10): 17-24

论文

大容量人天然抗体库的构建、鉴定及初步应用

唐晓明^1,2, 王清明¹, 杨俊涛¹, 陈吉中¹, 范国才¹, 汪思应²

1. 军事医学科学院放射医学研究所, 北京 100850;
2. 安徽医科大学, 合肥 230032

^1,2

全文: PDF(560 KB) HTML

摘要：

从未经主动免疫的健康志愿者的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,得到了6种VH家族基因,11种VL家族基因,这些抗体基因家族覆盖了人抗体基因多样性的95%以上。采用改进的SOEPCR法将VH基因和VL基因连接成人单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,将连接产物电转化大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7超感染,构建了库容为5.58×109的噬菌体单链抗体库。采用BstNI酶切法证明,构建的噬菌体单链抗体库具有良好的多样性。以TNF-α为靶,从该抗体库中筛选到了抗TNF-α抗体,这说明该抗体库可用于人源抗体的筛选。

关键词： 单链抗体(scFv); 噬菌体抗体库; 重叠延伸拼接

收稿日期: 2005-04-20 出版日期: 2005-10-25

	服务
	把本文推荐给朋友
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章

引用本文:

唐晓明, 王清明, 杨俊涛, 陈吉中, 范国才, 汪思应. 大容量人天然抗体库的构建、鉴定及初步应用[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(10): 17-24.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I10/17

[1]	王晓娜, 米志强, 安小平, 李建彬, 范华昊, 张文慧, 张博, 黄勇, 周丽君, 童贻刚. 从大容量噬菌体抗体库中筛选抗Acr蛋白人源单链抗体[J]. 中国生物工程杂志, 2012, 32(09): 22-27.
[2]	周敏石必枝顾健人李宗海. 抗EGFRvIII噬菌体抗体库的构建和筛选[J]. 中国生物工程杂志, 2010, 30(04): 1-7.
[3]	李平邓省亮于洪侠杨曙明. 半抗原特异性抗体的筛选及亲和力成熟[J]. 中国生物工程杂志, 2010, 30(02): 105-108.
[4]	魏薇包福祥何金生付远辉王小波郑娴娴张莹. 抗呼吸道合胞病毒融合蛋白单链抗体的筛选及初步鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2009, 29(09): 0-0.
[5]	杜丽,周丽君,潘秀颉,王豫,王欲晓,杨陟华,徐勤枝,张士猛,朱茂祥,周平坤. 从大容量噬菌体抗体库中筛选抗DNA-PKcs单链抗体[J]. 中国生物工程杂志, 2008, 28(9): 20-26.
[6]	王尚资, 尹长城, 于文功, 管华诗, 黄华樑. 噬菌体抗体库技术与高通量筛选抗体[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(2): 9-12.
[7]	吴小平, 阎锡蕴. 噬菌体抗体库技术制备高亲和力人抗体[J]. 中国生物工程杂志, 2002, 22(3): 29-32.

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed